Abstract
La candidosi orale è causata da funghi del genere Candida e una delle più comuni infezioni fungine opportunistiche del cavo orale umano. Data la variabilità clinica di questa malattia, le tecniche microbiologiche sono spesso necessarie per la conferma clinica, così come per stabilire una diagnosi differenziale con altre malattie. Lo scopo di questa breve relazione tecnica è di illustrare un semplice metodo alla poltrona, che può fornire una diagnosi microscopica immediata di questa malattia. Presentiamo il caso di un ragazzo di 14 anni affetto da una stomatite eritematosa legata alla dentiera, diagnosticata e seguita con una tecnica semplificata di microscopia diretta. Essa permette una diagnosi accurata con un metodo di prelievo non invasivo e indolore, collegato ai risultati di laboratorio.
1. Introduzione
La candidosi orale è causata da funghi del genere Candida ed è una delle più comuni infezioni fungine opportunistiche del cavo orale umano. Centocinquanta specie di questo genere sono state isolate nel cavo orale, l’80% delle quali corrisponde a Candida albicans . Un’infezione da candidosi orale può essere acuta o cronica, e classificata come pseudomembranosa o eritematosa. La candidosi orale rappresenta una delle malattie delle mucose più frequenti, poiché si possono trovare tutti i tipi di infezione. Una maggiore incidenza dell’infezione può essere legata a vari fattori predisponenti, come una terapia antibiotica prolungata, malnutrizione, disturbi endocrini, infezione da HIV, xerostomia, fumo, scarsa igiene orale e l’uso di protesi dentarie. In genere, la diagnosi di candidosi orale si basa sui sintomi clinici e di solito è semplice nei casi di candidosi pseudomembranosa acuta, soprattutto nei bambini. Tuttavia, data la variabilità clinica di questa malattia, le tecniche microbiologiche sono spesso necessarie per la conferma clinica, oltre a stabilire una diagnosi differenziale con altre malattie. Inoltre, i casi caratterizzati da resistenza ai farmaci antimicotici, in particolare nei pazienti cronici, possono beneficiare di un ulteriore test microbiologico. Diversi metodi sono attualmente utilizzati per isolare e identificare le specie di Candida, tra cui la microscopia diretta di strisci, macchie, colture e metodi genetici (PCR) . Anche nuovi metodi di identificazione sono testati per fornire un rilevamento rapido e accurato. Una recente revisione della letteratura ha dimostrato i vantaggi della microscopia diretta nella diagnosi della candidosi orale nei bambini e negli adolescenti. Lo scopo di questa breve relazione tecnica è quello di illustrare un semplice metodo chair-side che può fornire una diagnosi microscopica immediata di questa malattia.
2. Case Report
Per illustrare questo metodo, presentiamo il caso di un ragazzo di 14 anni affetto da una stomatite eritematosa legata alla dentiera (Figura 1). La stomatite legata alla dentiera è definita come un processo infiammatorio della mucosa orale sottostante una protesi dentaria rimovibile. Nei giovani pazienti, una stomatite legata alla protesi può essere dovuta a una complicazione di una protesi pediatrica o può verificarsi durante un trattamento ortodontico a lungo termine con un materiale rimovibile. Questa patologia è stata descritta sia nei bambini che negli adolescenti, e sono stati proposti metodi di diagnosi e trattamento. Qui, un apparecchio ortodontico rimovibile è stato indossato per due anni per compensare un’agenesia dentale.
Una procedura microscopica classica comporta tipicamente la rimozione di un campione rappresentativo dal sito infetto (citologia esfoliativa) che viene trasferito su un vetrino microscopico e trattato con idrossido di potassio (KOH), colorazione Gram, o colorazione periodica acido-Schiff (PAS). Un campione è stato raccolto e inviato al laboratorio per la coltivazione e il risultato è stato positivo per Candida albicans.
Allora abbiamo fornito un metodo semplificato di microscopia diretta come confronto. In questo metodo, la saliva del paziente è stata raccolta sul pavimento della bocca. Uno specchio intraorale è stato posto orizzontalmente sotto la lingua, a contatto con la mucosa. Quando la saliva copre lo specchio, viene rimossa dalla bocca e posata sul vetrino (Figura 2(a)). Il campione è stato successivamente raccolto con una sonda sterile posta direttamente nella saliva del paziente (Figura 2(c)), ed è stato montato un vetrino coprioggetto. Un punto importante da notare è che l’area del solco è il sito ottimale per raccogliere il campione con questo metodo (Figura 2(b)). Il professionista dovrebbe premere con il dito sul vetrino per spargere il campione. Il campione è stato poi analizzato al microscopio ottico a contrasto di fase (Figura 2(d)). L’ingrandimento più interessante è ×1000 in quanto permette di differenziare le forme di lievito non patogene dalle forme ifali opportunistiche. In condizioni patologiche, diverse ife sono visibili su ogni schermo, mescolate a batteri e cellule orali (Figura 3). È importante che questo metodo sia prezioso per determinare l’efficacia del trattamento. Il trattamento consisteva in 3 settimane di trattamento locale con un agente antimicotico (amfotericina B), e la modifica dell’apparecchio protesico per uno fisso. Un’altra analisi di laboratorio per coltivazione era negativa. Al follow-up di due anni, la stessa procedura ha mostrato una normalizzazione della flora orale, con assenza di ife (Figura 4(b)), legata ad un miglioramento clinico (Figura 4(a)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
3. Conclusione
La microscopia diretta è ampiamente utilizzata nei laboratori per diagnosticare la candidosi. Permette una diagnosi accurata con un metodo di prelievo non invasivo e indolore, particolarmente adatto ai pazienti giovani. Una procedura classica, che comporta la raccolta del campione e la spedizione ad un laboratorio, richiede più tempo e spese. Inoltre, il metodo qui presentato non richiede alcuna fissazione o trattamento del campione. Pertanto, è un modo economico per esaminare il microbiota orale di un paziente e determinare qualsiasi potenziale squilibrio. Anche se la microscopia diretta non è così specifica come la coltura, sembra essere una procedura di scelta per una diagnosi di prima linea. Naturalmente, un esame clinico completo rimane assolutamente necessario, così come un’ampia storia medica, al fine di studiare qualsiasi malattia generale associata. Inoltre, questo approccio richiede esperienza nell’individuazione del lievito attraverso l’osservazione microscopica, che non è una competenza trasversale nei clinici. Tuttavia l’identificazione non è molto difficile, e una semplice formazione di breve durata può essere sufficiente. In questo modo, un maggior numero di professionisti avrà sempre più accesso a questo metodo; quindi, una maggiore consapevolezza di questa semplice analisi microscopica permetterà ai clinici di fare una diagnosi immediata alla poltrona. Inoltre, come nel caso delle telecamere intraorali, visti i progressi dei dispositivi microscopici, essi possono essere integrati nel concetto di cura centrata sulla persona come elemento di educazione e prevenzione per comprendere le diagnosi e prendere decisioni di trattamento informate. Il potenziale sviluppo di microscopi basati su smartphone fornirà ai medici un accesso più facile alla microscopia. I microscopi basati su smartphone sono già in uso per rilevare i parassiti o ottenere immagini di cellule vive. Questo è un approccio promettente per eseguire in futuro una diagnosi accurata alla poltrona.
Approvazione etica
Tutte le procedure eseguite nello studio che ha coinvolto partecipanti umani sono state conformi alle norme etiche dell’Università di Tolosa e alla dichiarazione di Helsinki del 1964 e ai suoi emendamenti.
Consenso
Il consenso informato è stato ottenuto da tutti i pazienti e dai loro genitori. Tutti gli autori hanno dato il loro consenso alla pubblicazione.
Conflitti di interesse
Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.