[Az IGRA-kutatások fejlődése]

A mikobaktériumok, köztük az M. tuberculosis (Mtb) genomikai elemzésének fejlődése lehetővé tette, hogy megtaláljuk az Mtb-specifikus antigéneket, az ESAT-6-ot és a CFP-10-et, amelyek erős interferon-gammát (IFN-gamma) indukálnak a szenzitizált T-sejtekből. Röviddel ezen antigének felfedezése után a tuberkulózis (TBC) fertőzés diagnosztikai tesztjeit ezen antigének felhasználásával fejlesztették ki. Mivel az ESAT-6 és a CFP-10 minden BCG altörzsből és a legtöbb nem-tuberkulózisos mycobaktériumból hiányzik, ezek a diagnosztikai tesztek nem keverednek a BCG-vakcinációval és a legtöbb nem-tuberkulózisos mycobaktérium fertőzésével. Ezeket a diagnosztikai teszteket Interferon-Gamma Release Assay-nek (IGRA) nevezik, és jelenleg két kereskedelmi forgalomban kapható teszt létezik. Az egyik az ELISA-módszeren alapuló QuantiFERON-TB Gold (Japánban QuantiFERON TB-2G, QFT-2G), a másik pedig a T-SPOT. TB, amely ELISPOT-módszeren alapul, és Japánban még nem engedélyezték. Mint általában a T-SPOT. TB érzékenyebbnek bizonyult, mint a QFT-2G, a T-SPOT. TB engedélyezése Japánban várható. Az IGRA-k esetében azonban még sok a megoldásra váró kérdés, mivel még csak most kezdtük el használni ezeket a teszteket. Tavaly megjelent egy tanulmány, amely ezeket a kérdéseket integrálta, és hasznos lenne. Ezen a miniszimpóziumon Dr. Peter Andersen beszámolt a tuberkulózis-fertőzés diagnosztikai tesztjeinek fejlődéséről, az aktív TBC és a látens TBC-fertőzés (LTBI) megkülönböztetésének lehetőségéről, amit a jelenlegi IGRA-k nem tesznek lehetővé, valamint az IGRA-k prognosztikai felhasználásáról (A japán tartalomról az elnökök számoltak be). Dr. Ariga beszámolt a QFT-2G alkalmazásáról a vértől eltérő minták esetében. Arról az érdekes adatról is beszámolt, hogy mely T-sejtek reagáltak a QFT-2G-ben. Dr. Higuchi átfogóan beszámolt a QFT-2G teszt több kérdésére vonatkozó adatokról. Jelenleg az IGRA-k használata gyorsan terjed. Ilyen körülmények között nagyon fontos lenne az IGRA-k jellemzőinek megfelelő megértése. Reméljük, hogy ez a miniszimpózium segíthet e kérdések megértésében. 1. Interferon-Gamma Release Assays (IGRA) és antigének a látens fertőzés kimutatására és a betegség előrejelzésére: Peter ANDERSEN (Fertőző betegségek immunológiai osztálya és az SSI Vakcinakutatási Központ, Statens Serum Institut, Dánia) A globális tuberkulózis-ellenőrzés egyik legfontosabb kihívása a látens tuberkulózis-fertőzés diagnosztizálása és kezelése. A látens tuberkulózis-fertőzés kimutatására jelenleg használt módszer, a tuberkulin bőrteszt alacsony specificitású. A Mycobacterium tuberculosisra specifikus antigének azonosítása a tisztított fehérjeszármazék helyettesítésére ezért kiemelt nemzetközi kutatási prioritás. A M. bovis bacille Calmette-Guérin vakcinatörzsekből, valamint a legtöbb nem tuberkulotikus mikobaktériumból hiányzó antigének diagnosztikus potenciáljának szigorú értékelését végeztük el. Három jelentős diagnosztikai potenciállal rendelkező antigént azonosítottunk: ESAT-6, CFP-10 és TB 7.7. Ezeket az antigéneket jelenleg olyan IGRA-tesztekben használják, mint a QuantiFERON, amelyek az interferon-gamma termelését mérik a szenzibilizált T-limfocitákból, ezáltal jelezve a folyamatban lévő fertőzést. Az EU-ban, az USA-ban és Japánban, ahol ezek a tesztek piacra kerültek, gyorsan nyilvánvalóvá vált ennek a megközelítésnek az értéke a kontaktok nyomon követésében. Javasolni fogom, hogy az ilyen tesztek módosíthatók a látensen fertőzöttek közül azon személyek azonosítására, akiknél a legnagyobb a kockázata az aktív fertőző tbc kialakulásának. A népesség ezen részének célzott kezelése lehetőséget kínál a TBC megelőzésére, mielőtt az fertőzővé válna, ami nagyban hozzájárulna e globális járvány végső ellenőrzéséhez. 2. Az M. tuberculosis antigénre specifikus immunválaszok–perifériás vér és gyulladásos helyek: Haruyuki ARIGA (Tokyo National Hospital Organization Tokyo National Hospital) Az aktív tuberkulotikus pleuritisz, valamint a tuberkulotikus eredetű peritonitis, meningitis és pericarditis diagnosztizálására szolgáló pontosabb módszer kifejlesztése érdekében antigénspecifikus interferon-gamma (IFN-gamma) felszabadulási vizsgálatot hoztunk létre üregi folyadékminták felhasználásával. A vizsgálati alanyok 30 bakteriológiailag igazolt aktív tuberkulózisos szerozitiszben szenvedő beteg és 49 véglegesen nem tuberkulózisos etiológiájú beteg volt. A tenyésztést 18 órán keresztül végezték a folyadék mononukleáris sejtjeivel a váladék felülúszójában, sóoldattal vagy Mycobacterium tuberculosis-specifikus antigén peptidekkel, korai szekréciós antigén target 6-tal és tenyésztési szűrlet 10 fehérjével együtt. Az IFN-gamma koncentrációját a tenyésztési felülúszókban ELISA-val mértük. Az aktív tuberkulózisos szerozitiszben szenvedő betegeknél az üregi folyadékminták antigénspecifikus IFN-gamma-válaszai szignifikánsan magasabbak voltak, mint a nem tuberkulózisos folyadékmintáké. A receiver működési jelleggörbe alatti terület szignifikánsan nagyobb volt az üregfolyadék IFN-gamma válaszára, mint az üregfolyadék adenozin-deamináz és a teljes vér IFN-gamma felszabadulásának vizsgálatára. Az üregfolyadék IFN-gamma felszabadulásának vizsgálata noninvazív módszer lehet a tuberkulózisos szerozitisz pontos és gyors diagnosztizálására olyan betegeknél, akiknél klinikailag aktív tuberkulózis gyanúja merül fel az üregrendszerben, de bakteriológiai bizonyíték nem szerezhető. 3. Az IGRA több kérdése: Kazue HIGUCHI (Tuberkulózis Kutatóintézet, Japán Tuberkulózisellenes Szövetség). Bár a kontaktvizsgálatokra vonatkozó, tavaly felülvizsgált irányelvben a QFT-2G használatát ajánlották a kontaktvizsgálatokhoz, a QFT-2G-ben több kérdés is van. Ezen a miniszimpóziumon a QFT-2G teszt több kérdésével kapcsolatos adatokat mutattak be. Ezek között szerepelt a QFT-2G alkalmazása az immunrendszer szempontjából sérülékeny egyéneknél, például csecsemőknél és HIV-pozitívoknál, a kemoterápia hatása a QFT-2G tesztre, az aktív tbc kialakulásának előrejelzése QFT-2G-vel, a QFT-2G következő generációja, a QFT-2G teszt minőségbiztosítása, valamint a jelenlegi QFT-2G teszt néhány problémája. Fontos lenne ezeknek a kérdéseknek a kutatása és az IGRA-k javítása az alapvető immunológia alapján.