Abstrakt
Kandidóza dutiny ústní je způsobena houbami rodu Candida a je jednou z nejčastějších oportunních houbových infekcí dutiny ústní u člověka. Vzhledem ke klinické variabilitě tohoto onemocnění jsou pro klinické potvrzení často nutné mikrobiologické techniky a také stanovení diferenciální diagnózy s jinými onemocněními. Cílem této krátké technické zprávy je ilustrovat jednoduchou metodu na křesle, která může poskytnout okamžitou mikroskopickou diagnózu tohoto onemocnění. Uvádíme případ 14letého chlapce, který trpěl erytematózní stomatitidou související s protézou, diagnostikovanou a sledovanou pomocí zjednodušené techniky přímé mikroskopie. Ta umožňuje přesnou diagnózu neinvazivní a bezbolestnou metodou odběru vzorků spojenou s laboratorními výsledky.
1. Úvod
Orální kandidóza je způsobena houbami rodu Candida a je jednou z nejčastějších oportunních houbových infekcí dutiny ústní člověka. V ústní dutině bylo izolováno sto padesát druhů tohoto rodu, z nichž 80 % odpovídá rodu Candida albicans . Kandidová infekce v dutině ústní může být akutní nebo chronická a klasifikuje se jako pseudomembranózní nebo erytematózní. Orální kandidóza představuje jedno z nejčastějších onemocnění sliznic, neboť se v ní mohou vyskytovat všechny typy infekce . Zvýšený výskyt infekce může souviset s různými predispozičními faktory, jako je dlouhodobá léčba antibiotiky, podvýživa, endokrinní poruchy, infekce HIV, xerostomie, kouření, špatná ústní hygiena a používání protetických náhrad . Obvykle je diagnóza orální kandidózy založena na klinických příznacích a obvykle je jednoduchá v případech akutní pseudomembranózní kandidózy, zejména u kojenců. Vzhledem ke klinické variabilitě tohoto onemocnění jsou však často nutné mikrobiologické metody pro klinické potvrzení a také stanovení diferenciální diagnózy s jinými onemocněními. Navíc v případech vyznačujících se rezistencí na antimykotika, zejména u chronických pacientů, může být přínosem další mikrobiologické vyšetření. V současné době se k izolaci a identifikaci druhů Candida používá několik metod, včetně přímé mikroskopie stěrů, barvení, kultivace a genetických metod (PCR) . Testují se také nové identifikační metody, které umožňují rychlou a přesnou detekci . Nedávný přehled literatury prokázal výhody přímé mikroskopie při diagnostice orální kandidózy u dětí a dospívajících . Cílem této krátké odborné zprávy je ilustrovat jednoduchou metodu na křesle, která může poskytnout okamžitou mikroskopickou diagnózu tohoto onemocnění.
2. Kazuistika
Pro ilustraci této metody uvádíme případ 14letého chlapce, který trpěl erytematózní stomatitidou související s protézou (obrázek 1). Stomatitida související se zubní náhradou je definována jako zánětlivý proces ústní sliznice pod snímatelnou zubní náhradou. U mladých pacientů může být stomatitida související se zubní náhradou způsobena komplikací dětské protetické náhrady nebo se může objevit během dlouhodobé ortodontické léčby snímatelným materiálem. Tato patologie byla popsána u dětí i dospívajících a byly navrženy metody diagnostiky a léčby . V tomto případě byl po dobu dvou let nošen snímatelný ortodontický aparát ke kompenzaci ageneze zubů.
Klasický mikroskopický postup obvykle zahrnuje odběr reprezentativního vzorku z infikovaného místa (exfoliativní cytologie), který se přenese na mikroskopické sklíčko a ošetří hydroxidem draselným (KOH), barvením podle Grama nebo barvením periodickou kyselinou Schiffovou (PAS). Byl proveden odběr vzorku, který byl odeslán do laboratoře ke kultivaci, a výsledek byl pozitivní na Candida albicans.
Pro srovnání jsme uvedli zjednodušenou, přímou mikroskopickou metodu. Při této metodě byly pacientovi odebrány sliny na dně úst. Intraorální zrcátko bylo umístěno vodorovně pod jazykem, v kontaktu se sliznicí. Když sliny pokryly zrcátko, byly vyjmuty z úst a položeny na sklíčko (obrázek 2 a)). Následně byl vzorek odebrán sterilní sondou umístěnou přímo do slin pacienta (obrázek 2(c)) a bylo namontováno krycí sklíčko. Důležité je poznamenat, že oblast sulku je optimálním místem pro odběr vzorku touto metodou (obrázek 2(b)). Lékař by měl prstem zatlačit na sklíčko, aby se vzorek rozprostřel. Vzorek byl poté analyzován pod optickým mikroskopem s fázovým kontrastem (obrázek 2(d)). Nejzajímavější je zvětšení ×1000, protože umožňuje odlišit nepatogenní formy kvasinek od oportunních hyf. Za patologických podmínek je na každém stínítku viditelných několik hyf smíšených s orálními bakteriemi a buňkami (obrázek 3). Důležité je, že tato metoda je cenná pro stanovení účinnosti léčby. Léčba spočívala ve 3týdenní lokální léčbě antimykotikem (amfotericin B) a v úpravě protetického aparátu za fixní. Další laboratorní analýza pomocí kultivace byla negativní. Při dvouletém sledování byla stejným postupem zjištěna normalizace ústní flóry s absencí hyf (obrázek 4b), spojená s klinickým zlepšením (obrázek 4a).
(a)
(b)
(c)
(d)
.
(a)
(b)
(c)
(d)
3. Závěr
Přímá mikroskopie se v laboratořích široce používá k diagnostice kandidózy. Umožňuje přesnou diagnózu neinvazivní a bezbolestnou metodou odběru vzorků, která je vhodná zejména pro mladé pacienty. Klasický postup, který zahrnuje odběr vzorku a jeho odeslání do laboratoře, vyžaduje více času a nákladů. Zde prezentovaná metoda navíc nevyžaduje žádnou fixaci ani úpravu vzorku. Jedná se tedy o nákladově efektivní způsob, jak vyšetřit ústní mikrobiotu pacienta a určit případnou nerovnováhu. Přestože přímá mikroskopie není tak specifická jako kultivace, jeví se jako postup volby pro diagnostiku první volby. Samozřejmě zůstává naprosto nezbytné kompletní klinické vyšetření, stejně jako rozsáhlá anamnéza, aby bylo možné prozkoumat jakékoli související celkové onemocnění. Tento přístup navíc vyžaduje zkušenosti s detekcí kvasinek pomocí mikroskopického pozorování, což není v rámci klinických lékařů průřezová kompetence. Identifikace však není příliš obtížná a jednoduchá, krátkodobá formace může být dostačující. Tímto způsobem bude mít k této metodě přístup stále více praktických lékařů; proto další povědomí o této jednoduché mikroskopické analýze umožní klinikům provést okamžitou diagnózu na křesle. Navíc, stejně jako tomu bylo v případě intraorálních kamer, mohou být vzhledem k pokroku mikroskopických přístrojů začleněny do konceptu péče zaměřené na člověka jako prvek vzdělávání a prevence pro pochopení diagnóz a informované rozhodování o léčbě . Potenciální vývoj mikroskopů na bázi chytrých telefonů umožní lékařům snadnější přístup k mikroskopování. Mikroskopy na bázi chytrých telefonů se již používají k detekci parazitů nebo k získání snímků živých buněk . Jedná se o slibný přístup, který v budoucnu umožní provádět přesnou diagnostiku na křesle.
Etické schválení
Všechny postupy prováděné ve studii zahrnující lidské účastníky byly v souladu s etickými normami Toulouské univerzity a s Helsinskou deklarací z roku 1964 a jejími dodatky.
Souhlas
Od všech pacientů a jejich rodičů byl získán informovaný souhlas. Všichni autoři dali souhlas s publikací.
Konflikty zájmů
Autoři prohlašují, že nejsou ve střetu zájmů.
.