Pokrok v genomické analýze mykobakterií včetně M. tuberculosis (Mtb) umožnil nalézt pro Mtb specifické antigeny ESAT-6 a CFP-10, které indukují silný interferon-gama (IFN-gama) senzibilizovaných T-buněk. Krátce po objevu těchto antigenů byly vyvinuty diagnostické testy na infekci tuberkulózou (TB) využívající tyto antigeny. Vzhledem k tomu, že ESAT-6 a CFP-10 nejsou přítomny u všech subkmenů BCG a většiny netuberkulózních mykobakterií, nejsou tyto diagnostické testy spojeny s očkováním BCG a infekcí většiny netuberkulózních mykobakterií. Tyto diagnostické testy se nazývají testy uvolňování interferonu gama (IGRA) a v současné době jsou komerčně dostupné dva testy. Jeden z nich, QuantiFERON-TB Gold (v Japonsku se nazývá QuantiFERON TB-2G, QFT-2G) založený na metodě ELISA, byl schválen v Japonsku a druhý je T-SPOT. TB, který je založen na metodě ELISPOT a dosud nebyl v Japonsku schválen. Obecně platí, že T-SPOT. TB se ukázala být citlivější než QFT-2G, schválení T-SPOT. TB v Japonsku se očekává. V oblasti IGRA je však třeba vyřešit mnoho otázek, protože tyto testy se u nás teprve začínají používat. V loňském roce byl publikován článek, který tyto otázky integroval a který by byl užitečný. Na tomto minisympoziu Dr. Peter Andersen informoval o pokroku ve vývoji diagnostických testů tuberkulózní infekce, o možnosti rozlišit aktivní TBC a latentní TBC infekci (LTBI), což současné IGRA neumožňují, a o prognostickém využití IGRA (O japonském obsahu referovali předsedající). Dr. Ariga informoval o použití QFT-2G pro jiné vzorky než krev. Informoval také o zajímavých údajích o tom, které T-buňky reagují při QFT-2G. Dr. Higuchi obsáhle informoval o údajích týkajících se několika otázek v testu QFT-2G. V současné době se používání IGRA rychle rozšiřuje. Za této situace by bylo velmi důležité správně pochopit vlastnosti IGRAs. Doufáme, že toto minisympozium může pomoci k pochopení těchto otázek. 1. Testy uvolňování interferonu gama (IGRA) a antigeny pro detekci latentní infekce a predikci onemocnění: Peter ANDERSEN (Oddělení imunologie infekčních nemocí a Centrum pro výzkum vakcín SSI, Statens Serum Institut, Dánsko) Jednou z nejdůležitějších výzev v celosvětové kontrole tuberkulózy je diagnostika a léčba latentní tuberkulózní infekce. V současnosti používaná metoda detekce latentní tuberkulózní infekce, tuberkulinový kožní test, má nízkou specificitu. Identifikace antigenů specifických pro Mycobacterium tuberculosis, které by nahradily purifikovaný proteinový derivát, je proto jednou z hlavních mezinárodních výzkumných priorit. Provedli jsme důkladné posouzení diagnostického potenciálu antigenů, které chybí u vakcinačních kmenů M. bovis bacille Calmette-Guérin a také u většiny netuberkulózních mykobakterií. Identifikovali jsme tři antigeny s významným diagnostickým potenciálem: ESAT-6, CFP-10 a TB 7.7. Tyto antigeny se v současné době používají v testech IGRA, jako je QuantiFERON, které měří produkci interferonu gama ze senzibilizovaných T lymfocytů, čímž signalizují probíhající infekci. V EU, USA a Japonsku, kde tyto testy vstoupily na trh, se rychle ukázala hodnota tohoto přístupu při vysledování kontaktů. Navrhnu, že tyto testy lze modifikovat tak, aby identifikovaly jedince mezi latentně infikovanými, u nichž je největší riziko rozvoje aktivní nakažlivé TBC. Cílená léčba této části populace nabízí možnost zabránit TBC dříve, než se stane infekční, což by výrazně přispělo ke konečné kontrole této celosvětové epidemie. 2. Imunitní odpovědi specifické pro antigen M. tuberculosis – periferní krev a místa zánětu: Haruyuki ARIGA (National Hospital Organization Tokyo National Hospital) Abychom vyvinuli přesnější metodu pro diagnostiku aktivní tuberkulózní pleuritidy, jakož i peritonitidy, meningitidy a perikarditidy tuberkulózního původu, zavedli jsme test na uvolňování antigenu specifického pro interferon-gamma (IFN-gamma) pomocí vzorků tekutiny z dutiny ústní. Předmětem studie bylo 30 pacientů s bakteriologicky potvrzenou aktivní tuberkulózní serozitidou a 49 pacientů s definitivní netuberkulózní etiologií. Kultivace byla prováděna po dobu 18 hodin s mononukleárními buňkami tekutiny v supernatantu výpotku spolu s fyziologickým roztokem nebo antigenními peptidy specifickými pro Mycobacterium tuberculosis, časným sekrečním antigenním cílem 6 a proteinem 10 kultivačního filtrátu. Koncentrace IFN-gama v kultivačním supernatantu byly měřeny metodou ELISA. U pacientů s aktivní tuberkulózní serozitidou byly antigenně specifické odpovědi IFN-gamma vzorků dutinové tekutiny významně vyšší než u vzorků netuberkulózního výpotku. Plocha pod křivkou operačních charakteristik přijímače byla významně větší pro odpověď IFN-gamma v dutinové tekutině než pro adenosin deaminázu v dutinové tekutině a test uvolňování IFN-gamma v celé krvi. Test uvolňování IFN-gamma v dutinové tekutině by mohl být neinvazivní metodou pro přesnou a rychlou diagnostiku tuberkulózní serozitidy u pacientů, u nichž je klinické podezření na aktivní tuberkulózu v dutinovém prostoru, ale u nichž nelze získat bakteriologický důkaz. 3. Několik otázek v IGRA: Kazue HIGUCHI (Výzkumný ústav tuberkulózy, Japonská protituberkulózní asociace). Přestože v revidovaných pokynech pro kontaktní vyšetřování z minulého roku bylo doporučeno používat QFT-2G, v QFT-2G je několik otázek. Na tomto minisympoziu byly prezentovány údaje o několika otázkách v testu QFT-2G. Patřilo k nim použití QFT-2G u zranitelných osob v imunitním systému, jako jsou kojenci a HIV pozitivní, vliv chemoterapie na test QFT-2G, prognóza rozvoje aktivní TBC pomocí QFT-2G, další generace QFT-2G, zajištění kvality testu QFT-2G a některé problémy současného testu QFT-2G. Důležitý by měl být výzkum těchto otázek a zlepšení IGRA na základě základních imunologických poznatků.