[Udvikling af IGRA-forskning]

Fremskridtene inden for genomisk analyse af mycobakterier, herunder M. tuberculosis (Mtb), gjorde det muligt for os at finde Mtb-specifikke antigener, ESAT-6 og CFP-10, som inducerer stærkt interferon-gamma (IFN-gamma) fra sensibiliserede T-celler. Kort efter opdagelsen af disse antigener blev der udviklet diagnostiske test for tuberkulose (TB)-infektion ved hjælp af disse antigener. Da ESAT-6 og CFP-10 ikke findes i alle BCG-substammer og de fleste ikke-tuberkuløse mykobakterier, er disse diagnostiske test ikke forvekslet med BCG-vaccination og infektion af de fleste ikke-tuberkuløse mykobakterier. Disse diagnostiske test kaldes Interferon-Gamma Release Assays (IGRA’er), og der findes i øjeblikket to kommercielt tilgængelige test. Den ene af dem, QuantiFERON-TB Gold (i Japan kaldet QuantiFERON TB-2G, QFT-2G) baseret på ELISA-metoden, er blevet godkendt i Japan, og den anden er T-SPOT. TB, som er baseret på ELISPOT-metoden og endnu ikke er blevet godkendt i Japan. Som generelt T-SPOT. TB har vist sig at være mere følsom end QFT-2G, er godkendelsen af T-SPOT. TB i Japan forventes at blive godkendt. Der er imidlertid mange spørgsmål, der skal løses i forbindelse med IGRA’er, da vi først lige er begyndt at anvende disse test. Sidste år blev der offentliggjort et dokument, som integrerede disse spørgsmål, og det ville være nyttigt. På dette minisymposium rapporterede Dr. Peter Andersen om fremskridtene i udviklingen af diagnostiske test for tuberkuloseinfektion, muligheden for at skelne mellem aktiv TB og latent TB-infektion (LTBI), hvilket de nuværende IGRA’er ikke gør, og den prognostiske anvendelse af IGRA’er (det japanske indhold blev rapporteret af formændene). Dr. Ariga rapporterede om anvendelsen af QFT-2G til andre prøver end blod. Han redegjorde også for de interessante data om, hvilke T-celler der reagerede på QFT-2G. Dr. Higuchi redegjorde udførligt for data om flere spørgsmål i QFT-2G-testen. I øjeblikket er brugen af IGRA’er i hastig vækst. Under disse omstændigheder ville det være meget vigtigt at forstå IGRA’ernes karakteristika korrekt. Vi håber, at dette mini-symposium kan bidrage til at forstå disse spørgsmål. 1. Interferon-Gamma Release Assays (IGRA) og antigener til påvisning af latent infektion og forudsigelse af sygdom: Peter ANDERSEN (Afdeling for Immunologi ved Infektionssygdomme og SSI Center for Vaccine Research, Statens Serum Institut, Danmark) En af de vigtigste udfordringer i den globale tuberkulosebekæmpelse er diagnosticering og behandling af latent tuberkuloseinfektion. Den i øjeblikket anvendte metode til påvisning af latent tuberkuloseinfektion, tuberkulinhudtest, har en lav specificitet. Identifikation af antigener, der er specifikke for Mycobacterium tuberculosis, som kan erstatte rensede proteinderivater, har derfor været en vigtig international forskningsprioritet. Vi har foretaget en grundig vurdering af det diagnostiske potentiale af antigener, som mangler fra M. bovis bacille Calmette-Guérin-vaccinstammerne samt fra de fleste ikke-tuberkuløse mykobakterier. Vi har identificeret tre antigener med et stort diagnostisk potentiale: ESAT-6, CFP-10 og TB 7.7. Disse antigener anvendes i øjeblikket i IGRA-tests som f.eks. QuantiFERON, der måler produktionen af interferon-gamma fra sensibiliserede T-lymfocytter og dermed signalerer igangværende infektion. I EU, USA og Japan, hvor disse test er kommet på markedet, er værdien af denne fremgangsmåde i forbindelse med kontaktopsporing hurtigt blevet tydelig. Jeg vil foreslå, at sådanne test kan modificeres til at identificere de personer blandt de latent smittede, som har størst risiko for at udvikle aktiv smitsom tuberkulose. Målrettet behandling af denne del af befolkningen giver mulighed for at forebygge tuberkulose, før den bliver smitsom, hvilket i høj grad vil bidrage til en eventuel kontrol med denne globale epidemi. 2. Immunreaktioner, der er specifikke for M. tuberculosis-antigen – perifert blod og betændelsessteder: Haruyuki ARIGA (National Hospital Organization Tokyo National Hospital) For at udvikle en mere præcis metode til diagnosticering af aktiv tuberkuløs pleuritis samt peritonitis, meningitis og perikarditis af tuberkuløs oprindelse etablerede vi et antigenspecifikt interferon-gamma (IFN-gamma) frigivelsesassay ved hjælp af prøver af hulrumsvæske. Undersøgelsespersonerne var 30 patienter med bakteriologisk bekræftet aktiv tuberkuløs serositis og 49 patienter med definitiv ikke-tuberkuløs ætiologi. Der blev foretaget dyrkning i 18 timer med flydende mononukleære celler i effusionens supernatant sammen med saltvand eller Mycobacterium tuberculosis-specifikke antigenpeptider, early secretory antigenic target 6 og kulturfiltratprotein 10. IFN-gamma-koncentrationerne i kultursupernatanterne blev målt ved hjælp af ELISA. Hos patienter med aktiv tuberkuløs serositis var de antigenspecifikke IFN-gamma-svar i prøver af hulrumsvæske signifikant højere end i prøver af ikke-tuberkuløs effusion. Arealet under den karakteristiske modtagerkurve var signifikant større for hulrumsvæske IFN-gamma-respons end for hulrumsvæske adenosindeaminase og fuldblods IFN-gamma-frigivelsesassay. Hulevæskens IFN-gamma-frigivelsesassay kan være en ikke-invasiv metode til nøjagtig og hurtig diagnosticering af tuberkuløs serositis hos patienter, hvor der er klinisk mistanke om aktiv tuberkulose i hulrummet, men hvor der ikke kan opnås bakteriologisk bevis for dette. 3. Flere spørgsmål i IGRA’er: Kazue HIGUCHI (Research Institute of Tuberculosis, Japan Anti-Tuberculosis Association). Selv om det er blevet anbefalet at anvende QFT-2G til kontaktundersøgelser i den reviderede retningslinje for kontaktundersøgelser sidste år, er der flere spørgsmål i QFT-2G. I dette minisymposium blev der fremlagt data om flere spørgsmål i QFT-2G-testen. Disse omfattede anvendelsen af QFT-2G på sårbare personer i immunsystemet som f.eks. spædbørn og HIV-positive, kemoterapiens indvirkning på QFT-2G-testen, prognosen for udvikling af aktiv TB ved hjælp af QFT-2G, næste generation af QFT-2G, kvalitetssikring af QFT-2G-testen og nogle problemer i forbindelse med den nuværende QFT-2G-test. Det bør være vigtigt at undersøge disse spørgsmål og forbedre IGRA-testene på grundlag af den grundlæggende immunologi.