7.2.1.5 Wad Medani Virus
Storia. Il virus Wad Medani (WMV) è stato originariamente isolato da R.M. Taylor e colleghi da zecche Rhipicephalus sanguineus (famiglia Ixodidae, sottofamiglia Rhipicephalinae), raccolte da pecore vicino al villaggio Wad Medani (Sudan, Africa) nel novembre 1952. Sulla base delle sue proprietà sierologiche, il WMV fu assegnato al gruppo antigenico di Kemerovo (famiglia Reoviridae, genere Orbivirus).1,2 Successivamente, più di 20 ceppi di WMV furono isolati da altre specie di zecche: Hyalomma asiaticum (Asia centrale); H. anatolicum (Iran, Pakistan); H. marginatum (India); Amblyomma cajennense (Giamaica); Rh. Microplus, ex Boophilus microplus) (Malesia); e Rh. guilhoni e Rh. evertsi (famiglia Ixodidae, sottofamiglia Rhipicephalinae) (entrambe le specie trovate in Sudan, Egitto, Senegal, India, Pakistan, Iran e Giamaica).1,3
Tassonomia. Il genoma degli orbivirus ha 10 segmenti di dsRNA, che codificano sette proteine strutturali (VP1-VP7) e quattro non strutturali (NS1-NS4).4 Gli scienziati hanno sequenziato il genoma del ceppo LEIV-8066Tur (GenBank ID, KJ425426-35), isolato da zecche H. asiaticum nel distretto di Baharly, Turkmenistan. La proteina più conservativa degli orbivirus è un RdRp (Pol, VP1). Un confronto delle sequenze di amminoacidi VP1 a lunghezza intera del WMV con quelle di altri orbivirus trasmessi dalle zecche ha rivelato un’identità del 54%. Un’analisi filogenetica basata sul confronto delle sequenze di aminoacidi VP1 (Pol), VP3 (T2) e VP7 (T13) degli orbivirus è presentata nella Figura 7.1. I principali determinanti antigenici degli orbivirus sono localizzati su tre proteine degli strati esterni e interni del capside. Le più divergenti sono le proteine VP2 e VP5. La proteina VP2 forma lo strato esterno del capside e porta i principali siti di neutralizzazione e di legame ai recettori. Inoltre, la proteina VP2 è uno dei fattori di virulenza degli orbivirus. La somiglianza delle sequenze di aminoacidi VP2 del WMV con quelle di altri arbovirus trasmessi dalle zecche è del 26-30%. La somiglianza della proteina VP5 del WMV con quella di altri orbivirus trasmessi dalle zecche è del 45%, in media. Tra le proteine strutturali, la più conservativa è la VP3 (T2), che forma lo strato interno del capside. La proteina VP7 (T13) è coinvolta nell’interazione virus-cellula e, come la proteina VP2, è uno dei fattori di virulenza, definendo, in particolare, l’infettività del virione. In un virione intatto, gli epitopi antigenici VP7 (T13) sono nascosti e quindi non possono essere bloccati da anticorpi neutralizzanti. VP7 (T13) ha determinanti antigenici specifici per il gruppo e la specie. La somiglianza delle sequenze aminoacidiche VP7 (T13) del WMV con quelle degli orbivirus trasmessi dalle zanzare è del 46%, e con quelle dei virus trasmessi dalle zecche è del 67%.
Il segmento genomico 9 degli orbivirus codifica l’enzima virale VP6 (Hel), che possiede un’attività di legame all’RNA ed elicasi. La somiglianza del VP6 (Hel) del WMV con quello di altri orbivirus trasmessi dalle zecche è nell’intervallo 36-38%. È stato dimostrato che il segmento 9 di GIV, BAKV e BTV ha una ORF aggiuntiva che codifica una proteina denominata VP6a o NS4 con una funzione sconosciuta. Come altri orbivirus trasmessi dalle zecche, anche WMV codifica l’ORF VP6a. Si noti che, sebbene le sequenze di aminoacidi VP6a di GIV, BAKV e WMV abbiano un basso livello di somiglianza (20-30%), sono della stessa dimensione (195 aa) e hanno due codoni di inizio chiusi. La lunghezza dell’ORF VP6a negli arbovirus trasmessi dalle zecche è quasi due volte più grande di quella del BTV.5 L’analisi filogenetica mostrata nella Figura 7.1, un’analisi basata sul confronto delle proteine strutturali e non strutturali degli orbivirus, rivela che la topologia del WMV sull’albero conferma la classificazione del virus nel gruppo antigenico B del genere Orbivirus.
Epizootiologia. Anticorpi contro il WMV sono stati trovati in cammelli e bufali.1 Due ceppi del virus Seletar, che è strettamente correlato al WMV, sono stati isolati da A. Rudnik da zecche B. microplus, raccolte nell’area Seletar di Singapore nel gennaio 1961. Poiché B. microplus è una zecca mono-ospite, che trascorre tutta la sua vita su un singolo ospite, la trasmissione transovariale sembrerebbe essere necessaria per la conservazione della popolazione virale.5,6 Quattordici ceppi di WMV sono stati isolati durante il monitoraggio virologico di diversi ecosistemi nell’Eurasia settentrionale: 10 ceppi in Turkmenistan,7-11 2 in Kazakistan,12-16 1 in Tagikistan, e 1 in Armenia.17-19
In Turkmenistan, tutti i ceppi di WMV sono stati isolati da zecche H. asiaticum, raccolte da pecore e cammelli nel distretto Ýolöten della provincia di Mary (in paesaggi semiaridi) o nel distretto Baharly della provincia di Ahal (in paesaggi aridi) nel 1972, 1973, e 1981.7-10 In Kazakistan, due ceppi sono stati isolati da H. asiaticum in paesaggi aridi del distretto di Balkhash (provincia di Almaty) nel 1977. La percentuale di ixodidi infetti è stata stimata allo 0,094%.12-16 In Tagikistan, un ceppo di WMV è stato isolato da zecche H. anatolicum. Queste zecche costituivano il 76,5% di tutti gli ixodidi di questo territorio, e la percentuale di zecche H. anatolicum infette raggiungeva lo 0,002%.17,19 Nel clima arido della parte meridionale del Tagikistan, una o due generazioni di zecche ixodidi possono svilupparsi durante l’anno. Il WMV è stato isolato da imago affamate e svernate che hanno esibito una trasmissione transstadiale del virus.13,17 L’infezione sperimentale dei vitelli ha dimostrato che il livello di viremia del WMV è sufficiente per infettare le larve di H. anatolicum, che successivamente trasferiscono il virus agli imago che forniscono attività e stabilità ai focolai naturali del WMV.20 L’immunità al WMV tra la popolazione umana nel Tajikistan meridionale raggiunge il 7,8-10,3%, mentre nelle province settentrionali non supera il 2,1%.20,21 In Transcaucasia, il WNV è stato isolato da zecche H. asiaticum raccolte vicino a Nakhichevan, Azerbaijan, nel 1985.18 I risultati ottenuti dall’isolamento del WMV in Kazakistan, Asia centrale e Transcaucasia indicano che le zecche H. asiaticum e H. anatolicum svolgono il ruolo principale nel mantenimento dei focolai naturali del virus nelle biocenosi dei pascoli e nei paesaggi aridi e semiaridi.
Epidemiologia. Non ci sono indicazioni che il WMV sia patogeno per l’uomo.