Biologia I Manuale di Laboratorio

Cosa dovresti essere in grado di spiegare a qualcun altro dopo questo laboratorio:

• Composto
• Ingrandimento totale
• Binoculare
• Campo visivo
• Profondità di fuoco
• Fenomeno di inversione

Slideshow

Sfondo

Molti organismi (batteri) e parti di organismi (cellule) che i biologi studiano sono troppo piccoli per essere visti con l’occhio umano. Noi usiamo i microscopi per ingrandire gli esemplari per le nostre indagini. La parola microscopio significa “vedere piccolo” e il primo microscopio primitivo fu creato nel 1595.

Ci sono diversi tipi di microscopi, ma tu userai principalmente un microscopio ottico composto. Questo tipo di microscopio utilizza la luce visibile focalizzata attraverso due lenti, l’oculare e l’obiettivo, per visualizzare un piccolo campione. Solo le cellule che sono abbastanza sottili da far passare la luce saranno visibili con un microscopio ottico in un’immagine bidimensionale.

Un altro microscopio che userai in laboratorio è un microscopio stereoscopico o di dissezione. Questo tipo di microscopio utilizza la luce visibile per visualizzare campioni più spessi e più grandi, come un insetto, in 3D. Poiché si stanno visualizzando campioni più grandi, la gamma di ingrandimento del microscopio a dissezione è inferiore al microscopio a luce composta.

Il tuo istruttore esaminerà le parti e le funzioni dei microscopi a luce composta che useremo durante il semestre. Compila la tabella nella pagina seguente per aiutarti a ricordare queste importanti informazioni. Probabilmente farai riferimento a questa pagina frequentemente. Ecco un’immagine di un microscopio ottico per etichettare e prendere appunti.

Parte del microscopio	Funzione
Occhiali (oculari)
Braccio
Pozzetto girevole
Stadio
Obiettivi
Morsetti di scorrimento
Manopola di controllo stadio
Condensatore
Diaframma dell’iride
Lampada secondaria (Illuminatore)
Regolazione grossolana
Regolazione fine regolazione
Base

Regole e istruzioni per l’uso dei microscopi ottici composti

Il vostro istruttore discuterà l’uso del microscopio con la vostra classe. Verranno rivisti i passi corretti da seguire per una corretta messa a fuoco. Dovete seguire la sequenza passo dopo passo come indicato dal vostro istruttore. Anche se avete familiarità con questo tipo di microscopio, ci si aspetta comunque che passiate attraverso la revisione della messa a fuoco con il resto della classe.

1. Importanti regole generali:
   1. Porta sempre il microscopio con due mani – metti una mano sul braccio del microscopio e l’altra mano sotto la base del microscopio.
   2. Non toccare le lenti dell’obiettivo (cioè le punte degli obiettivi).
   3. Mantieni gli obiettivi in posizione di scansione e tieni il palcoscenico basso quando aggiungi o rimuovi vetrini.
   4. Guarda sempre il microscopio dal lato quando stai facendo grandi cambiamenti nell’altezza del palcoscenico.
   5. Le lenti degli obiettivi devono essere pulite solo con carta speciale per lenti e liquido per la pulizia delle lenti.
   6. Non giocare a fare il tuttofare – nessun microscopio deve essere smontato. Segnala i malfunzionamenti al tuo istruttore.
2. Per ottenere un microscopio dall’armadio del laboratorio:
   1. Prima libera un’area sul tavolo per il microscopio – evita un’area di lavoro affollata.
   2. I microscopi sono numerati in base a dove sei seduto. Trova il numero sotto il tuo banco e usa il microscopio corrispondente.
   3. Porta il microscopio con DUE mani.
   4. Fissa il cavo elettrico-non lasciarlo pendere dal tavolo!
3. Quando riporti il microscopio nell’armadietto del laboratorio:
   1. Abbassa il palco.
   2. Ruotare l’obiettivo di scansione in posizione sopra il tavolino.
   3. Rimuovere il vetrino dal tavolino.
   4. Pulire il vetrino e l’obiettivo usando il liquido speciale per la pulizia delle lenti e la carta in dotazione.
   5. Centrare il tavolino in modo che non sporga troppo su entrambi i lati.
   6. Fissare il cavo avvolgendolo sotto il tavolino del microscopio.
   7. Riposizionare il coperchio antipolvere.
   8. Portare il microscopio con DUE mani.
   9. Ritornare il microscopio nello stesso alloggiamento da cui l’avete ottenuto assicurandosi di metterlo in braccio.
4. Per mettere a fuoco il microscopio:
   Guardare il microscopio da un lato:
   1. Arretrare il palco fino a dove può arrivare.
      1. Ruotare gli obiettivi in modo che l’obiettivo di scansione sia rivolto verso il basso sul palcoscenico.
      2. Regolare il palcoscenico in modo che l’apertura (l’apertura al centro del palcoscenico) sia centrata.
      3. Posizionare il vetrino sul palcoscenico, utilizzando il morsetto del palcoscenico per fissarlo. Il morsetto si muove solo all’interno del piano orizzontale del palcoscenico, e fissa il vetrino toccando appena l’angolo in basso a destra del vetrino.
      4. Centra il campione sul tuo vetrino sotto l’obiettivo spostando il palcoscenico.
      5. Sposta il palcoscenico quasi fino a dove può andare, facendo attenzione a non lasciare che il vetrino tocchi l’obiettivo – guarda dal lato in modo che tu possa vedere quanto in alto alzare il palcoscenico.
   2. Guardare attraverso gli oculari:
      1. Utilizzare la manopola di regolazione grossolana per muovere il palcoscenico verso il basso fino a quando il campione viene messo a fuoco, quindi mettere a fuoco.
      2. Centrare il campione nel campo del microscopio muovendo il palcoscenico.
   3. Guardare il microscopio dal lato:
      1. Ruotare lentamente l’obiettivo a bassa potenza (10X) in posizione.
   4. Guardare attraverso gli oculari:
      1. Affilare il fuoco, se necessario, con la manopola di regolazione grossolana. Solitamente è necessaria solo una minima quantità di regolazione.
      2. Centrare il campione nel campo, se necessario.
   5. Guardare il microscopio dal lato:
      1. Ruotare l’obiettivo ad alta potenza in posizione con molta attenzione!
   6. Guardare attraverso gli oculari:
      1. Utilizzando solo la manopola di regolazione fine, mettere a fuoco. Ricentrare se necessario. (Se il campione è “scomparso”, tornare immediatamente alla bassa potenza e ricentrare il campione.)
      2. Quando si rimuove un vetrino, riportare sempre gli obiettivi in posizione di scansione e abbassare il palcoscenico prima di sollevare il vetrino!

Parte 1: Ingrandimento totale

L’ingrandimento è il rapporto tra le dimensioni dell’immagine al microscopio e le dimensioni reali dell’oggetto. Quando si dice che l’ingrandimento è 10, l’immagine che si vede usando il microscopio è dieci volte più grande che guardando il campione ad occhio nudo. Ricorda che con un microscopio a luce composta stai ingrandendo con due lenti, quindi per calcolare l’ingrandimento totale, moltiplichi l’ingrandimento obiettivo per l’ingrandimento oculare. Guarda il microscopio e usa la tabella qui sotto per calcolare l’ingrandimento totale per ogni lente:

	Lente obiettiva	Lente oculare	= Ingrandimento totale
Obiettivo di scansione
Obiettivo basso
Obiettivo alto

Parte 2: Fenomeno dell’inversione

Ottieni una diapositiva della lettera “e” disponibile in classe. Guarda il vetrino con i tuoi occhi e poi mettilo sul microscopio. Usa la sequenza di messa a fuoco per vedere il vetrino a bassa potenza.

Procedura

1. Disegna la lettera “e” come appare quando guardi il vetrino senza il microscopio.
2. Disegna la lettera “e” come appare quando guardi il vetrino al microscopio.
3. Sposta il tuo vetrino a destra usando la leva meccanica del tavolino mentre guardi attraverso gli oculari. Da che parte si muove la “e”?
4. Spostare il vetrino lontano da voi usando la leva del tavolino meccanico mentre guardate attraverso gli oculari. Da che parte si muove la “e”?

Dichiarate il fenomeno dell’inversione con parole vostre.

Parte 3: Campo visivo

Il campo visivo è la quantità di campione che si vede quando si guarda attraverso gli obiettivi. Il campo visivo diminuisce ad alti ingrandimenti.

Procedura

Posizionare un righello di plastica blu attraverso l’apertura del palco in modo che il bordo del righello sia visibile come una linea verticale lungo il diametro del campo. Stimare la dimensione del campo in millimetri per ogni obiettivo.

Scan __________ Low (10X) __________ High (40X) __________

Parte 4: Profondità di fuoco

La profondità di fuoco è lo spessore del campione che rimane a fuoco ad un dato ingrandimento. La profondità di fuoco diminuisce ad ingrandimenti più alti.

Procedura

Prendete un vetrino di fili colorati e guardatelo sotto scansione o a bassa potenza. Poi, determinare quale filo di colore è:

• In alto
• In mezzo
• In basso

Suggerimento: usando le istruzioni per la messa a fuoco, mettere a fuoco la zona dove i tre fili si incrociano. Usa la messa a fuoco fine per discernere l’ordine dei fili.

Parte 5: Fare un montaggio bagnato

Durante il semestre, ci si aspetta che tu faccia con successo una serie di semplici preparazioni di vetrini chiamati “montaggi bagnati”. L’esemplare da osservare è posto su un vetrino pulito, una goccia o due di acqua aggiunta, e un vetrino coprioggetto posto con cura sopra l’acqua e l’esemplare. Il tuo istruttore ti dimostrerà questa tecnica.

Fai un montaggio bagnato di acqua di stagno seguendo la procedura seguente:

1. Posiziona una goccia di acqua di stagno su un vetrino pulito usando la pipetta di plastica monouso.
2. Copri l’acqua di stagno sul vetrino con un vetrino coprioggetto. Prova a mettere il coprioggetto in un angolo per evitare le bolle d’aria.
3. Pulisci qualsiasi liquido in eccesso sul vetrino.
4. Posiziona il vetrino sul microscopio per osservare il campione.
   1. Iniziare con l’obiettivo di scansione
   2. Passare delicatamente agli obiettivi basso e alto come necessario.

Spero che vedrete alcuni organismi vivi nell’acqua dello stagno. Se vedete del materiale verde, probabilmente si tratta di qualche tipo di pianta. Guarda se c’è qualcosa che si muove. Nello spazio sottostante, descrivi ciò che stai osservando al microscopio e disegna una semplice immagine.

Parte 6: Microscopio da dissezione stereoscopico

Il tuo istruttore ti dimostrerà l’uso corretto del cannocchiale da dissezione. Questi microscopi generalmente danno un ingrandimento inferiore rispetto al microscopio composto che stai usando.

Procedura

Guarda i campioni disponibili sul tavolo del laboratorio usando il microscopio da dissezione. Nota che il microscopio ha due fonti di luce, una dalla base e una dall’alto. Gli esemplari non sono sempre montati su un vetrino. Nota anche che quando vedi gli oggetti sotto il microscopio a dissezione essi sono tridimensionali.

Pulizia e cura del microscopio

1. Descrivi come e con cosa devi pulire la lente del microscopio.
2. Elenco quattro cose che devi fare quando hai finito di usare il microscopio alla fine del laboratorio.