[IGRA-tutkimusten kehitys]

Mykobakteerien, mukaan lukien M. tuberculosis (Mtb), genomianalyysin edistyminen mahdollisti Mtb-spesifisten antigeenien, ESAT-6:n ja CFP-10:n, löytämisen, jotka indusoivat voimakasta interferoni-gammaa (IFN-gamma) herkistyneistä T-soluista. Pian näiden antigeenien löytämisen jälkeen kehitettiin tuberkuloosi-infektion diagnostisia testejä, joissa käytettiin näitä antigeenejä. Koska ESAT-6 ja CFP-10 puuttuvat kaikista BCG:n alatyypeistä ja useimmista muista kuin tuberkuloottisista mykobakteereista, nämä diagnostiset testit eivät ole ristiriidassa BCG-rokotuksen ja useimpien muiden kuin tuberkuloottisten mykobakteerien infektion kanssa. Näitä diagnostisia testejä kutsutaan interferonigammavapautumistesteiksi (IGRA), ja tällä hetkellä on kaksi kaupallisesti saatavilla olevaa testiä. Toinen niistä, ELISA-menetelmään perustuva QuantiFERON-TB Gold (Japanissa sen nimi on QuantiFERON TB-2G, QFT-2G), on hyväksytty Japanissa, ja toinen on T-SPOT. TB, joka perustuu ELISPOT-menetelmään ja jota ei ole vielä hyväksytty Japanissa. Kuten yleensä T-SPOT. TB:n on osoitettu olevan herkempi kuin QFT-2G, T-SPOT. TB:n hyväksyminen Japanissa on odotettavissa. IGRA-testien osalta on kuitenkin vielä monia kysymyksiä ratkaistavana, koska olemme vasta aloittaneet näiden testien käytön. Viime vuonna julkaistiin asiakirja, jossa nämä kysymykset on koottu yhteen, ja siitä olisi apua. Tässä minisymposiumissa tohtori Peter Andersen kertoi tuberkuloosi-infektion diagnostisten testien kehityksen edistymisestä, mahdollisuudesta erottaa toisistaan aktiivinen tuberkuloosi ja latentti tuberkuloosi-infektio (LTBI), mitä nykyiset IGRA-testit eivät tee, sekä IGRA-testien prognostisesta käytöstä (Japanin sisällöstä kertoivat puheenjohtajat). Tohtori Ariga kertoi QFT-2G:n soveltamisesta muihin näytteisiin kuin vereen. Hän kertoi myös mielenkiintoisia tietoja siitä, mitkä T-solut vastasivat QFT-2G:hen. Tohtori Higuchi kertoi kattavasti tietoja useista QFT-2G-testin kysymyksistä. IGRA-testien käyttö laajenee tällä hetkellä nopeasti. Tässä tilanteessa olisi erittäin tärkeää ymmärtää kunnolla IGRA-testien ominaisuudet. Toivomme, että tämä minisymposium voi auttaa ymmärtämään näitä kysymyksiä. 1. Interferoni-Gamma Release Assays (IGRA) ja antigeenit latentin infektion havaitsemiseksi ja taudin ennustamiseksi: Peter ANDERSEN (Tartuntatautien immunologian osasto ja SSI Centre for Vaccine Research, Statens Serum Institut, Tanska) Yksi tuberkuloosin maailmanlaajuisen valvonnan tärkeimmistä haasteista on latentin tuberkuloosi-infektion diagnosointi ja hoito. Nykyisin käytetty menetelmä piilevän tuberkuloosi-infektion toteamiseksi, tuberkuliinin ihotesti, on spesifisyydeltään heikko. Mycobacterium tuberculosis -bakteerille spesifisten antigeenien tunnistaminen puhdistetun proteiinijohdannaisen korvaamiseksi on siksi ollut yksi tärkeimmistä kansainvälisistä tutkimuskohteista. Olemme suorittaneet perusteellisen arvioinnin sellaisten antigeenien diagnostisesta potentiaalista, jotka puuttuvat M. bovis bacille Calmette-Guérin -rokotekannoista sekä useimmista muista kuin tuberkuloottisista mykobakteereista. Olemme tunnistaneet kolme antigeenia, joilla on suuri diagnostinen potentiaali: ESAT-6, CFP-10 ja TB 7.7. Näitä antigeenejä käytetään tällä hetkellä IGRA-testeissä, kuten QuantiFERON-testeissä, joilla mitataan interferoni-gamma-tuotantoa herkistyneistä T-lymfosyyteistä, mikä on merkki meneillään olevasta infektiosta. EU:ssa, Yhdysvalloissa ja Japanissa, joissa nämä testit ovat tulleet markkinoille, tämän lähestymistavan arvo kontaktien jäljittämisessä on käynyt nopeasti ilmeiseksi. Ehdotan, että tällaisia testejä voidaan muuttaa siten, että niillä voidaan tunnistaa latentisti tartunnan saaneiden henkilöiden joukosta ne, joilla on suurin riski sairastua aktiiviseen tarttuvaan tuberkuloosiin. Tämän väestönosan kohdennettu hoito tarjoaa mahdollisuuden ehkäistä tuberkuloosia ennen kuin siitä tulee tarttuvaa, mikä edistäisi huomattavasti tämän maailmanlaajuisen epidemian hallintaa. 2. M. tuberculosis -antigeenille spesifiset immuunivasteet – perifeerinen veri ja tulehduspaikat: Kehittääksemme tarkemman menetelmän aktiivisen tuberkuloottisen keuhkopussitulehduksen sekä tuberkuloosiperäisen peritoniitin, aivokalvontulehduksen ja sydänpussitulehduksen diagnosoimiseksi otimme käyttöön antigeenispesifisen interferoni-gamma (IFN-gamma) -vapautumismäärityksen, jossa käytettiin ontelonestenäytteitä. Tutkimushenkilöt olivat 30 potilasta, joilla oli bakteriologisesti vahvistettu aktiivinen tuberkuloottinen serosiitti, ja 49 potilasta, joilla oli lopullinen ei-tuberkuloottinen etiologia. Viljely suoritettiin 18 tunnin ajan nesteen mononukleaarisilla soluilla effuusion supernatantissa yhdessä suolaliuoksen tai Mycobacterium tuberculosis -spesifisten antigeenisten peptidien, varhaisen erityksen antigeenisen kohteen 6 ja viljelysuodoksen proteiinin 10 kanssa. IFN-gamma-pitoisuudet viljelmien supernatantissa mitattiin ELISA-menetelmällä. Aktiivista tuberkuloottista serosiittia sairastavilla potilailla ontelonestenäytteiden antigeenispesifiset IFN-gammavasteet olivat merkitsevästi korkeammat kuin ei-tuberkuloottisten effuusionäytteiden vastaukset. Vastaanottimen käyttöominaiskäyrän alapuolinen alue oli ontelonesteen IFN-gamma-vasteen osalta merkittävästi suurempi kuin ontelonesteen adenosiinideaminaasi- ja kokoveren IFN-gamma-emissiomäärityksen osalta. Ontelonesteen IFN-gamma-emissiomääritys voisi olla noninvasiivinen menetelmä tuberkuloottisen serosiitin tarkkaan ja nopeaan diagnosointiin potilailla, joilla kliinisesti epäillään aktiivista tuberkuloosia ontelotilassa mutta joista ei saada bakteriologista näyttöä. 3. Useita kysymyksiä IGRA:ssa: Kazue HIGUCHI (tuberkuloosin tutkimuslaitos, Japanin tuberkuloosintorjuntayhdistys). Vaikka viime vuonna tarkistetuissa kontaktitutkimuksia koskevissa ohjeissa suositeltiin QFT-2G:n käyttöä kontaktitutkimuksissa, QFT-2G:ssä on useita kysymyksiä. Tässä minisymposiumissa esiteltiin tietoja useista QFT-2G-testin kysymyksistä. Näihin kuuluivat QFT-2G:n soveltaminen immuunijärjestelmän kannalta haavoittuviin henkilöihin, kuten imeväisiin ja HIV-positiivisiin, kemoterapian vaikutukset QFT-2G-testiin, aktiivisen tuberkuloosin kehittymisen ennuste QFT-2G:n avulla, QFT-2G:n seuraava sukupolvi, QFT-2G-testin laadunvarmistus ja joitakin nykyisen QFT-2G-testin ongelmia. Olisi tärkeää tutkia näitä kysymyksiä ja parantaa IGRA-testejä perusimmunologian pohjalta.