Kokonaisuutena ottaen tässä koottujen näytteiden suuri määrä yhdistettynä hyvin pitkälle selvitettyihin, monta sukupolvea taaksepäin ulottuvien isäpuolisten filogenioiden saatavuuteen on mahdollistanut sen, että tietyt ashkenazi-leviittien Haploryhmä R1a:n perustajalinjasta voidaan tehdä tiettyjä johtopäätöksiä, jotka voidaan muotoilla suurella luotettavuudella. Kaikkiaan 71 henkilön, jotka ilmoittivat olevansa askenasijeviläisiä tai askenasijeviläisiä, jotka eivät ole leviläisiä, todettiin tutkimuksen alussa kuuluvan haploryhmään R1a-M582 ja edustavan STR-profiiliensa perusteella laajaa vaihteluväliä kyseisessä haploryhmässä esiintyvästä vaihtelusta. On silmiinpistävää, että kaikki 71 Y-kromosomia voitiin luokitella yhteen ainoaan laajenevaan, R1a-M582:n sisälle sijoittuvaan ja tässä yhteydessä R1a-Y2619:ksi nimettyyn kladiin, joka noudatti jotakin kuudesta kyseisellä tasolla havaitusta variantista (kuva 2 ja täydentävä kuva S1). Ainoat aiemmin raportoidut näytteet, jotka jakoivat tämän kladin, olivat viisi ashkenasijuutalaista perimää edustavaa näytettä, joiden leviittistatusta ei ollut ilmoitettu26. Näin ollen kaikki R1a-Y2619-yksilöt, riippumatta siitä, pitävätkö he itseään juutalaisina vai ei-juutalaisina, ovatko he ashkenaseja vai ei-ashkenaseja, ovatko he leviittejä vai ei-leviittejä, ovat suoraa miespuolista jälkeläistä isälinjalla yhdestä yhteisestä miespuolisesta esi-isästä, joka on elänyt ~1 743 ybp (taulukko 1). Koska kaikkien tähän mennessä poimittujen R1a-Y2619-haarojen nykyaikaiset miehet kantavat jotakin monista leviittien sukunimistä, voidaan vahvasti väittää, että tämä miespuolinen esi-isä kuului itse leviittien joukkoon ja että hän on saattanut kantaa isänimellistä sukunimeä Levite. Perustamistapahtuman laajuutta voidaan arvioida laskemalla niiden nykyisten henkilöiden lukumäärä, joiden oletetaan kantavan R1a-Y2619 Y-kromosomia. Kahdessa riippumattomassa askenasijuutalaisten otosjoukossa, joissa leviittistatus ei ollut tiedossa, on arvioitu, että R1a-Y2619-isänsisäisen haploryhmän, R1a-M17/M198, prosenttiosuus askenasiväestössä on vastaavasti 9,6 prosenttia20 ja 11,5 prosenttia27. Edellisessä artikkelissa raportoitiin, että haploryhmän R1a-M582 osuus koko ashkenasiväestöstä oli 7,9 prosenttia20. Tässä tutkimuksessa osoitamme, että kaikki haploryhmään R1a-M582 kuuluvat askenasinäytteet voidaan luokitella uudelleen ryhmäksi R1a-Y2619. Perustuen askenasipopulaation kokoon, joka on ~4 000 00013 miestä, joista noin 7,9 % on R1a-Y2619-rotuisia, askenasipopulaatiossa olisi ~300 000 askenasimiestä, jotka polveutuvat suorassa miespuolisessa linjassaan yhdestä ainoasta suhteellisen tuoreesta esi-isästä, ja monet näistä miehistä määrittelevät itsensä leviittiläisiksi.
Kahdesta tekijästä johtuen pystyimme saavuttamaan tarkemmat yhteensulautumisaikakertoja ja luottamusvälejä, kuin mitä on laskettu aiemmin leviittiläisen R1a-rotuisen R1a-linjaan kuuluvista askenasimiehistä.
Ensinnäkin käytettävissä olevien kokonaisten Y-kromosomien suuri määrä (lisätaulukko S1) ja toiseksi Horowitzin sukutaulusta saatavilla olevat tiedot, jotka mahdollistivat sisäisen kalibrointipisteen (kuva 3). Horowitzin sukutaulun hyvin dokumentoidut sukutiedot osoittavat, kuinka vankkoja koko Y-kromosomin sekvenssit voivat olla isänpuoleisen syntyperän rekonstruoinnissa. Kalibrointipiste perustui kolmeen Horowitz-näytteeseen, joiden hyvin dokumentoidut sukutaulut yhtyvät 402 ybp:n kohdalla. Kaksi muuta henkilöä, jotka itse liittyivät Horowitz-dynastiaan, mutta joilla ei ollut selkeää genealogiaa, klusteroituivat tiiviisti näiden kolmen näytteen kanssa. Yksikään lähimpiin sisarklustereihin kuuluvista näytteistä ei tunnistanut itseään Horowitz-dynastiaan kuuluvaksi. Huomionarvoista on, että kaikkien viiden Horowitz-näytteen muodostaman solmun molekyyli-ikä laskettiin ~690 ybp:ksi, kun taas genealoginen yhteenkietoutumisaika viittaa sen olevan 546 ybp. Tämä viittaa siihen, että Horowitzin solmu R1a-YP268 (g.23133909G > A) saattaa edustaa tämän sukutaulun nimetyn perustajan todellista rekonstruoitua koko-Y-sekvenssiä (kuva 3b). On kuitenkin tärkeää huomata, että arvioidut yhteensulautumisajat ovat likimääräisiä, sillä muutamat metodologiset vaihtelut voivat johtaa hieman erilaisiin tuloksiin. Esimerkiksi soveltamalla koalesenssimenetelmäämme pelkästään Illumina-alustalta saatuihin tietoihin olisi saatu koalesenssin iäksi ~1 398 ybp Ashkenazi Levite R1a-Y2619 -kladille ja ~645 vuotta ybp R1a-YP268 -kladille. Tällaiset erot saattavat johtua mahdollisuudesta käyttää pidempiä päällekkäisiä Y-kromosomin pätkiä, kun verrataan näytteitä, jotka on sekvensoitu samalla koneistolla ja samoilla parametreilla. Emme laskeneet yhteensulautumisaikaa STR-muunnosten perusteella, koska olemme aiemmin osoittaneet, etteivät ne anna lisätietoa hiljattain yhteensulautuneista kladeista6.
Ashkenazi-leviittien sukulinjan ehdotettua Lähi-idän alkuperää, joka perustui aiemmin suhteellisen rajalliseen määrään raportoituja näytteitä20 , voidaan nyt pitää vankasti validoituna. Vaikka haploryhmä R1a:n korkeimmat frekvenssit löytyvät Itä-Euroopasta18,28, aineistomme paljasti Euroopan ulkopuolella haploryhmä R1a:n runsaan variaation, joka on fylogeneettisesti erillinen tyypillisesti eurooppalaisista R1a-haaroista. On ilmeistä, että R1a-Y2619 sijoittuu hyvin lukuisiin fylogeneettisesti läheisiin Lähi-idän sisarkladeihin, joista otettiin näytteitä iranilaisilta azereilta, kermanilaiselta, jesidiltä ja yhdeltä iberialaiselta mieheltä. Tämä antaa tarvittavat todisteet sen alkuperästä (kuva 2 ja lisäkuva S1). R1a-Y2619:n tarkka siirtymäreitti Eurooppaan on kuitenkin edelleen hämärän peitossa. Useimmat historialliset tiedot viittaavat kahteen tärkeimpään juutalaisten Eurooppaan suuntautuneen siirtolaisuuden reittiin (kuva 1)29,30. Askenasijuutalaisuuden katsotaan syntyneen juutalaisten siirtolaisuuden tuloksena Italian kautta Reinin laaksoon ja sen jälkeen Puolaan. Sephardilaisten (espanjalaisten) juutalaisten katsotaan muuttaneen islamin asteittaisen levittäytymisen mukana Pohjois-Afrikkaan ja sieltä Espanjaan14. Koska R1a-Y2619 on peräisin Lähi-idästä, on mahdollista, että se on tullut Eurooppaan jompaakumpaa tai molempia näistä reiteistä pitkin. Luonnollisesti R1a-Y2619:n voimakas perustamistapahtuma askenasijuutalaisten keskuudessa yhdistettynä R1a-Y2619:n kaikkien tunnettujen haarojen esiintymiseen askenasijuutalaisilla houkuttelee päättelemään, että sen muuttoreitti Levantista liittyi suoraan askenasijuutalaisten perustajiin. Nämä seikat saattavat kuitenkin vain kuvastaa laajentumista askenasijuutalaisten keskuudessa eivätkä niinkään todistaa R1a-Y2619:n ensimmäistä saapumista askenasiväestön mukana tai siihen. Vielä hämmentävämpää on se, että Horowitzin rabbidynastian sukutiedot, joiden on nyt osoitettu kantavan R1a-Y2619 Y-kromosomia, viittaavat heidän läsnäoloonsa Iberian niemimaalla 1400-luvulla ja todennäköisesti jo aiemmin (kuva 3)17 . Itse asiassa toistuvia juutalaisten muuttoliikkeitä, jotka ovat saattaneet kantaa R1a-Y2619 Y-kromosomia Kataloniaan, on dokumentoitu 4. vuosisadalta lähtien ja muslimien Iberian levittäytymisen aikana31. Lisäksi, koska Katalonia oli jälleen kristittyjen aluetta vuodesta 800 jKr. lähtien, proto-Horowitzin R1a-Y2619-esivanhemmat voisivat edustaa myös askenasijuutalaisten muuttoa Iberiaan. Näin ollen R1a-Y2619-linjan esiintyminen Espanjassa 1400-luvulla ei voi todistaa, että R1a-Y2619-linja olisi saapunut ensimmäisen kerran Iberian niemimaalle, sillä se voi yksinkertaisesti kuvastaa juutalaisten toistuvia ja kirjaamattomia siirtymisiä edestakaisin Itä- ja Länsi-Euroopan ja Iberian niemimaan välillä. Aiemmat mtDNA:sta ja autosomaalisista markkereista saadut todisteet ovat jo viitanneet todennäköiseen geenivirtaan askenasijuutalaisten ja sefardijuutalaisten välillä Euroopassa32,33,34. Kaiken kaikkiaan tuloksemme puoltavat yhtä ainoaa Eurooppaan tuloreittiä osana askenasijuutalaisten muuttoliikettä ja laajentumista Euroopassa. Koska kaikkien nykyisten R1a-Y2619-leviläisten yhteenkokoamisaika on ~1 743 ybp, mikä ajoittuu selvästi Rooman maanpaossa tapahtuneen diasporan aikaan, ja koska jokainen R1a-Y2619:n haara esiintyy askenasijuutalaisissa, tuloksemme eivät ole ristiriidassa sen kanssa, että Levantissa olisi tapahtunut nopea leviäminen, jota olisi seurannut leviäminen useiden reittien kautta Eurooppaan. Myös muiden kuin askenasijuutalaisten R1a-Y2619-leviläisnäytteiden tulokset viittaavat yhteen leviämisreittiin. Jos R1a-Y2619-leviläislinja olisi jo ollut yhtä laajalti levinnyt Levantissa, muiden kuin askenasialaisleviläisten kuin askenasialaisleviläisten olisi odotettu erottautuvan askenasialaisleviläisnäytteistä ennen diasporan ajankohtaa ja muodostavan eri klusterin. Tulokset kuitenkin osoittavat, että muut kuin askenasialaiset leviitit kuuluvat useisiin suhteellisen hiljattain yhdistyneisiin R1a-Y2619:n alahaaroihin (kuva 2 ja lisäkuva S1). Tämä kuvio sopii paremmin yhteen jatkuvan geenivirran kanssa askenasipopulaatiosta ei-askenasipopulaatioon diasporan aikana kuin sen kanssa, että haploryhmä R1a-Y2619 olisi saapunut Eurooppaan Levantista useita eri reittejä.
Lisätukea yhdelle ainoalle muuttoreitille ja sen jälkeiselle laajenemiselle askenasijuutalaisten piirissä saadaan havaituista havaituista muiden askenasihaploryhmien laajenemismalleista. Näin ollen on tärkeää erottaa toisistaan R1a-Y2619-haploryhmän askenasileviitille ominainen haploryhmän R1a-Y2619 perustamistapahtuma, joka on voinut olla seurausta suotuisasta sosioekonomisesta tai muusta asemasta, ja askenasien Y-kromosomilinjojen, mukaan lukien R1a-Y2619-askenasileviitit, yleinen laajentuminen. Tätä tarkoitusta varten olemme tutkineet kourallisen muita haploryhmiä, joiden on aiemmin kuvattu olevan yleisiä askenasijuutalaisten keskuudessa19,24,35. Tuloksemme osoittavat, että R1a-Y2619:n laajeneminen askenasijuutalaisten keskuudessa ei ole spesifistä tai ainutlaatuista tälle haploryhmälle. Esimerkiksi haploryhmien G-M377 (lisäkuva S4) ja Q-M242 (lisäkuva S5), joiden molempien tiedetään edustavan 5 prosenttia ashkenasien isänpuoleisesta variaatiosta24 , yhtyminen tapahtuu ~1223 ybp:ssä ja ~1672 ybp:ssä (taulukko 1). Tässä käytetyn Y-kromosomistrategian avulla pystyimme ratkaisemaan haploryhmä E:n linjat sen pieniin alihaaroihin (täydentävä kuva S3). Haploryhmien E-Z838, E- PF3780, E- B923 ja E-B933, joiden tiedetään edustavan kumulatiivisesti 20:tä prosenttia askenasien isänpuoleisesta variaatiosta24 , yhteensulautumisajaksi arvioitiin ~1 200-1 600 ybp. Tämä useiden perustamistapahtumien malli, jota ei ole havaittu espanjalaisten juutalaisten keskuudessa36 , tukee entisestään sitä, että R1a-Y2619-askenasien leeviläinen esi-isä saapui Eurooppaan pikemminkin askenasien reittiä kuin Iberian niemimaalle suuntautuneen juutalaisten laajentumisen kautta. Myös muita malleja on selvästi nähtävissä askenasijuutalaisten isänpuoleisessa polveutumisessa. Lähi-idässä yleinen kaploryhmä T-M70 esiintyy myös ashkenasijuutalaisten keskuudessa (lisäkuva S6). Genotyypitetyissä näytteissä havaittiin syvään juurtuneita jakautumia, jotka todennäköisesti viittaavat tämän haploryhmän muinaisen monimuotoisuuden säilymiseen Levantissa, joka ajoittuu pleistoseeniin. Samaan aikaan Länsi-Euroopassa vallitsevan haploryhmän R1b-M269 (täydentävä kuva S7) osalta havaittu kuvio viittaa ensisijaisesti eurooppalaisten Y-kromosomien toistuvaan pistemäiseen introgressioon askenasialaisyhteisöön, ja se on yhteensopiva aiempien raporttien kanssa36.
Vertailimme edelleen askenasialais-Cohen-urosten keskuudessa yleisimmin esiintyvää, haploryhmä J1a-P58:n sisälle sijoittunutta, haploryhmän J1a-P58:n sisällä havaittua perustamislinjausta leviittiläisten askenasialaisen R1a-Y2619-linjauksen kanssa. On ilmeistä, että R1a-Y2619-leviittikastin ja J1a-P58-Cohen-kastin jäsenillä ei ole yhteistä miespuolista esi-isää Raamatun kertomuksen aikajänteellä. Kuten ashkenazi-leviittien tapauksessa, ashkenazi-Cohenin J1a-P58-linja muodosti tiiviin klusterin, joka oli sisäkkäin Lähi-idän näytteiden joukossa, mikä vahvisti sen alkuperän, ja se oli tutkimuksessamme yhteinen vain muiden kuin ashkenazi-Cohenien kanssa (lisäkuva S2). Toisin kuin R1a-Y2619-askenazi-leviittien osalta saatu kuvio, klusteri yhdistyy kuitenkin noin 2570 ybp, mikä viittaa sen laajentumisen alkamiseen diasporaa edeltävällä kaudella. Laajat täydelliset Y-kromosomisekvenssit suuremmasta määrästä Cohen-näytteitä useammista juutalaisyhteisöistä muiden Levantin populaatioiden taustalta, mukaan luettuna perhe- ja klaanikohtaisten varianttien määrittäminen, olisivat hyvin informatiivisia käsiteltäessä havaintoa, jonka mukaan ashkenazi- ja muiden kuin ashkenazi-Cohen-yksilöiden sukulinjat jakautuvat päällekkäin. Erityisesti vallitsevan haploryhmän J1-P58 kanssa yhdistetyn hallitsevimman Cohen-linjan tutkiminen yhdessä historian asiantuntijoiden kanssa voisi antaa ratkaisevan tärkeää tietoa vanhan maailman heprealaisten ymmärtämiseksi. Lisäksi Levantin muinaiset DNA-tutkimukset voivat tarjota suoraa tietoa. Hiljattain tehdyssä tutkimuksessa paljastui nimittäin sekä J1a-P58- että J2-M12-Y-kromosomien, jotka ovat yleisiä nykyjuutalaisten keskuudessa, esiintyminen kahdessa kanaanilaisnäytteessä, jotka ajoittuvat 3700 ybp:hen37.
On vaikea simuloida maksimaalista miesten lukumäärää, jonka olisi pitänyt olla läsnä askenasijuutalaisuuden perustamisajankohtana, jotta saataisiin aikaan vahva perustamistapahtumakuvio, joka nykyisin havaitaan askenasijuutalaisten Y-kromosomipoolissa. Perusindeksit, kuten vastaavien haploryhmien frekvenssit esi-isäpopulaatioissa ja sukupolvien aikana tapahtuneen introgression laajuus, puuttuvat. Näiden Y-kromosomilinjojen nykyiset esiintymistiheydet, kun otetaan huomioon niiden hyvin paljon alhaisemmat esiintymistiheydet muissa kuin juutalaisissa Lähi-idän ja Euroopan väestöissä, viittaavat kuitenkin siihen, että näiden linjojen on täytynyt esiintyä askenasijuutalaisuuden alkuaikoina, jolloin perustajaväestöön kuului vain vähän miehiä, ja että ajelehtimisella on voinut olla osuutta näiden linjojen nykyisten korkeiden esiintymistiheyksien syntyyn. Askenasijuutalaisten lähihistorian rekonstruoinnissa kokonaisten genomien perusteella todettiinkin, että pullonkaulana oli vain 350 yksilöä26,38. On tärkeää huomata, että vaikka tämä pullonkaula ei välttämättä osu yksiin askenasijuutalaisten tehokkaan miespopulaation perustamiskoon ja -tapahtumien kanssa, se kertoo meille, että askenasijuutalaisten leviittien R1a-Y2619-esivanhempi kuului todennäköisesti niihin perustajamiehiin, joihin pullonkaula kohdistui. Vastaavasti täydellisistä mitokondriaalisista DNA-sekvensseistä saadut tiedot tukevat samaa käsitystä rajallisesta määrästä suuria perustavia äitilinjoja33.
Kokonaisuutena tässä esitettyjen tietojen laajuus helpottaa lähes täydellistä resoluutiota leviittien genomitarinasta askenasijuutalaisten keskuudessa. Voidaan vahvasti väittää, että nykyiset R1a-Y2619-askenasijuutalaiset leeviläiset polveutuvat yhdestä leeviläisestä esi-isästä, joka saapui Levantista Eurooppaan. Hänen suoran miespuolisen sukulinjansa laajeneminen alkoi ajanjaksolla, joka on yhteensopiva useiden muiden ashkenasijuutalaisten perustajaisien osalta havaitun laajenemismallin kanssa. Sen lisäksi, että nämä havainnot tarjoavat tietoa yhdestä ainoasta miespuolisesta sukulinjasta, ne ovat tärkeä ja erittäin selkeä esimerkki askenasijuutalaisten mies- ja naispuolisten juutalaisten sukulinjojen yleisemmästä demografisesta historiasta, jossa suhteellisen pieni määrä perustajia vaikuttaa suhteettoman paljon askenasiväestön nykyiseen genomiseen vaihteluun. Lisäksi voidaan väittää, että se, että muut kuin askenasijeviläiset R1a-Y2619-miehet jakautuvat hyvin askenasijeviläisten leviläisten fylogeneesiin sen sijaan, että ne olisivat klusteroituneet erikseen, antaa enemmän uskottavuutta skenaariolle, jonka mukaan R1a-Y2619-miehet tulivat Eurooppaan askenasijeviläisten perustajien mukana. Kaikkein arvoituksellisin kysymys – ajankohta ja paikka, jolloin askenasialaisen R1a-Y2619-sukutaulun perustaja sai leeviläisen aseman – on edelleen ratkaisematta. Tämä kysymys saattaa olla nykymuotoista geneettistä variaatiota käyttävien geneettisten tutkimusten ulottumattomissa, koska tähän mennessä ei ole testattu yhtään miestä, jonka sukulinjat olisivat haarautuneet kaikkien R1a-M582-miesten yhteisen suoran miespuolisen esi-isän (~3 143 v. e. m.) ja ashkenasialaisen R1a-Y2619-lajin leviittimiesten yhteisen suoran miespuolisen esi-isän (~1 743 v. e. m.) väliseltä ajalta. Tulevaisuuden historialliset tai arkeologiset oivallukset saattavat tarjota keinoja tutkia tätä kysymystä tarkemmin.