Abstract
Suun kandidiaasin aiheuttavat Candida-suvun sienet, ja se on yksi yleisimmistä ihmisen suuontelon opportunistisista sieni-infektioista. Kun otetaan huomioon tämän taudin kliininen vaihtelevuus, tarvitaan usein mikrobiologisia menetelmiä kliinisen vahvistuksen saamiseksi sekä erotusdiagnoosin määrittämiseksi muiden tautien kanssa. Tämän lyhyen teknisen raportin tarkoituksena on havainnollistaa yksinkertaista menetelmää, jolla voidaan tehdä välitön mikroskooppinen diagnoosi tästä taudista. Esittelemme 14-vuotiaan pojan tapauksen, joka kärsi hammasproteesiin liittyvästä erytemaattisesta stomatiitista, joka diagnosoitiin ja jota seurattiin yksinkertaistetulla suoralla mikroskopointimenetelmällä. Se mahdollistaa tarkan diagnoosin noninvasiivisella ja kivuttomalla näytteenottomenetelmällä, joka on yhteydessä laboratoriotuloksiin.
1. Johdanto
Oraalinen kandidiaasi on Candida-suvun sienten aiheuttama ja yksi yleisimmistä ihmisen suuontelon opportunistisista sieni-infektioista. Suuontelosta on eristetty sataviisikymmentä tämän suvun lajia, joista 80 % vastaa Candida albicansia . Suun kandidiaasi-infektio voi olla joko akuutti tai krooninen, ja se luokitellaan joko pseudokalvomembranoottiseksi tai erytemaattiseksi. Suun kandidiaasi on yksi yleisimmistä limakalvosairauksista, sillä kaikkia infektiotyyppejä voi esiintyä . Infektion lisääntynyt esiintyvyys voi liittyä erilaisiin altistaviin tekijöihin, kuten pitkittyneeseen antibioottihoitoon, aliravitsemukseen, hormonaalisiin häiriöihin, HIV-infektioon, kserostomiaan, tupakointiin, huonoon suuhygieniaan ja proteesien käyttöön . Tyypillisesti suun kandidiaasin diagnoosi perustuu kliinisiin oireisiin, ja se on yleensä suoraviivainen akuutin pseudomembranoottisen kandidiaasin tapauksessa, erityisesti imeväisillä. Tämän taudin kliinisen vaihtelevuuden vuoksi tarvitaan kuitenkin usein mikrobiologisia menetelmiä kliinisen vahvistuksen saamiseksi sekä erotusdiagnoosin määrittämiseksi muiden tautien kanssa. Lisäksi mikrobiologisesta lisäkokeesta voi olla hyötyä tapauksissa, joille on ominaista resistenssi sienilääkkeille, erityisesti kroonisilla potilailla. Candida-lajien eristämiseen ja tunnistamiseen käytetään nykyisin useita menetelmiä, kuten preparaattien suoraa mikroskopointia, värjäyksiä, viljelmiä ja geneettisiä menetelmiä (PCR). Myös uusia tunnistusmenetelmiä testataan nopean ja tarkan toteamisen mahdollistamiseksi . Tuore kirjallisuuskatsaus osoitti suoran mikroskopian edut suun kandidiaasin diagnosoinnissa lapsilla ja nuorilla . Tämän lyhyen teknisen raportin tarkoituksena on havainnollistaa yksinkertaista tuolin ääressä suoritettavaa menetelmää, jolla voidaan tehdä välitön mikroskooppinen diagnoosi tästä taudista.
2. Tapausselostus
Tämän menetelmän havainnollistamiseksi esittelemme 14-vuotiaan pojan tapauksen, joka kärsi hammasproteesiin liittyvästä punoittavasta erytemaattisesta stomatiitista (kuva 1). Hammasproteesiin liittyvä stomatiitti määritellään irrotettavan hammasproteesin alla olevan suun limakalvon tulehdusprosessiksi. Nuorilla potilailla proteesiin liittyvä stomatiitti voi johtua pediatrisen proteesin komplikaatiosta tai sitä voi esiintyä pitkäaikaisen ortodonttisen hoidon aikana irrotettavalla materiaalilla. Tätä patologiaa on kuvattu sekä lapsilla että nuorilla, ja diagnoosimenetelmiä ja hoitoa on ehdotettu . Tässä tapauksessa irrotettavaa ortodonttista apuvälinettä käytettiin kahden vuoden ajan hampaiden ageneesin kompensoimiseksi.
Klassiseen mikroskooppiseen menettelyyn kuuluu tyypillisesti edustavan näytteen ottaminen infektoituneesta kohdasta (eksfoliatiivinen sytologia), joka siirretään mikroskooppiselle objektilasille ja käsitellään kaliumhydroksidilla (KOH), Gram-värjäyksellä tai periodihappo-Schiffin (PAS) värjäyksellä. Näytteenotto suoritettiin ja lähetettiin laboratorioon viljelyä varten, ja tulos oli positiivinen Candida albicansille.
Sitten esitimme vertailuksi yksinkertaistetun, suoran mikroskooppimenetelmän. Tässä menetelmässä potilaan sylki kerättiin suupohjasta. Suun sisäinen peili asetettiin vaakasuoraan kielen alle, kosketuksiin limakalvon kanssa. Kun sylki peitti peilin, se poistettiin suusta ja asetettiin objektilasille (kuva 2 a). Tämän jälkeen näyte kerättiin steriilillä anturilla, joka asetettiin suoraan potilaan sylkeen (kuva 2(c)), ja siihen asennettiin peitelevy. Tärkeää on huomata, että sulcusalue on optimaalinen paikka näytteen ottamiseen tällä menetelmällä (kuva 2(b)). Lääkärin on painettava sormellaan objektilasia näytteen levittämiseksi. Tämän jälkeen näyte analysoitiin vaihekontrastisella optisella mikroskoopilla (kuva 2(d)). Mielenkiintoisin suurennos on ×1000, koska sen avulla ei-patogeeniset hiivamuodot voidaan erottaa opportunistisista hyfalomuodoista. Patologisissa olosuhteissa jokaisessa ruudussa näkyy useita hyfoja, jotka ovat sekoittuneet suun bakteereihin ja soluihin (kuva 3). On tärkeää, että tämä menetelmä on arvokas hoidon tehokkuuden määrittämiseksi. Hoito koostui kolmen viikon paikallishoidosta, jossa käytettiin sienilääkettä (amfoterisiini B), ja proteesin vaihtamisesta kiinteään proteesiin. Muu laboratorioanalyysi viljelyllä oli negatiivinen. Kahden vuoden seurannassa sama menettely osoitti suuflooran normalisoituneen ilman hyfoja (kuva 4(b)), mikä liittyi kliiniseen paranemiseen (kuva 4(a)).
(a)
(b)
(c)
(d)
.
(a)
(b)
(c)
(d)
3. Johtopäätökset
Suoraa mikroskopointia käytetään laboratorioissa laajalti kandidiaasin diagnosointiin. Se mahdollistaa tarkan diagnoosin noninvasiivisella ja kivuttomalla näytteenottomenetelmällä, joka soveltuu erityisen hyvin nuorille potilaille. Klassinen menettely, johon kuuluu näytteenotto ja lähettäminen laboratorioon, vie enemmän aikaa ja kustannuksia. Tässä esitelty menetelmä ei myöskään vaadi näytteen kiinnittämistä tai käsittelyä. Siksi se on kustannustehokas tapa tutkia potilaan suun mikrobistoa ja määrittää mahdollinen epätasapaino. Vaikka suora mikroskopointi ei ole yhtä spesifinen kuin viljely, se näyttää olevan ensisijainen menetelmä ensilinjan diagnoosiin. Täydellinen kliininen tutkimus on tietysti edelleen ehdottoman välttämätön, samoin kuin laaja anamneesi, jotta voidaan tutkia kaikki siihen liittyvät yleissairaudet. Lisäksi tämä lähestymistapa edellyttää kokemusta hiivan havaitsemisesta mikroskooppisen havainnoinnin avulla, mikä ei ole kliinikkojen laaja-alaista osaamista. Tunnistaminen ei kuitenkaan ole kovin vaikeaa, ja yksinkertainen, lyhytaikainen muodostus voi riittää. Näin ollen yhä useammilla lääkäreillä on mahdollisuus käyttää tätä menetelmää; tämän yksinkertaisen mikroskooppisen analyysin tunnettuuden lisääminen antaa lääkäreille mahdollisuuden tehdä välitön diagnoosi tuolin ääressä. Lisäksi, kuten intraoraalisten kameroiden tapauksessa, mikroskooppisten laitteiden kehittymisen vuoksi ne voidaan integroida ihmiskeskeisen hoidon käsitteeseen osana koulutusta ja ennaltaehkäisyä, jotta voidaan ymmärtää diagnoosit ja tehdä tietoon perustuvia hoitopäätöksiä . Älypuhelimiin perustuvien mikroskooppien mahdollinen kehittäminen helpottaa kliinikkojen mahdollisuuksia käyttää mikroskooppia. Älypuhelinpohjaisia mikroskooppeja on jo käytetty loisten havaitsemiseen tai elävien solujen kuvien saamiseen . Tämä on lupaava lähestymistapa tarkkojen diagnoosien tekemiseen tuolin ääressä tulevaisuudessa.
Eettinen hyväksyntä
Kaikki menettelyt, jotka suoritettiin tutkimuksessa, jossa oli mukana ihmisosallistujia, olivat Toulousen yliopiston eettisten standardien sekä vuoden 1964 Helsingin julistuksen ja sen muutosten mukaisia.
Suostumus
Tietoon perustuva suostumus saatiin kaikilta potilailta ja heidän vanhemmiltaan. Kaikki kirjoittajat antoivat suostumuksensa julkaisemiseen.
Interintäristiriidat
Tekijät ilmoittavat, ettei heillä ole eturistiriitoja.