Abstract
Az orális candidiasist a Candida nemzetséghez tartozó gombák okozzák, és az emberi szájüreg egyik leggyakoribb opportunista gombás fertőzése. Tekintettel e betegség klinikai változékonyságára, a klinikai megerősítéshez, valamint a más betegségekkel való differenciáldiagnózis felállításához gyakran mikrobiológiai módszerekre van szükség. E rövid technikai jelentés célja, hogy bemutasson egy egyszerű, szék melletti módszert, amely azonnali mikroszkópos diagnózist biztosít e betegségről. Egy 14 éves fiú esetét mutatjuk be, aki műfogsorral összefüggő erythemás stomatitisben szenvedett, amelyet egy egyszerűsített közvetlen mikroszkópos technikával diagnosztizáltak és követtek nyomon. Ez lehetővé teszi a pontos diagnózist egy nem invazív és fájdalommentes mintavételi módszerrel, laboratóriumi eredményekkel összekapcsolva.
1. Bevezetés
A Candida nemzetségbe tartozó gombák által okozott orális candidiasis az emberi szájüreg egyik leggyakoribb opportunista gombás fertőzése. E nemzetség százötven faját izolálták a szájüregben, amelyek 80%-a a Candida albicans-nak felel meg . A szájüregi candidiasis-fertőzés lehet akut vagy krónikus, és pszeudomembranosus vagy erythemás fertőzésnek minősül. A szájüregi candidiasis az egyik leggyakoribb nyálkahártya-betegség, mivel a fertőzés minden típusa megtalálható . A fertőzés fokozott előfordulása különböző hajlamosító tényezőkhöz köthető, mint például a hosszan tartó antibiotikum-kezelés, alultápláltság, endokrin betegségek, HIV-fertőzés, xerostómia, dohányzás, rossz szájhigiénia és a műfogsor használata . Jellemzően a szájüregi candidiasis diagnózisa a klinikai tüneteken alapul, és általában egyszerű az akut pseudomembranosus candidiasis esetében, különösen csecsemőknél. Tekintettel azonban e betegség klinikai változékonyságára, a klinikai megerősítéshez, valamint a más betegségekkel való differenciáldiagnózis felállításához gyakran mikrobiológiai módszerekre van szükség. Ezenkívül a gombaellenes gyógyszerekkel szembeni rezisztenciával jellemezhető esetekben, különösen a krónikus betegeknél, előnyös lehet egy további mikrobiológiai vizsgálat. Jelenleg számos módszert alkalmaznak a Candida fajok izolálására és azonosítására, beleértve a kenetek közvetlen mikroszkópos vizsgálatát, a festéseket, a tenyésztéseket és a genetikai módszereket (PCR) . Új azonosítási módszereket is tesztelnek a gyors és pontos kimutatás érdekében . Egy nemrégiben készült irodalmi áttekintés kimutatta a közvetlen mikroszkópia előnyeit a gyermekek és serdülők orális candidiasisának diagnózisában . E rövid szakmai beszámoló célja, hogy bemutasson egy egyszerű, szék melletti módszert, amely azonnali mikroszkópos diagnózist biztosít e betegségről.
2. Esetjelentés
A módszer bemutatására egy 14 éves fiú esetét mutatjuk be, aki műfogsorral összefüggő erythemás stomatitisben szenvedett (1. ábra). A műfogsorral összefüggő stomatitist a kivehető fogpótlás alatt fekvő szájnyálkahártya gyulladásos folyamataként definiálják. Fiatal betegeknél a műfogsorral összefüggő stomatitis a gyermekprotézis szövődménye lehet, vagy kivehető anyaggal végzett hosszú távú fogszabályozó kezelés során alakulhat ki. Ezt a kórképet gyermekek és tizenévesek körében egyaránt leírták, és diagnosztikai módszereket és kezelést javasoltak . Itt egy kivehető fogszabályozó készüléket viseltek két éven át egy fogászati agenezis kompenzálására.
A klasszikus mikroszkópos eljárás során általában reprezentatív mintát vesznek a fertőzött helyről (exfoliatív citológia), amelyet mikroszkópos tárgylemezre visznek át és kálium-hidroxiddal (KOH), Gram-festéssel vagy periodikus savas-Schiff (PAS) festéssel kezelnek. A mintagyűjtést elvégeztük és laboratóriumba küldtük tenyésztésre, és az eredmény Candida albicansra pozitív volt.
Ezután összehasonlításként egyszerűsített, közvetlen mikroszkópos módszert adtunk meg. Ennél a módszernél a beteg nyálát a szájpadláson gyűjtöttük. Egy intraorális tükröt helyeztünk vízszintesen a nyelv alá, a nyálkahártyával érintkezve. Amikor a nyál befedte a tükröt, azt eltávolították a szájból, és a tárgylemezre helyezték (2. a) ábra). Ezt követően a mintát közvetlenül a páciens nyálába helyezett steril szondával gyűjtöttük (2. ábra (c)), és fedőlemezt szereltünk rá. Fontos megjegyezni, hogy a sulcus területe az optimális hely a minta gyűjtésére ezzel a módszerrel (2. ábra (b)). A gyakorló orvosnak az ujjával rá kell nyomnia a tárgylemezre, hogy szétterítse a mintát. A mintát ezután fáziskontrasztos optikai mikroszkóp alatt elemeztük (2. ábra (d)). A legérdekesebb nagyítás az ×1000-es, mivel ez lehetővé teszi a nem patogén élesztőformák megkülönböztetését az opportunista hifaformáktól. Kóros körülmények között minden egyes képernyőn több hifa látható, orális baktériumokkal és sejtekkel keveredve (3. ábra). Fontos, hogy ez a módszer értékes a kezelés hatékonyságának meghatározásához. A kezelés 3 hetes helyi kezelésből állt gombaölő szerrel (amphotericin B), valamint a protézises készülék fixre történő módosításából. A tenyésztéssel végzett egyéb laboratóriumi vizsgálat negatív volt. A kétéves nyomon követés során ugyanez az eljárás a szájflóra normalizálódását mutatta, a hifák hiányával (4. ábra (b)), ami klinikai javulással járt együtt (4. ábra (a)).
(a)
(b)
(c)
(d)
.
(a)
(b)
(c)
(d)
3. Következtetés
A közvetlen mikroszkópiát széles körben használják a laboratóriumokban a candidiasis diagnózisára. Pontos diagnózist tesz lehetővé egy nem invazív és fájdalommentes mintavételi módszerrel, amely különösen jól alkalmazható fiatal betegeknél. A klasszikus eljárás, amely a mintavételt és a laboratóriumba való szállítást foglalja magában, több időt és költséget igényel. Ráadásul az itt bemutatott módszer nem igényel rögzítést vagy mintakezelést. Ezért költséghatékony módja a beteg szájüregi mikrobiótájának vizsgálatára és az esetleges egyensúlyhiány megállapítására. Bár a közvetlen mikroszkópia nem olyan specifikus, mint a tenyésztés, úgy tűnik, hogy első vonalbeli diagnosztikai eljárásként választandó eljárás. Természetesen továbbra is feltétlenül szükséges a teljes klinikai vizsgálat, valamint a kiterjedt kórtörténet az esetleges társuló általános betegségek tanulmányozásához. Ráadásul ez a megközelítés tapasztalatot igényel az élesztőgombák mikroszkópos megfigyeléssel történő kimutatásában, ami a klinikusoknál nem egy transzverzális kompetencia. Az azonosítás azonban nem túl nehéz, és egy egyszerű, rövid idejű képződés elegendő lehet. Ily módon egyre több gyakorló orvosnak lesz hozzáférése ehhez a módszerhez; ezért ennek az egyszerű mikroszkópos elemzésnek a további ismerete lehetővé teszi a klinikusok számára, hogy azonnali diagnózist állítsanak fel a szék mellett. Továbbá, ahogyan az intraorális kamerák esetében is történt, a mikroszkópos eszközök fejlődését tekintve, a személyközpontú ellátás koncepciójába integrálhatók az oktatás és a megelőzés elemeként a diagnózisok megértése és a megalapozott kezelési döntések meghozatala érdekében . Az okostelefon-alapú mikroszkópok lehetséges fejlesztése könnyebb hozzáférést biztosít a klinikusok számára a mikroszkópiához. Az okostelefon-alapú mikroszkópokat már használják paraziták kimutatására vagy élősejtes képek készítésére . Ez egy ígéretes megközelítés a pontos szék melletti diagnózis elvégzéséhez a jövőben.
Etikai jóváhagyás
Az emberi résztvevőket érintő vizsgálatban végzett valamennyi eljárás összhangban volt a Toulouse-i Egyetem etikai normáival és az 1964-es Helsinki Nyilatkozattal és annak módosításaival.
Egyetértés
A betegektől és szüleiktől tájékozott beleegyezést kaptak. Minden szerző beleegyezését adta a publikáláshoz.
Érdekütközés
A szerzők kijelentik, hogy nem állnak összeférhetetlenségben.