… bifida (SB) a leggyakoribb fogyatékosságot okozó születési rendellenesség Észak-Amerikában, gyakorisága , 3-4 minden 10.000 élveszületésből. A leggyakoribb és legsúlyosabb formája a myelomeningocele (MM), amely az összes SB eset több mint 90%-át teszi ki. Az MM egy olyan gerincelváltozás, amelyet a gerincoszlopban lévő nyílás jellemez, amelyen keresztül az agyhártya és az idegszövetek kiállnak. A gerincelváltozás klinikai következményei közé tartoznak a járási és érzékelési nehézségek, az inkontinencia és a tanulási problémák. Az MM egyéneknél a figyelemzavarokat a figyelemhiányos hiperaktivitási zavar (ADHD) minősítésén keresztül azonosították. Az MM-ben szenvedő gyermekek nagyobb valószínűséggel mutatnak klinikailag szignifikáns emelkedést az ADHD értékelésében, mint a kontrollcsoport tagjai (31% az MM-ben, míg 7% az általános populációban) . Figyelemre méltó, hogy az ADHD értékelésében szignifikáns emelkedést mutató MM egyének 74,5%-a az ADHD túlnyomórészt figyelmetlen altípusának felelt meg. Ammerman és munkatársai független tanulmánya hasonló eredményeket mutatott . A folsav az MM kapcsán is fontos B-vitamin. Tanulmányok azt mutatják, hogy a folsavpótlás hét országban 72%-kal csökkenti mind a neurális csődefektusok előfordulását, mind a kiújulását . Az ehhez hasonló adatok vezettek a közegészségügyi ajánlásokhoz, amelyek a folsav perikoncepciós pótlását javasolták, és 1998-ban az Egyesült Államokban minden gabonakészítményt folsavval dúsítottak. A folsav kritikus szerepet játszik a sejtfolyamatokban, beleértve a nukleotidszintézist és a metilációt. Az 5,10-metilén-tetrahi-drofolát-reduktáz (MTHFR) enzim abban az útvonalban működik, amely a folsavat olyan metabolitokká alakítja, amelyek felhasználhatók a sejtfolyamatokban, beleértve a génpromóterek és fehérjék, az RNS, a DNS, az aminosavak és a foszfolipidek szintézisének metilálását (lásd az 1. ábrát). Például a dopamin-stimulált foszfolipid-metiláció (PLM) a neuronok tüzelését moduláló fontos mechanizmusnak tűnik, és a metilációs aktivitás károsodása hozzájárulhat a figyelemzavarokhoz . Az 5-formilTHF-fel kezelt neuroblasztóma sejtek (SH-SY5Y) fokozott dopaminreceptor D4 (DRD4) metilációt okoztak a fehérje-metil-transzferáz és az S-adenozil-metionin által, ami mind a bazális, mind a dopamin-stimulált PLM dózisfüggő növekedését eredményezte . A DRD4 az egyik legtöbbet replikált gén, amelyet az ADHD-vel kapcsolatban azonosítottak . Az MTHFR genetikai variánsait összefüggésbe hozták az MM-mal . A két leggyakoribb vizsgált variáns a C677T (rs1801133) és az A1298C (rs1801131). E variánsok bármelyikének homozigóta jelenléte 1,5-2,4-szeresére növeli az SB-ben való érintettség esélyét az általános populációhoz képest, bár az 1298C esetében az adatok ellentmondásosak . Számos tanulmány összekapcsolja a folsav/homocisztein szintet a kognitív funkciókkal. Például a központi idegrendszerben folsavhiányos betegek kognitív hiányosságokat mutatnak . Morris és munkatársai kimutatták, hogy a kontrollokhoz képest az alacsony folsavtartalmú egyének memóriafunkciói jelentősen csökkentek . Más tanulmányok hasonló eredményeket mutatnak; vagyis a kognitív funkciók javulnak a magasabb folsavszintekkel, és csökkennek a magasabb homociszteinszintekkel. Az MTHFR a folsav és a homocisztein szintjének kulcsfontosságú szabályozója . Ebben a vizsgálatban azt vizsgáltuk, hogy a folsav-anyagcsere enzim, az MTHFR genetikai variációja összefügg-e az ADHD viselkedési fenotípusának megnyilvánulásával MM-ben szenvedő gyermekeknél. A vizsgálat résztvevői a Burmeister és munkatársai által használt populációhoz képest kibővített populáció volt . Az MTHFR gén SNP-it genotipizáló minta 262 MM személyből állt. Ezeknek az egyéneknek az ötven százaléka fehér, 50%-a pedig spanyolajkú volt. A minta 53%-ban nőkből és 47%-ban férfiakból állt, a medián életkor 12,4 év volt. Az ADHD-ra vonatkozó szülői értékelő skálákat további olyan betegek esetében is kitöltötték, akiknél a DNS nem állt rendelkezésre. Ezeket a betegeket arra használták, hogy összehasonlítsák az MM egyének pozitív ADHD teszteredményeinek gyakoriságát a kontrollok pozitív ADHD tesztjeivel. Ehhez az összehasonlításhoz a csoportméretek a következők voltak: az MM minta 478 betegből, a kontroll minta pedig 196, MM-ben nem érintett kontrollszemélyből állt. Az MM-ben szenvedő egyének és az MM nélküli kontrollszemélyek etnikai hovatartozását az 1. táblázat tartalmazza. Mindkét minta körülbelül 50%-ban férfiakból és 50%-ban nőkből állt, az MM-betegek átlagéletkora 13,06 év, a kontrollcsoporté pedig 12,73 év volt. A kísérleteket az egyes alanyok beleegyezésével és írásos beleegyezésével végeztük, betartva az Orvosi Világszövetség etikai kódexét. A vizsgálatot a University of Texas Health Science Center at Houston intézményi felülvizsgálati bizottsága hagyta jóvá a HSC-MS- 00-00-0001 jóváhagyási számmal és a The Hospital for Sick Children Research Ethics Board 1000006149 jóváhagyási számmal. Minden résztvevő szülei kitöltötték a Swanson Nolan Achenbach Pelham-IV (SNAP-IV; www.adhd.net) értékelő skálát az ADHD állapotának felmérésére. A SNAP-IV skála 18 tételből áll, amelyek közül 9 a figyelmetlenséggel és 9 a hiperaktivitással-impulzivitással összefüggő viselkedést képviseli. Úgy tervezték, hogy igazodjon a Diagnosztikai és Statisztikai Kézikönyv-IV (DSM-IV) kritériumaihoz, amely széles körben elfogadott arany standard az ADHD diagnosztizálásában. A szülők gyermekük viselkedését egy négypontos skálán értékelték, nullától (egyáltalán nem) háromig (nagyon), a korábban leírtak szerint. Azokat a résztvevőket, akik a klinikailag meghatározott határértékeknek megfeleltek, és a populáció felső 5%-át képviselték a figyelmetlenségi skálán, “ADHD – túlnyomórészt figyelmetlen típusnak” nevezték; azok, akik csak a hiperaktivitás-impulzivitás skálán a felső 5%-ban emelkedtek, a “hiperaktív-impulzív típust” képviselték. Mindkét skála emelkedése az “ADHD kombinált típust” jelentette. A SNAP-IV az ADHD viselkedésének megbízható szülői alapú felmérése, amely jó egyezést mutat a strukturált interjúkkal, és amelyet széles körben használnak az ADHD értékelésére klinikai vizsgálatokban és számos kutatásban az Egyesült Államokban és világszerte. Az SNP-k kiválasztása, a genotipizálás és a statisztikai elemzés a korábban leírtak szerint történt. Röviden, az SNP-ket a referencia MTHFR génben (NM_005957) választottuk ki a Kaliforniai Egyetem Santa Cruz (UCSC) Genome Browser dbSNP Build132 adatbázisából, valamint a HapMap3 nyilvános kiadásából # 27 . Az SNP-ket a lehetséges funkció (pl. ha a variáns megváltoztatja az aminosavat), a gén elhelyezkedése és a 0,05-nél nagyobb minor allélfrekvencia alapján rangsoroltuk genotipizálásra. Összesen 7 SNP-t választottak ki az MTHFR génben (a hozzávetőleges elhelyezkedést lásd a 2. ábrán): rs3737965, rs2066470, rs9651118, rs1801133 (más néven 677C . T), rs1801131 (más néven 1298A . C, rs2274976 és rs4846049. Az elemzéshez MM-betegektől gyűjtöttek DNS-t. A genotipizálást a …
segítségével végezték el.