[Evolución de las investigaciones de IGRA]

El progreso del análisis genómico en las micobacterias, incluyendo M. tuberculosis (Mtb), permitió encontrar los antígenos específicos de Mtb, ESAT-6 y CFP-10, que inducen un fuerte interferón-gamma (IFN-gamma) de las células T sensibilizadas. Poco después del descubrimiento de estos antígenos, se desarrollaron pruebas de diagnóstico para la infección por tuberculosis (TB) utilizando estos antígenos. Dado que la ESAT-6 y la CFP-10 están ausentes en todas las subcepas de BCG y en la mayoría de las micobacterias no tuberculosas, estas pruebas de diagnóstico no se confunden con la vacunación con BCG ni con la infección de la mayoría de las micobacterias no tuberculosas. Estas pruebas de diagnóstico se denominan Ensayos de Liberación de Interferón-Gamma (IGRA), y actualmente hay dos pruebas disponibles en el mercado. Una de ellas, QuantiFERON-TB Gold (llamada QuantiFERON TB-2G en Japón, QFT-2G) basada en el método ELISA ha sido aprobada en Japón, y la otra es T-SPOT. TB, que se basa en el método ELISPOT y aún no ha sido aprobado en Japón. Como en general T-SPOT. TB ha demostrado ser más sensible que el QFT-2G, la aprobación de T-SPOT. TB en Japón. Sin embargo, hay muchas cuestiones por resolver en los IGRA, ya que acabamos de empezar a utilizar estas pruebas. El año pasado se publicó un artículo que integraba estas cuestiones, y que sería de gran ayuda. En este minisimposio, el Dr. Peter Andersen informó de los avances en el desarrollo de las pruebas de diagnóstico de la infección tuberculosa, de la posibilidad de distinguir entre la tuberculosis activa y la infección tuberculosa latente (LTBI), algo que los actuales IGRA no hacen, y del uso pronóstico de los IGRA (los presidentes informaron del contenido japonés). El Dr. Ariga informó de la aplicación del QFT-2G para muestras distintas de la sangre. También informó de los interesantes datos sobre las células T que responden en la QFT-2G. El Dr. Higuchi informó exhaustivamente de los datos sobre varias cuestiones de la prueba QFT-2G. Actualmente el uso de los IGRAs se está expandiendo rápidamente. Bajo esta circunstancia, sería muy importante entender adecuadamente las características de los IGRAs. Esperamos que este minisimposio pueda ayudar a comprender estas cuestiones. 1. Ensayos de liberación de interferón gamma (IGRA) y antígenos para la detección de la infección latente y la predicción de la enfermedad: Peter ANDERSEN (Departamento de Inmunología de Enfermedades Infecciosas y el Centro SSI para la Investigación de Vacunas, Statens Serum Institut, Dinamarca) Uno de los retos más importantes en el control mundial de la tuberculosis es el diagnóstico y el tratamiento de la infección tuberculosa latente. El método actualmente utilizado para la detección de la infección tuberculosa latente, la prueba cutánea de la tuberculina, tiene una baja especificidad. Por ello, la identificación de antígenos específicos de Mycobacterium tuberculosis que sustituyan al derivado proteico purificado ha sido una de las principales prioridades de la investigación internacional. Hemos realizado una evaluación rigurosa del potencial diagnóstico de los antígenos que faltan en las cepas vacunales de M. bovis bacille Calmette-Guérin, así como en la mayoría de las micobacterias no tuberculosas. Hemos identificado tres antígenos con un gran potencial de diagnóstico: ESAT-6, CFP-10 y TB 7.7. Estos antígenos se utilizan actualmente en las pruebas IGRA, como el QuantiFERON, que miden la producción de interferón-gamma de los linfocitos T sensibilizados, señalando así la infección en curso. En la UE, Estados Unidos y Japón, donde estas pruebas han entrado en el mercado, el valor de este enfoque en el rastreo de contactos se ha hecho evidente rápidamente. Sugeriré que estas pruebas pueden modificarse para identificar a los individuos entre los infectados latentes, con mayor riesgo de desarrollar una tuberculosis contagiosa activa. El tratamiento dirigido a esta parte de la población ofrece la posibilidad de prevenir la tuberculosis antes de que se vuelva infecciosa, lo que contribuiría en gran medida al eventual control de esta epidemia mundial. 2. Respuestas inmunitarias específicas para el antígeno de M. tuberculosis: sangre periférica y sitios de inflamación: Haruyuki ARIGA (Organización Hospitalaria Nacional Hospital Nacional de Tokio) Con el fin de desarrollar un método más preciso para diagnosticar la pleuritis tuberculosa activa, así como la peritonitis, la meningitis y la pericarditis de origen tuberculoso, establecimos un ensayo de liberación de interferón-gamma (IFN-gamma) específico para el antígeno utilizando muestras de líquido cavitario. Los sujetos del estudio fueron 30 pacientes con serositis tuberculosa activa confirmada bacteriológicamente y 49 pacientes con etiología definitiva no tuberculosa. El cultivo se realizó durante 18 h con células mononucleares del fluido en el sobrenadante del derrame junto con solución salina o péptidos antigénicos específicos de Mycobacterium tuberculosis, la diana antigénica secretoria temprana 6 y la proteína 10 del filtrado del cultivo. Las concentraciones de IFN-gamma en los sobrenadantes de cultivo se midieron mediante ELISA. En los pacientes con serositis tuberculosa activa, las respuestas de IFN-gamma específicas del antígeno de las muestras de líquido de la cavidad fueron significativamente mayores que las de las muestras de efusión no tuberculosa. El área bajo la curva de características operativas del receptor fue significativamente mayor para la respuesta de IFN-gamma del líquido de la cavidad que para la adenosina deaminasa del líquido de la cavidad y el ensayo de liberación de IFN-gamma en la sangre. El ensayo de liberación de IFN-gamma en líquido cavitario podría ser un método no invasivo para diagnosticar de forma precisa y rápida la serositis tuberculosa en pacientes en los que se sospecha clínicamente una tuberculosis activa en el espacio cavitario pero de la que no se pueden obtener pruebas bacteriológicas. 3. Varias preguntas en los IGRAs: Kazue HIGUCHI (Instituto de Investigación de la Tuberculosis, Asociación Antituberculosa de Japón). Aunque se ha recomendado el uso del QFT-2G para las investigaciones de contacto en la directriz revisada para la investigación de contactos del año pasado, hay varias preguntas en el QFT-2G. En este minisimposio se presentaron datos sobre varias preguntas de la prueba QFT-2G. Entre ellas, la aplicación de la QFT-2G a individuos vulnerables en el sistema inmunitario, como los bebés y los seropositivos, los efectos de la quimioterapia en la prueba QFT-2G, el pronóstico del desarrollo de la tuberculosis activa mediante la QFT-2G, la próxima generación de QFT-2G, la garantía de calidad de la prueba QFT-2G y algunos problemas de la prueba QFT-2G actual. Debería ser importante investigar estas cuestiones y mejorar los IGRA basados en la inmunología básica.