Biológia I. laboratóriumi kézikönyv

Azt, amit a labor után képesnek kell lennie elmagyarázni másnak is:

• Komponens
• Teljes nagyítás
• Binokuláris
• Nézőmező
• Fókusz mélysége
• Inverzió jelenség

Diavetítés

Háttér

A biológusok által vizsgált organizmusok (baktériumok) és organizmusrészek (sejtek) közül sok túl kicsi ahhoz, hogy emberi szemmel látható legyen. Mikroszkópot használunk, hogy a vizsgálatainkhoz szükséges mintákat felnagyítsuk. A mikroszkóp szó jelentése “kicsiben látni”, és az első kezdetleges mikroszkópot 1595-ben készítették.

A mikroszkópoknak több típusa létezik, de te többnyire összetett fénymikroszkópot fogsz használni. Ez a típusú mikroszkóp két lencsén, az okuláron és az objektíven keresztül fókuszált látható fényt használ egy kis minta megtekintéséhez. A fénymikroszkóppal csak azok a sejtek lesznek láthatóak kétdimenziós képen, amelyek elég vékonyak ahhoz, hogy a fény áthatoljon rajtuk.

A másik mikroszkóp, amelyet a laborban használni fogsz, a sztereoszkópos vagy boncoló mikroszkóp. Ez a típusú mikroszkóp látható fényt használ, hogy a vastagabb, nagyobb példányokat, például egy rovart, 3D-ben nézze meg. Mivel nagyobb mintákat tekint meg, a boncoló mikroszkóp nagyítási tartománya alacsonyabb, mint az összetett fénymikroszkópé.

Az oktatója át fogja tekinteni az összetett fénymikroszkópok részeit és funkcióit, amelyeket a félév során használni fogunk. Töltse ki a következő oldalon található táblázatot, hogy segítsen megjegyezni ezeket a fontos információkat. Valószínűleg gyakran vissza fog térni erre az oldalra. Itt van egy fénymikroszkóp képe, amelyet fel kell címkézned és jegyzetelned kell.

.

A mikroszkóp részei	Funkció
Okulárok (okulárok)
Kar
forgatható orrnyílás
Színpad
Objektívek
Színpad vezérlőgomb
Színpad vezérlőgomb
Kondenzátor
Iriszmembrán
Substage lámpa (Illuminátor)
Gyakori beállítás
Fin. beállítás
Bázis

Szabályok és utasítások az összetett fénymikroszkópok használatához

Az oktató megbeszéli a mikroszkóp használatát az osztályával. Át fogja tekinteni a helyes fókuszáláshoz követendő megfelelő lépéseket. Követnie kell a lépésenkénti sorrendet, ahogyan azt az oktatója jelzi. Még ha ismeri is ezt a típusú mikroszkópot, akkor is elvárjuk, hogy az osztály többi tagjával együtt haladjon végig a fókuszálás áttekintésén.

1. Fontos általános szabályok:
   1. A mikroszkópot mindig két kézzel hordozza – egyik kezét helyezze a mikroszkóp karjára, a másik kezét pedig a mikroszkóp talpa alá.
   2. Ne érintse meg az objektívlencséket (azaz az objektívek hegyét).
   3. Tartsa az objektíveket letapogató helyzetben, és a tárgylemezt tartsa alacsonyan, amikor tárgylemezeket tesz hozzá vagy vesz ki.
   4. Mindig oldalról nézze meg a mikroszkópot, amikor a tárgylemez magasságának nagyobb változtatását végzi.
   5. A tárgylencséket csak speciális lencsetisztító papírral és lencsetisztító folyadékkal szabad tisztítani.
   6. NEM szabad kézimunkázni – a mikroszkópot nem szabad szétszedni. A meghibásodásokat jelentse az oktatójának.
2. Mikroszkópot a laboratóriumi szekrényből:
   1. Először szabadítson fel helyet az asztalon a mikroszkóp számára – kerülje a zsúfolt munkaterületet.
   2. A mikroszkópok aszerint vannak számozva, hogy hol ül. Keresse meg a számot a padja alatt, és használja a megfelelő mikroszkópot.
   3. KÉT kézzel vigye a mikroszkópot.
   4. biztosítsa az elektromos kábelt – ne hagyja, hogy lelógjon az asztalról!
3. Amikor visszahelyezi a mikroszkópot a laboratóriumi szekrénybe:
   1. Húzza le a színpadot.
   2. Pörgesd a pásztázó objektívet az asztal fölé.
   3. Vegye le a tárgylemezt az asztalról.
   4. Tisztítsa meg a tárgylemezt és az objektívet a mellékelt speciális lencsetisztító folyadékkal és papírral.
   5. Az asztalt igazítsa úgy, hogy az ne álljon túl messze egyik oldalra sem.
   6. Rögzítse a zsinórt úgy, hogy a mikroszkóp asztala alá tekeri..
   7. Tegye vissza a porvédő fedelet.
   8. Vissza a mikroszkópot KÉT kézzel.
   9. Tegye vissza a mikroszkópot ugyanabba a rekeszbe, ahonnan kapta, ügyelve arra, hogy karnyújtásnyira tegye.
4. A mikroszkóp fókuszálásához:
   Nézze a mikroszkópot oldalról:
   1. Engedje le az asztalt, ameddig csak lehet.
      1. Pörgesse el az objektíveket úgy, hogy a pásztázó objektív lefelé mutasson az asztalra.
      2. Állítsa be az asztalt úgy, hogy az apertúra (az asztal közepén lévő nyílás) középen legyen.
      3. Helyezze a tárgylemezt az asztalra, a rögzítéshez használja az asztal rögzítőjét. Az állványrögzítő csak az állvány vízszintes síkjában mozog, és úgy rögzíti a tárgylemezt, hogy éppen csak megérinti a tárgylemez jobb alsó sarkát.
      4. A tárgylemez mozgatásával állítsa a mintát a tárgylemezen az objektív alá.
      5. Majdnem a végsőkig mozgassa felfelé az állványt, ügyelve arra, hogy a tárgylemez ne érjen az objektív lencséhez – nézze meg oldalról, hogy lássa, milyen magasra kell emelni az állványt.
   2. Nézzen át az okulárokon:
      1. A durva beállítási gombbal mozgassa lefelé a tárgyasztalt, amíg a minta fókuszba nem kerül, majd élesítse a fókuszt.
      2. A tárgyasztalt mozgatásával állítsa a mintát a mikroszkóp mezejébe.
   3. Nézze meg a mikroszkópot oldalról:
      1. Lassan forgassa a kis teljesítményű (10X) objektívet a helyére.
   4. Nézzen át az okulárokon:
      1. Szükség esetén élesítse a fókuszt a durvaállító gombbal. Általában csak minimális mértékű beállításra van szükség.
      2. Középpontba állítja a mintát a mezőben, ha szükséges.
   5. Nézze a mikroszkópot oldalról:
      1. A nagy teljesítményű objektívet nagyon óvatosan forgassa a helyére!
   6. Nézzen át az okulárokon:
      1. Kizárólag a finombeállító gomb segítségével élesítse a fókuszt. Ha szükséges, állítsa újra a középpontot. (Ha a minta “eltűnt”, azonnal térjen vissza a kis teljesítményre, és centrálja újra a mintát!)
      2. A tárgylemez eltávolításakor mindig állítsa vissza az objektíveket a pásztázási pozícióba, és engedje le a tárgylemezt, mielőtt leemelné a tárgylemezt!

1. rész: Teljes nagyítás

A nagyítás a mikroszkóppal készített kép méretének és a tárgy tényleges méretének az aránya. Ha azt mondjuk, hogy a nagyítás 10, akkor a mikroszkóppal látott kép tízszer nagyobb, mintha szabad szemmel néznénk a mintát. Ne feledje, hogy egy összetett fénymikroszkóp esetében két lencsével nagyít, ezért a teljes nagyítás kiszámításához az objektív nagyítását megszorozza az okuláris nagyítással. Tekintse meg a mikroszkópot, és használja az alábbi táblázatot az egyes lencsék teljes nagyításának kiszámításához:

	Objektív objektív	Okuláris objektív	= Teljes nagyítás
Scan objektív
Alacsony objektív
Magas objektív

2. rész: Inverziós jelenség

A tanteremben rendelkezésre álló “e” betűs dia. Nézzétek meg a diát szemmel, majd helyezzétek a mikroszkópra. Használja a fókuszálási sorrendet, hogy a tárgylemezt kis fényerővel nézze meg.

Eljárás

1. Rajzolja az “e” betűt úgy, ahogy az megjelenik, amikor a tárgylemezt mikroszkóp nélkül nézi.
2. Rajzolja az “e” betűt úgy, ahogy az megjelenik, amikor a tárgylemezt mikroszkóp alatt nézi.
3. Mozgassa a tárgylemezt jobbra a mechanikus állítókar segítségével, miközben az okuláron keresztül nézi. Merre mozog az “e” betű?
4. Tolja el magától a tárgylemezt a mechanikus asztali kar segítségével, miközben az okuláron keresztül nézi. Merre mozog az “e”?

Mondja el saját szavaival az inverziós jelenséget.

3. rész: Látómező

A látómező a minta azon része, amelyet az objektíveken keresztül nézve lát. A látómező nagyobb nagyításoknál csökken.

Eljárás

Tegyen egy kék műanyag vonalzót a színpad nyílásán úgy, hogy a vonalzó széle függőleges vonalként látható legyen a látómező átmérője mentén. Becsülje meg a mezőméretet milliméterben az egyes objektívlencsékhez.

Scan __________ Alacsony (10X) __________ Magas (40X) __________

4. rész: Fókuszmélység

A fókuszmélység a minta azon vastagsága, amely adott nagyításnál fókuszban marad. A fókuszmélység nagyobb nagyításnál csökken.

Eljárás

Vegyünk egy színes fonalas tárgylemezt, és tekintsük átvilágítás vagy kis fényerő alatt. Ezután határozza meg, hogy melyik színes szál van:

• A tetején
• A közepén
• Az alján

Tipp: a fókuszálásra vonatkozó utasítások segítségével fókuszáljon arra a területre, ahol a három szál keresztezi egymást. Használja a finom fókuszt a szálak sorrendjének megkülönböztetéséhez.

5. rész: Nedves montázs készítése

A félév során számos egyszerű diapreparátum, úgynevezett “nedves montázs” sikeres elkészítése várható. A megfigyelendő mintát egy tiszta tárgylemezre helyezzük, egy-két csepp vizet adunk hozzá, majd a víz és a minta fölé óvatosan egy fedőlemezt helyezünk. Az oktatója bemutatja ezt a technikát.

Készítsen nedves preparátumot tóvízből az alábbi eljárás szerint:

1. Tegyen egy csepp tóvizet egy tiszta üveg tárgylemezre az eldobható műanyag pipetta segítségével.
2. Fedje le a tóvizet a tárgylemezen egy fedőlappal. Próbálja meg ferdén felhelyezni a fedőlapot, hogy elkerülje a légbuborékokat.
3. Törölje le a felesleges folyadékot a tárgylemezről.
4. Tegye a tárgylemezt a mikroszkópra, hogy megfigyelhesse a mintát.
   1. Kezdje a pásztázó objektívvel
   2. Figyelmesen váltson át az alacsony és a magas objektívre, ha szükséges.

Elképzelhető, hogy élő organizmusokat fog látni a tó vizében. Ha zöld anyagot lát, az valószínűleg valamilyen növény. Nézze meg, hogy mozog-e valami. Az alábbi helyen írd le, mit figyelsz meg a mikroszkóp alatt, és rajzolj egy egyszerű képet.

6. rész: Sztereoszkópos boncmikroszkóp

Az oktatója bemutatja a bonctávcső helyes használatát. Ezek a mikroszkópok általában kisebb nagyítást adnak, mint az Ön által használt összetett mikroszkóp.

Eljárás

Nézze meg a laborasztalnál rendelkezésre álló mintákat a boncoló mikroszkóp segítségével. Vegye észre, hogy a mikroszkópnak két fényforrása van, egy alulról és egy felülről érkező. A minták nincsenek mindig tárgylemezre szerelve. Azt is vegye figyelembe, hogy amikor a boncoló mikroszkóp alatt a tárgyakat nézi, azok háromdimenziósak.

A mikroszkóp tisztítása és ápolása

1. Írd le, hogyan és mivel kell tisztítanod a mikroszkóp lencséjét.
2. Négy dolgot sorolj fel, amit a labor végén, a mikroszkóp használatának befejezésekor meg kell tenned.