7.2.1.5 Wad Medani Virus
Historie. Virus Wad Medani (WMV) byl původně izolován R. M. Taylorem a jeho spolupracovníky z klíštěte Rhipicephalus sanguineus (čeleď Ixodidae, podčeleď Rhipicephalinae), které bylo odebráno ovcím poblíž vesnice Wad Medani (Súdán, Afrika) v listopadu 1952. Na základě sérologických vlastností byl WMV zařazen do Kemerovské antigenní skupiny (čeleď Reoviridae, rod Orbivirus).1,2 Později bylo izolováno více než 20 kmenů WMV z jiných druhů klíšťat: H. anatolicum (Írán, Pákistán); H. marginatum (Indie); Amblyomma cajennense (Jamajka); Rh. Microplus, dříve Boophilus microplus) (Malajsie); a Rh. guilhoni a Rh. evertsi (čeleď Ixodidae, podčeleď Rhipicephalinae) (oba druhy se vyskytují v Súdánu, Egyptě, Senegalu, Indii, Pákistánu, Íránu a na Jamajce).1,3
Taxonomie. Genom orbivirů má 10 segmentů dsRNA, které kódují sedm strukturních (VP1-VP7) a čtyři nestrukturní (NS1-NS4) proteiny.4 Vědci sekvenovali genom kmene LEIV-8066Tur (GenBank ID, KJ425426-35), izolovaného z klíštěte H. asiaticum v okrese Baharly v Turkmenistánu. Nejkonzervativnějším proteinem orbivirů je RdRp (Pol, VP1). Porovnání aminokyselinových sekvencí VP1 viru WMV v plné délce se sekvencemi ostatních orbivirů přenášených klíšťaty odhalilo 54% identitu. Fylogenetická analýza založená na srovnání aminokyselinových sekvencí VP1 (Pol), VP3 (T2) a VP7 (T13) orbivirů v plné délce je uvedena na obrázku 7.1. Hlavní antigenní determinanty orbivirů se nacházejí na třech bílkovinách vnější a vnitřní vrstvy kapsidy. Nejvíce se liší proteiny VP2 a VP5. Protein VP2 tvoří vnější vrstvu kapsidy a nese hlavní neutralizační a receptorová vazebná místa. Kromě toho je protein VP2 jedním z faktorů virulence orbivirů. Podobnost aminokyselinových sekvencí VP2 viru WMV se sekvencemi ostatních arbovirů přenášených klíšťaty je 26-30 %. Podobnost proteinu VP5 viru WMV s proteiny ostatních orbivirů přenášených klíšťaty je v průměru 45 %. Ze strukturních proteinů je nejkonzervativnější VP3 (T2), který tvoří vnitřní vrstvu kapsidy. Protein VP7 (T13) se podílí na interakci viru s buňkou a stejně jako protein VP2 je jedním z faktorů virulence, který určuje zejména infekčnost virionu. V neporušeném virionu jsou antigenní epitopy VP7 (T13) skryté, a proto nemohou být blokovány neutralizačními protilátkami. VP7 (T13) má skupinově a druhově specifické antigenní determinanty. Podobnost aminokyselinových sekvencí VP7 (T13) viru WMV se sekvencemi orbivirů přenášených komáry je 46 % a se sekvencemi virů přenášených klíšťaty je 67 %.
Genomický segment 9 orbivirů kóduje virový enzym VP6 (Hel), který má vazbu RNA a helikázovou aktivitu. Podobnost VP6 (Hel) viru WMV s ostatními orbiviry přenášenými klíšťaty se pohybuje v rozmezí 36-38 %. Bylo prokázáno, že segment 9 GIV, BAKV a BTV má další ORF, který kóduje protein označovaný VP6a nebo NS4 s neznámou funkcí. Stejně jako ostatní klíšťaty přenášené orbiviry i WMV kóduje ORF VP6a. Je třeba poznamenat, že ačkoli aminokyselinové sekvence VP6a virů GIV, BAKV a WMV mají nízkou úroveň podobnosti (20-30 %), jsou stejně velké (195 aa) a mají dva uzavřené start kodony. Délka ORF VP6a u arbovirů přenášených klíšťaty je téměř dvakrát větší než u BTV.5 Fylogenetická analýza uvedená na obrázku 7.1, analýza založená na srovnání strukturních a nestrukturních proteinů orbivirů, ukazuje, že topologie WMV na stromu potvrzuje zařazení viru do antigenní skupiny B rodu Orbivirus.
Epizootiologie. Protilátky proti WMV byly nalezeny u velbloudů a buvolů.1 Dva kmeny viru Seletar, který je blízce příbuzný WMV, izoloval A. Rudnik z klíšťat B. microplus, sebraných v oblasti Seletar v Singapuru v lednu 1961. Vzhledem k tomu, že B. microplus je jednohostitelské klíště, které tráví celý svůj život na jediném hostiteli, zdá se, že pro zachování virové populace je nutný transovariální přenos.5,6 Během virologického sledování různých ekosystémů v severní Eurasii bylo izolováno 14 kmenů WMV: 10 kmenů v Turkmenistánu,7-11 2 v Kazachstánu,12-16 1 v Tádžikistánu a 1 v Arménii.17-19
V Turkmenistánu byly všechny kmeny WMV izolovány z klíšťat H. asiaticum odebraných ovcím a velbloudům buď v okrese Ýolöten provincie Mary (v semiaridní krajině), nebo v okrese Baharly provincie Ahal (v aridní krajině) v letech 1972, 1973 a 1981.7-10 V Kazachstánu byly dva kmeny izolovány z H. asiaticum v aridní krajině okresu Balchaš (provincie Almaty) v roce 1977. Podíl infikovaných ixodidů byl odhadnut na 0,094 %.12-16 V Tádžikistánu byl jeden kmen WMV izolován z klíšťat H. anatolicum. Tato klíšťata tvořila 76,5 % všech ixodidů na tomto území a podíl infikovaných klíšťat H. anatolicum dosáhl 0,002 %.17,19 V suchém klimatu jižní části Tádžikistánu se může během roku vyvinout jedna nebo dvě generace ixodidů. Virus WMV byl izolován z hladových, přezimujících imág, která vykazovala transstadiální přenos viru.13,17 Experimentální infekce telat ukázala, že úroveň virémie WMV je dostatečná k infekci larev H. anatolicum, které následně přenesly virus na imága, jež zajišťují aktivitu a stabilitu přirozených ohnisek WMV.20 Imunita vůči WMV u lidské populace v jižním Tádžikistánu dosahuje 7,8-10,3 %, zatímco v severních provinciích nepřesahuje 2,1 %.20,21 V Zakavkazsku byl WNV izolován z klíšťat H. asiaticum sebraných v roce 1985 poblíž Nachičevanu v Ázerbájdžánu.18 Výsledky získané izolací WMV v Kazachstánu, Střední Asii a Zakavkazsku naznačují, že klíšťata H. asiaticum a H. anatolicum hrají hlavní roli při udržování přirozených ohnisek viru v pastevních biocenózách a v aridní a semiaridní krajině.
Epidemiologie. Nic nenasvědčuje tomu, že by virus WMV byl patogenní pro člověka.