Braz J Med Biol Res, 2003. október, Volume 36(10) 1447-1454
Az 5-alfa-reduktáz 1-es típusú, de nem 2-es típusú gén kifejeződik a hirsute nők és normális egyének fejbőrének vertex területéről kitépett anagén hajszálakban
I.O. Oliveira1,2, C. Lhullier1, I.S. Brum1 és P.M. Spritzer1,3
1Departamento de Fisiologia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brasil
2Departamento de Fisiologia e Farmacologia, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, RS, Brasil
3Unidade de Endocrinologia Ginecológica, Serviço de Endocrinologia, Hospital de Clínicas de Porto Alegre, Porto Alegre, RS, Brasil
Abstract
Összefoglaló 
A jelen vizsgálat célja az 1. típusú (SDR5A1) és a 2. típusú (SDR5A2) 5a-reduktáz izoenzimek meghatározása 33 szőrösödő beteg (20 policisztás ovárium szindrómás és 13 idiopátiás hirsutizmusban szenvedő) fejbőrszőrzetében, és összehasonlítása 10 férfi és 15 normális nő szőrzetével. Az SDR5A1 és SDR5A2 expresszióját RT-PCR segítségével becsültük meg, belső kontrollként az ubikvitálisan expresszálódó ß2-mikroglobulin fehérje génjét használva. Az eredményeket a ß2-mikroglobulin abszorbanciájához viszonyított önkényes egységekben fejeztük ki (átlag ± SEM). Az SDR5A2 expressziója nem volt kimutatható egyetlen, e vizsgálatban elemzett hajmintában sem. Az SDR5A1 mRNS szintjében nem találtunk különbséget a férfiak és a normális nők között (0,78 ± 0,05 vs. 0,74 ± 0,06). Az SDR5A1 génexpresszió a normál nők (0,85 ± 0,04), valamint a policisztás ovárium szindrómában (0,78 ± 0,05) és az idiopátiás hirsutizmusban (0,80 ± 0,06) szenvedő nők fejbőréből kitépett haj sejtjeiben is hasonló volt. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy az SDR5A1 génexpresszió a fejbőr vertex területéről származó follikuláris keratinocitákban, úgy tűnik, nem függ össze a normál férfiak és nők, valamint a hirsutizmusban szenvedő betegek között megfigyelt szőrnövekedési különbségekkel. További vizsgálatokra van szükség az 5a-reductáz gének expressziójának vizsgálatára más fejbőr tüszős kompartmentekben, például a bőrpapillákban, valamint a test más helyeiről származó szőrtüszőkben is, annak érdekében, hogy tisztázzuk az androgén hatásmechanizmusát a hajnövekedési folyamatra és a kapcsolódó betegségekre.
Kulcsszavak: Bevezetés
Az androgének az emberi hajnövekedés fő szabályozói, és összefüggésbe hozhatók az egyik legfontosabb klinikai hajnövekedési rendellenességgel, a hirsutizmussal. Ez az állapot megfelel a testszőrzet túlzott növekedésének nőknél, akiknél a testszőrzet eloszlása férfi mintázatú. A hirsutizmus jelenléte jelezhet olyan állapotokat, amelyek a petefészkek és/vagy a mellékvesék fokozott androgénszekréciójával járnak együtt, mint a policisztás ovárium szindróma (PCOS), androgénszekretáló tumorok és a nem klasszikus mellékvese hiperplázia, vagy a keringő androgénekkel szembeni perifériás túlérzékenység (idiopátiás hirsutizmus, IH) eredménye lehet (1-3). Bár ez az állapot általában nem életveszélyes, a betegeket nagymértékben megviseli, és jelentős negatív pszichoszociális hatással jár. Az androgének hajnövekedésre gyakorolt hatásának vizsgálata hirsutizmus jelenlétében javítaná a humán szőrtüszők biológiájára vonatkozó ismereteinket.
Az összes aktív androgén célsejtekre gyakorolt hatását az azonos nukleáris androgénreceptorhoz való kötődés közvetíti. Az androgénrezisztencia-szindrómákkal kapcsolatos korábbi vizsgálatok feltárták az androgénreceptor jelentőségét az androgénfüggő szőrnövekedésben (4-6). Nemrégiben kopaszodó férfiak fejbőrszőrsejtjeiben fokozott androgénkötő képességet figyeltek meg (7). Eddig azonban nem találtak következetes különbséget az androgénreceptor számában vagy funkciójában szőrös betegeknél a normális alanyokhoz képest (8,9).
A szőrtüszők autonóm kontrollal rendelkeznek az androgén-metabolizmus felett, a szteroidhormonok termelését és lebontását a helyi igényeknek megfelelően szabályozzák (10). Normális körülmények között az 5a-reductáznak kulcsszerepe van az androgének szőrtüszőkre gyakorolt hatásában, a tesztoszteront a hatásosabb androgén dihidrotesztoszteronná alakítja át (11,12). A molekuláris klónozással végzett vizsgálatok két gént jellemeztek, amelyek az 1-es és 2-es típusú 5a-reduktáz izoenzimeket kódolják (13,14). A bőrben uralkodó 5a-reductáz izoenzim az 1-es típus (SDR5A1) (15), amely 60%-os homológiát mutat a prosztatára jellemző 2-es típusú 5a-reductázzal (SDR5A2) (14). Az 5a-reduktáz aktivitás növekedését mutatták ki a hirsute betegek genitális és szeméremtesti bőr fibroblasztjaiban a normális nők bőréhez képest (8,16). Ezek a vizsgálatok az 5a-reduktáz aktivitás növekedéséről számoltak be még az IH-ban is, amelyet a plazma emelkedett androgénszintjének hiánya jellemez (17). Ezenkívül a hirsute betegek szemérembőre ugyanazt az SDR5A1 izoformát fejezi ki, mint a normál alanyok szemérembőre, míg az SDR5A2 főként a normál alanyok és a hirsute betegek genitális bőrében fejeződik ki (18). Az 5a-reductáz izoenzimek élettani szerepe azonban nem teljesen tisztázott, és a különböző bőrkompartmentekben való eloszlásuk még mindig nem világos. Egyes immunhisztokémiai és enzimaktivitási vizsgálatok szerint az SDR5A1 enzim túlnyomórészt a faggyúmirigyekben, de a verejtékmirigyekben, a szőrtüszőkből származó epidermális sejtekben, a gyökérhüvelyben és a bőrpapilla sejtjeiben is expresszálódik (19-21), míg az SDR5A2 csak nagyon alacsony szinten expresszálódik ezekben a kompartmentekben. Ezzel szemben más vizsgálatok ezen izoenzimek eltérő eloszlását mutatták ki a pilosebaceus egységen belül (22-24). Úgy tűnik, hogy az SDR5A1 eloszlása nagyobb a szőrtüsző kompartmentekben, mint az SDR5A2-é. Továbbá, mivel a gyökérhüvelykeratinociták az SDR5A1 gén magas expresszióját mutatják, valószínűleg fontos szerepet játszanak a szőrtüszők androgénanyagcseréjében.
Jelen vizsgálat célja az volt, hogy felmérjük az SDR5A1 és SDR5A2 gének expresszióját a hirsute betegekből származó fejbőr vertex területének hajgyökérhüvelysejtjeiben, és összehasonlítsuk mindkét nemű normális alanyokkal.
Betegek és módszerek
Alanyok
A vizsgálati populációba a brazíliai Hospital de Clínicas de Porto Alegre nőgyógyászati endokrinológiai osztályának nőgyógyászati endokrinológiai osztályán 6 hónapos periódusban egymást követően hirsutizmus miatt felkeresett nők tartoztak. Harminchárom, 12 és 42 év közötti korú beteget választottak ki a vizsgálatba. Húsz betegnél PCOS-t, 13-nál pedig IH-t diagnosztizáltak. A PCOS diagnózisa a hiperandrogenizmus fizikai jellemzőin, a zavart menstruációs cikluson, a szérum luteinizáló hormon (LH) emelkedett szintjén vagy az LH/follikulus-stimuláló hormon arányon, a teljes tesztoszteron és/vagy a szabad androgén index (FAI) emelkedett szintjén, a kétoldali megnagyobbodott policisztás petefészek ultrahangos bizonyítékán (25,26), valamint a petefészek vagy mellékvese daganat vagy Cushing-szindróma hiányán alapult. Az IH-t a korábban leírtak szerint diagnosztizálták (27) olyan hirsute betegeknél, akiknek ovulációs ciklusa szabályos volt (a luteális fázis progeszteronszintje magasabb, mint 3,8 ng/ml), androgénszintjük normális, és nem volt ismert alapbetegségük.
A későn jelentkező (nem klasszikus) veleszületett mellékvese-hyperpláziás betegeket a 17-hidroxi-progeszteron magas plazmaszintje (>5 ng/ml) és/vagy az ACTH-stimulációt követő jelentős emelkedése (>12 ng/ml) alapján nem vették figyelembe a vizsgálatban (28,29). A hiperprolaktinémiás betegeket (a szérum prolaktinszint két különböző alkalommal 20 µg/l-nél magasabb) szintén kizárták.
Tizenöt 16-37 éves, rendszeres menstruációs ciklusú, normális nőt és tíz 16-29 éves férfit is beválasztottak a vizsgálatba, amelyet a Hospital de Clínicas de Porto Alegre etikai bizottsága jóváhagyott. Minden vizsgálati alanytól tájékozott beleegyezést kértek. A vizsgálatot megelőzően legalább 3 hónapig egyik alany sem kapott olyan gyógyszert, amelyről ismert, hogy befolyásolhatja az androgén-, ösztrogén- vagy gonadotropin-szérumszintet.
Az SDR5A1 és SDR5A2 mRNS szintjét reverz transzkripciós-polimeráz láncreakcióval (RT-PCR) becsülték meg normál férfiak, normál nők és hirsute betegek fejbőrének vertex részéből kitépett hajsejtekben.
Vizsgálati protokoll
Az antropometriai mérések közé tartozott a testsúly, a testmagasság és a testtömegindex (BMI = az aktuálisan mért testsúly kg-ban osztva a magassággal m2-ben). A hirsutizmus pontszámát a Ferriman-Gallwey-módszerrel (30) osztályozták, kivéve az alsó lábszár és az alkar területét.
A hormonális értékelést a menstruációs ciklus 2. és 10. napja között végezték, vagy bármely olyan napon, amikor a betegek amenorrheásak voltak. Egy éjszakai koplalás után vérmintát vettek egy antecubitális vénából az LH, a nemi hormonokhoz kötődő globulin (SHBG) és az összes tesztoszteron meghatározásához. Minden mintát reggel 8 és 10 óra között vettek. A FAI-t az összes tesztoszteron (nmol/l) és az SHBG (nmol/l) x 100 hányadosával becsültük.
Vizsgálatok
Az összes tesztoszteront kettős antitestes radioimmunoassay-vel (ICN, Costa Mesa, CA, USA) mértük, a vizsgálat kimutatási határa 0.04 ng/ml, valamint 10 és 15%-os intra- és interassay variancia együtthatóval (CV); az SHBG-t immunokemiluminometriás teszttel (ICMA; DPC, Los Angeles, CA, USA) mértük, 0,2 nmol/l kimutatási határral, valamint 5,0 és 8,0%-os intra- és interassay CV-vel. Az LH-t ICMA-val mértük, a kimutatási határ 0,7 mIU/ml, az intra- és interassay CV pedig 5,2, illetve 8,0% volt.
RT-PCR protokoll
Minden alany fejbőrének csúcsáról tépett anagén hajszálakat gyűjtöttünk, amelyeket azonnal folyékony nitrogénben lefagyasztottunk, és a laboratóriumba szállítottunk a vizsgálatokhoz. A teljes RNS kivonását és a cDNS szintézisét a korábban leírtak szerint végeztük (31). A kitépett hajgyökereket fenol-guanidin-izotiocianátban (Trizol, Gibco-BRL, Gaithersburg, MD, USA) homogenizáltuk. A teljes RNS-t kloroformmal extraháltuk és izopropanollal kicsaptuk 12 000 g centrifugálással 4ºC-on. Az RNS-pelletet kétszer mostuk 75%-os etanollal, dietil-pirokarbonáttal kezelt vízben reszuszpendáltuk, és 260 nm-es abszorbanciával számszerűsítettük.
Az első szál cDNS-t 5 µg teljes RNS-ből szintetizáltuk minden reakció esetében a SuperScript Preamplification System (Gibco-BRL) segítségével. Miután a templát RNS-t és a primereket 10 percig 70ºC-on denaturáltuk, 20 mM Tris-HCl, pH 8,4, valamint 50 mM KCl, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM dNTP mix és 10 mM ditiotreitol jelenlétében reverz transzkriptázt adtunk hozzá, és 55 percig 42ºC-on inkubáltuk. Az elegyet 70ºC-ra melegítettük a reakció leállítása érdekében, majd E. coli RNázzal inkubáltuk 20 percig 37ºC-on a nem átírt RNS elpusztítása érdekében. A különböző PCR-vizsgálatokban használt templát (cDNS) ugyanabból a reverz transzkripciós reakcióból származott. A PCR-t 50 µl végső térfogatban végeztük. Az első szál szintézisreakció két mikroliterét (10 ng várható cDNS-hozam mellett) 3 percig (csak a ß2-mikroglobulin esetében 2 percig) 94ºC-on denaturáltuk 20 mM Tris-HCl, pH 8,4, valamint 50 mM KCl és 1,5 mM MgCl2 jelenlétében. E forró indítás után 1,25 U Taq DNS-polimerázt adtunk hozzá ugyanezzel a Tris-HCl pufferrel, 1,5 mM MgCl2-vel, 0,4 µM sense és antisense primerrel és 0,2 mM dNTP-keverékkel együtt.
Az SDR5A1 (24) cDNS-szekvencia 368 bp hosszúságú fragmentumát és az SDR5A2 (14) cDNS-szekvencia 566 bp hosszúságú fragmentumát olyan primerekkel amplifikáltuk, amelyeket az intron-exon határok átfedésére terveztünk, hogy megakadályozzuk a szennyező genomi DNS amplifikációját. Az egyes mintákban lévő cDNS-mennyiségek normalizálása érdekében egy 623 bp hosszúságú, az ubiquitikusan expresszálódó ß2-mikroglobulin (32) fehérjének megfelelő cDNS-fragmentumot amplifikáltunk. Az SDR5A1 és SDR5A2, valamint a ß2-mikroglobulin primerek cDNS-szekvenciáit az 1. táblázat tartalmazza. A PCR-t a ciklusok számának (20-45) tesztelésével standardizáltuk, és az amplifikációt a lineáris tartományban végeztük. A végleges PCR-körülmények a következők voltak: 35 ciklus (45 s 94ºC-on, 45 s 60ºC-on, 90 s 72ºC-on, 10 perc 72ºC-on) az SDR5A1 esetében, 40 ciklus (1 perc 94ºC-on, 1 perc 65ºC-on, 2 perc 72ºC-on, 5 perc 72ºC-on) az SDR5A2 esetében, és 30 ciklus (1 perc 94ºC-on, 1 perc 55ºC-on, 1 perc 72ºC-on, 1 perc 72ºC-on, 5 perc 72ºC-on) a ß2-mikroglobulin esetében. A humán prosztata disszociált sejtjeiből származó cDNS-t minden PCR-reakcióban pozitív kontrollként használtuk. A negatív reakciókhoz nem adtunk cDNS-t. A PCR-keverékből vett mintát (15 µl) 1,5-2,0%-os agarózgélen etídium-bromiddal festett, 100 V-on futtatott és UV-fényben láthatóvá tett agarózgélen frakcionáltuk. A várt sávokat denzitometriás elemzéssel számszerűsítettük egy képfeldolgozó rendszer (ImageMaster VDS, Pharmacia Biotech, Uppsala, Svédország) segítségével.
Statisztikai elemzés
Az adatokat átlag ± SEM-ben adtuk meg, hacsak másként nem jeleztük. A csoportok átlagait Student t-próbával vagy egyirányú varianciaanalízissel (ANOVA), majd Duncan-teszttel, a mediánértékeket pedig Mann-Whitney-teszttel hasonlítottuk össze. A különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük, ha P < 0,05. Minden elemzést a Statistical Packages for the Social Sciences (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA) segítségével végeztünk.
Eredmények
A 2. táblázat összefoglalja a PCOS-es és IH-s betegek antropometriai és hormonális adatait. A hirsutista betegek két csoportja között nem volt szignifikáns különbség az életkor vagy a hirsutizmus klinikai pontszáma tekintetében. A PCOS-ben szenvedő hirsute betegek azonban magasabb BMI-t mutattak, és szignifikánsan magasabb tesztoszteron-, FAI- és LH-szintet mutattak, mint az IH csoport. Az SHBG koncentrációja alacsonyabb volt a PCOS csoportban, mint az IH csoportban.
Az SDR5A2 génexpressziót a jelen vizsgálatban egyetlen RT-PCR-rel elemzett fejbőrszőrmintában sem mutatták ki (1. ábra).
A 2. ábra az SDR5A1 mRNS-szintjét mutatja a normál személyek fejbőréből kitépett szőrsejtekben. Az SDR5A1 expressziója, amelyet a ß2-mikroglobulin abszorbanciájához viszonyított önkényes egységekben ábrázolunk, hasonló volt a férfiaknál (0,78 ± 0,05) és a normális nőknél (0,74 ± 0,06). Továbbá a follikuláris keratinociták SDR5A1 expressziójában nem volt szignifikáns különbség a normál nők (0,85 ± 0,04) és a PCOS (0,78 ± 0,04) vagy az IH (0,80 ± 0,06) hirsute csoportok között (3. ábra).
|
|
1. ábra. Etídium-bromiddal festett reprezentatív agarózgél, amely az SDR5A2 mRNS expresszióját mutatja RT-PCR segítségével férfiak (1-9), normális nők (10-17) és hirsute betegek fejbőréből kitépett szőrsejtekben: PCOS csoport (18-31) és IH csoport (32-39). Az 566 bp fragmentum az SDR5A2-nek (5a-R2), a 623 bp fragmentum pedig a ß2-mikroglobulinnak (ß2-m) felel meg. Az SDR5A2 amplifikáció csak a pozitív kontrollként (+) használt disszociált prosztata sejtekben volt látható. |
|
|
2. ábra. Reprezentatív gél, amely az RT-PCR segítségével meghatározott SDR5A1 mRNS-szinteket mutatja férfiak (1-7) és normális nők (8-14) fejbőréből kitépett szőrsejtekben. A 368 bp fragmentum az SDR5A1-nek (5a-R1), a 623 bp fragmentum pedig a ß2-mikroglobulinnak (ß2-m) felel meg. Az RT-PCR termékeket etídium-bromiddal festett agarózgélen tettük láthatóvá. + = pozitív kontroll. |
|
|
3. ábra. Reprezentatív gél, amely az RT-PCR segítségével meghatározott SDR5A1 mRNS-szinteket mutatja normál nők (1-14) és a szőrös betegek mindkét csoportjának (PCOS: 15-26; IH: 27-35) fejbőréből kitépett szőrsejtekben. A 368 bp hosszúságú fragmentum az SDR5A1 (5a-R1), a 623 bp hosszúságú fragmentum pedig a ß2-mikroglobulinnak (ß2-m) felel meg. Az RT-PCR termékeket etídium-bromiddal festett agarózgélen tettük láthatóvá. |
Megbeszélés
Bár a bőr 5a-reductáz aktivitása összefügg a hirsutizmussal, a szőrnövekedés e klinikai állapotában szerepet játszó izoenzim specifikus szerepét és azonosítását még jobban meg kell határozni. Jelen tanulmányban mindkét típusú 5a-reduktáz mRNS-expresszióját vizsgáltuk hirsutált betegek kitépett anagén fejbőrszőrsejtjeiben.
Az SDR5A1 gént normál személyek fejbőrének vertexéből nyert kitépett szőrsejtekben expresszálták. Más tanulmányok hasonló eredményeket mutattak ki, még akkor is, amikor az SDR5A1 mRNS-t tenyésztett follikuláris keratinocitákban vizsgálták (24,33). A kitépett anagén hajszálakat főként külső és belső gyökérhüvelyt alkotó keratinocita sejtek alkotják. A kötőszöveti hüvely, az alsó bulbus, a dermális papilla sejtjei és a faggyúmirigy hiányoznak a kitépett szőrszálakban. Adataink tehát megerősítik az SDR5A1 génexpresszióját a follikuláris keratinocitákban, és összhangban vannak másokkal, akik 5a-reduktáz immunreaktivitást mutattak ki a szőrtüszők gyökérhüvelysejtjeiben (20,23).
Jelen vizsgálatban a tépett fejbőrszőrzetből származó SDR5A1 mRNS szintje nem különbözött a normál férfiak és nők között. Korábbi vizsgálatok hasonló 5a-reduktáz aktivitást írtak le férfiak és nők szőrtüszőiben is (12,34). Ezzel szemben normális férfiaknál magasabb 5a-reduktáz aktivitást mutattak ki szeméremtest-mintákban, mint normális nőknél (1). Ezek az eredmények együttesen arra utalnak, hogy normális egyénekben az 5a-reduktáz szabályozása, úgy tűnik, különbözik a fejbőr follikuláris keratinocitái és a szeméremtest fibroblasztjai között.
Úgy tűnik, hogy a fejbőr szőrtüszősejtjei nem a hirsutizmus fő célpontjai. Ugyanakkor etikai nehézségekbe ütközik a szőrösödő betegek arcából történő mintavétel. Továbbá csak kevés irodalmi beszámoló van a fejbőr szőrtüszősejtjeinek molekuláris mechanizmusairól hirsutizmus jelenlétében (9). A fejbőr régiója mindkét nemnél jól ismert androgénérzékeny terület, és viszonylag könnyű mintát venni a fejbőr hajszálaiból. Ezért érdekes az androgénanyagcsere néhány aspektusát vizsgálni a fejbőrből kitépett hajszálsejtekben, különösen akkor, ha olyan alanyokat lehet összehasonlítani, akik endogén módon magasabb (PCOS) vagy normális (IH) keringő androgénszintnek vannak kitéve.
Nem tapasztaltunk különbséget az SDR5A1 mRNS szintjében a follikuláris keratinocitákban sem a hirsuta betegek és a normál nők, sem a normál férfiak és nők között. Sőt, a magas szérum androgénszintű betegek (PCOS csoport) ugyanolyan SDR5A1 génexpressziót mutattak, mint az IH és normál androgénszintű betegek. Bár az SDR5A1 a bőrben uralkodó izoenzim (14), a jelen eredmények azt jelzik, hogy a keringő androgének valószínűleg nem járulnak hozzá az SDR5A1 génexpressziójához a fejbőr follikuláris keratinocitáiban, ami arra utal, hogy az SDR5A1 nem a kulcsfontosságú izoenzim a fejbőr helyi androgénanyagcseréjében. Másrészt az 5a-reduktáz inhibitor finaszterid hatékonyságát bizonyították a férfias hajhullás (35), valamint az IH kezelésében (36,37). A finaszterid egy orálisan aktív inhibitor, amely előnyösen gátolja a 2-es típusú 5a-reduktázt, de gátolhatja az 1-es típusú izoenzimet is, ami a dihidrotesztoszteron és a 3a-androstenediol glükuronid szintjének jelentős csökkenését okozza. Nem rendelkezik sem az androgénreceptor iránti affinitással, sem androgén, ösztrogén, progesztagén vagy egyéb szteroid hatással (38). Eredményeinkkel összhangban ezek a vizsgálatok azt jelezték, hogy a 2-es típusú 5a-reduktáznak valószínűleg kritikusabb szerepe van a hajnövekedési folyamatban és a kapcsolódó klinikai állapotokban.
A jelen eredmények azt mutatják, hogy az SDR5A2 gén nem expresszálódott egyetlen alany, férfi vagy normális nő, illetve hirsute beteg follikuláris keratinocitáiban sem. Korábbi tanulmányok az SDR5A2 mRNS és enzimaktivitás preferenciális lokalizációját írták le (39,40) a bőrpapilla sejtjeiben, bár az SDR5A2 immunreaktivitást a szőrtüsző keratinocitáiban is találtak (20,22). A fehérjeexpresszió látszólagos eltérései e tanulmányok között legalábbis részben a minőségi adatok immunhisztokémiai elemzésének eltérő módszereivel magyarázhatók. Ami a jelen tanulmányban leírt SDR5A2 génexpresszió hiányát illeti, a génexpresszió elemzésének érzékenyebb módszerei, pl. valós idejű PCR, a jövőben valószínűleg tisztázni fogják ezt a kérdést.
Nem vizsgáltuk az 5a-reductáz izoenzimek génexpresszióját más follikuláris kompartmentekben, például a bőrpapillákban, mivel ezek a sejtek nincsenek jelen a kitépett izolált hajszálakban. A dermális papilla sejtjei csak kimetszési biopsziával nyerhetők, ami invazív és megterhelő módszer. Nagyon érdekes lesz azonban az 5a-reductáz izoenzimek vizsgálata a szőrös betegekből származó dermális papilla sejtjeiben, mivel feltételezhető, hogy ezek a sejtek az androgének közvetlen célpontjai lehetnek a szőrtüszőkben, parakrin jelekkel szabályozva a hajmátrix, a melanociták és a keratinociták aktivitását (10).
Úgy tűnik, hogy az SDR5A1 génexpresszió a fejbőr vertex területéről származó follikuláris keratinocitákban nem függ össze a normál férfiak és nők, valamint a hirsute betegek között megfigyelt hajnövekedési különbségekkel. Az 5a-reduktáz génexpressziójának a szőrtüszősejtekben különböző testhelyeken történő szabályozására vonatkozó további vizsgálatok segíthetnek a hajnövekedési folyamatra és a kapcsolódó betegségekre gyakorolt androgénhatás érdekes mechanizmusának tisztázásában.
1. Kuttenn F, Mowszowicz I, Schaison G & Mauvais-Jarvis P (1977). Androgéntermelés és bőranyagcsere hirsutizmusban. Journal of Endocrinology, 75: 83-91.
2. New MI, Lorenzen F, Lerner AJ et al. (1983). Szteroid 21 hidroxiláz hiány genotipizálása: hormonális referenciaadatok. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 57: 320-326.
3. Azziz R, Carmina E & Sawaya ME (2000). Idiopátiás hirsutizmus. Endocrine Reviews, 21: 347-362.
4. Mauvais-Jarvis P, Bercovici JP & Gauthier F (1969). In vivo vizsgálatok a tesztoszteron metabolizmusáról normál férfiak és a herék feminizációs szindrómájában szenvedő betegek bőrében. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 29: 417-421.
5. Griffin JE & Wilson JD (1977). Tanulmányok az androgénrezisztencia nem teljes formáinak patogeneziséről férfiban. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 45: 1137-1143.
6. Kuttenn F, Mowszowicz I, Wright F, Baudot N, Jaffiol C, Robin M & Mauvais-Jarvis P (1979). Férfi pszeudohermaphroditizmus: az 5a-reduktázhiány egy esetének összehasonlító vizsgálata a here feminizáció három teljes formájával. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 49: 861-865.
7. Hibberts NA, Howell AE & Randall VA (1998). A kopaszodó szőrtüsző bőrpapilla sejtjei magasabb szintű androgénreceptorokat tartalmaznak, mint a nem kopaszodó fejbőrből származó sejtek. Journal of Endocrinology, 156: 59-65.
8. Mowszowicz I, Melanitou E, Doukani A, Wright F, Kuttenn F & Mauvais-Jarvis P (1983). Androgénkötő kapacitás és 5-reductáz aktivitás hirsute betegekből származó szeméremtest fibroblasztjaiban. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 56: 1209-1213.
9. Oliveira IO, Lhullier C, Brum IS & Spritzer PM (2003). A 2-es típusú 17ß-hidroxiszteroid-dehidrogenáz génexpressziója hirsute nők fejbőrszőrzetében. Steroids (in press).
10. Randall VA (1994). Androgének és az emberi haj növekedése. Clinical Endocrinology, 40: 439-457.
11. Hay JB & Hodgins MB (1973). Az androgének metabolizmusa in vitro az emberi arc- és hónaljbőrben. Journal of Endocrinology, 59: 475-486.
12. Takayasu S, Wakimoto H, Itami S & Sano S (1980). A tesztoszteron 5a-reductáz aktivitása az emberi bőr különböző szöveteiben. Journal of Investigative Dermatology, 74: 187-191.
13. Andersson S, Bischop RW & Russell DW (1989). A szteroid 5a-reductáz, a férfi nemi differenciálódáshoz nélkülözhetetlen enzim expressziója, klónozása és szabályozása. Journal of Biological Chemistry, 264: 16249-16255.
14. Andersson S, Berman DM, Jenkins EP & Russell DW (1991). A szteroid 5a-reductase 2 gén deléciója hím pszeudohermaphroditizmusban. Nature, 354: 159-161.
15. Harris G, Azzolina B, Baginsky W, Cimis G, Rasmusson G, Tolman R, Raetz C & Ellsworth K (1992). A szteroid 5a-reductáz egy izoenzimjének azonosítása és szelektív gátlása a humán fejbőrben. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA, 89: 10787-10791.
16. Lobo RA, Goebelsmann U & Horton R (1983). Bizonyítékok a perifériás szöveti események jelentőségére a hirsutizmus kialakulásában policisztás ovárium szindrómában. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 57: 393-397.
17. Serafini P & Lobo RA (1985). Fokozott 5-reduktáz aktivitás idiopátiás hirsutizmusban. Fertilitás és sterilitás, 43: 74-78.
18. Mestayer CH, Berthaut I, Portois M-C, Wright F, Kuttenn F, Mowszowicz I & Mauvais-Jarvis P (1996). Az 5a-reduktáz 1-es típusú predomináns expressziója normál alanyok és szőrös betegek szeméremtestében. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 81: 1989-1993.
19. Luu-The V, Sugimoto Y, Puy L, Labrie Y, Solache IL, Singh M & Labrie F (1994). Az 5a-reduktáz jellemzése, expressziója és immunhisztokémiai lokalizációja az emberi bőrben. Journal of Investigative Dermatology, 102: 221-226.
20. Eicheler W, Dreher M, Hoffmann R, Happle R & Aumüller G (1995). Immunhisztokémiai bizonyítékok az 5a-reduktáz izoenzimek differenciális eloszlásáról az emberi bőrben. British Journal of Dermatology, 133: 371-376.
21. Chen W, Zouboulis CC, Fritsch M, Blume-Peytavi U, Kodelja V, Goerdt S, Luu-The V & Orfanos CE (1998). Az 1. típusú 5a-reduktáz expressziójának heterogenitásának és mennyiségi különbségeinek bizonyítéka tenyésztett emberi bőrsejtekben: bizonyíték a melanocitákban való jelenlétére. Journal of Investigative Dermatology, 110: 84-89.
22. Bayne EK, Flanagan J, Einstein M et al. (1999). Az 1. és 2. típusú 5a-reduktáz immunhisztokémiai lokalizációja az emberi fejbőrben. British Journal of Dermatology, 141: 481-491.
23. Sawaya ME & Price VH (1997). Az I. és II. típusú 5a-reduktáz, az aromatáz és az androgénreceptor eltérő szintjei androgenetikus alopeciában szenvedő nők és férfiak szőrtüszőiben. Journal of Investigative Dermatology, 109: 296-300.
24. Courchay G, Boyera N, Bernard BA & Mahe Y (1996). A szteroidogenezis enzim altípusainak Messenger RNS expressziója az emberi pilosebaceous egységben. Skin Pharmacology, 9: 169-176.
25. Adams J, Franks S, Polson DW, Mason HD, Abdulwahid N, Tucker M, Morris DV, Price J & Jacobs HC (1985). Multifollikuláris petefészkek: klinikai és endokrin jellemzők és válasz a pulzáló gonadotropin felszabadító hormonra. Lancet, 2: 1375-1379.
26. Herter LD, Magalhães JA & Spritzer PM (1996). A petefészek térfogatának meghatározásának jelentősége menstruációs zavarokkal küzdő serdülő lányoknál. Journal of Clinical Ultrasound, 24: 243-248.
27. Spritzer PM, Oppermann-Lisboa K, Mattiello S & Lhullier F (2000). A spironolakton alkalmazása egyszeri hatóanyagként hirsute betegek hosszú távú terápiájában. Clinical Endocrinology, 52: 587-594.
28. Spritzer PM, Billaud L, Thalabard J, Kuttenn F & Mauvais-Jarvis P (1990). Cyproteron-acetát versus hidrokortizon kezelés késői mellékvese hiperpláziában. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 70: 642-645.
29. Azziz R, Dewailly D & Owerbach D (1994). Nem klasszikus mellékvese hiperplázia: jelenlegi koncepciók. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 78: 810-815.
30. Ferriman D & Gallwey JD (1961). A testszőrzet növekedésének klinikai értékelése nőknél. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 21: 1140-1148.
31. Reis FM, Maia AL, Ribeiro MFM & Spritzer PM (1999). A c-fos és a prolaktin génexpressziójának progesztin modulációja a humán endometriumban. Fertilitás és sterilitás, 71: 1125-1132.
32. Taplin ME, Bubley GJ, Shuster TD, Frantz ME, Spooner AE, Ogata GK, Keer HN & Balk SP (1995). Az androgénreceptor gén mutációja metasztatikus androgén-független prosztatarákban. New England Journal of Medicine, 332: 1393-1398.
33. Eicheler W, Huth A, Happle R & Hoffmann R (1996). Az 5a-reduktáz és az androgénreceptor RNS-szintje emberi bőrben, szőrtüszőkben és tüszőből származó sejtekben. In: Van Neste DJJ & Randall VA (Szerkesztők), Hair Research for the Next Millenium. Elsevier Science, Amszterdam, 327-331.
34. Schweikert HU & Wilson JD (1974). Az emberi haj növekedésének szabályozása szteroid hormonok által. I. A tesztoszteron anyagcseréje izolált hajszálakban. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 38: 811-819.
35. Kaufman KD, Olsen EA, Whiting D et al. (1998). Finaszterid az androgenetikus alopeciában szenvedő férfiak kezelésében. Finasteride Male Pattern Hair Loss Study Group. Journal of the American Academy of Dermatology, 39: 578-589.
36. Tartagni M, Schonauer LM, De Salvia MA, Cicinelli E, De Pergola G & D’Addario V (2000). A Diane 35 és a Diane 35 plusz finaszterid összehasonlítása a hirsutizmus kezelésében. Fertilitás és sterilitás, 73: 718-723.
37. Sahin Y, Diller S & Kelestimur F (2001). A Diane 35 és a Diane 35 plusz finaszterid összehasonlítása a hirsutizmus kezelésében. Fertilitás és sterilitás, 75: 496-500.
38. Rittmaster RS (1994). Finaszterid. New England Journal of Medicine, 330: 120-125.
39. Asada Y, Sonoda T, Ojiro M, Kurata S, Sato T, Ezaki T & Takayasu S (2001). Az 5a-2 típusú reduktáz konstitutívan expresszálódik a szőrtüsző bőrpapillájában és kötőszöveti hüvelyében in vivo, de nem in vitro tenyésztés során. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 86: 2875-2880.
40. Eicheler W, Happle R & Hoffmann R (1998). Az 5a-Reduktáz aktivitás az emberi szőrtüszőben a bőrpapillában koncentrálódik. Archives of Dermatological Research, 290: 126-132.