Discussion
科学または保険目的だけの肺組織の切除は認められず、倫理的に正当化されない．
本研究は、過去にアスベストに暴露された患者の肺組織を数年の間隔で、標準化された分析手順によって得られた個人内縦断アスベスト繊維分析のデータを発表した最初の研究である（図2）。 その結果、アスベストはヒトの肺に存在し続けること、クリソタイルも何年経っても確認できること、曝露停止後も肺組織中のアスベスト繊維濃度が経時的に有意に減少することはないことがわかった。 先行研究では、職場における空気中のアスベスト濃度の測定からベースライン暴露濃度を推定した動物実験や仮説モデルを用いて、肺組織におけるアスベストの生体内残留性を定義し、これらのデータは剖検結果と関連付けられていた。 他の著者は、異なる期間の繊維数を比較した。 私たちのサンプルは、同じ研究室で同じ方法で位相差顕微鏡により定量的に分析されています。 この研究室は1987年からこの方法を経験している。
肺組織中の個々のアスベスト濃度は、2回の組織切除の間に4年から21年の間隔があっても安定したままであった。 他の著者は、25年間の調査で肺組織中のアスベスト繊維の負荷が減少したと報告したが、1972年に米国で断熱製品のアスベストが禁止されたため、曝露量の減少で簡単に説明することができるようになった。 他の著者とは対照的に、この論文で報告された解析は、同じ患者に関するものであった。 したがって、過去のアスベスト曝露は両分析とも同じであるが、それぞれのケースでかなり以前に起こったものである（図2）。 6660>
人間の肺の中のアスベスト濃度を7～10倍と仮定すると、我々の患者の90％のアスベスト繊維濃度は、間違いなく4～21年前に分析されたサンプルの範囲内となる（図3）。 これは、アスベストが存在する間に典型的に発症すると考えられているアスベスト関連疾患の潜伏期間が10～60年であるという以前の報告と非常によく結びついている。 これは、肺組織中のアスベスト体の分布が不均一であるため、1つの肺の複数の組織標本を評価する必要があることがよく知られているためと考えられる。 このような繊維分析に適した複数の組織サンプルは、剖検によってのみ収集される。 手術による組織はサイズが限られており、また腫瘍がある場合は腫瘍の側からの採取となる。 ガイドラインで推奨されているように、剖検組織から対側葉を入手することができる；また、一般的に繊維数が多い下側葉を入手することもできる。 ドイツAMWFのガイドラインに従い、表1では最も高い繊維数を結果としたが、図3ではすべての繊維数を考慮し、結果を相対化した。
位相差のある光顕微鏡検査では、0.2μmを超える厚さのアスベスト繊維しか検出されないため、組織の入手に制限がある中で、手術組織からアスベストが明確に確認された。 しかし、光学顕微鏡によるカウント結果は、調査対象の肺組織のアスベスト繊維負荷の全体的な指標となり、比較分析に十分に役立つと思われる。 このアプローチは、アスベスト濃度を組織学と直接関連させて解釈する機会を提供する。 さらに、ある肺葉から採取した試料が、より低濃度の他の肺葉からの試料によって希釈されないため、肺葉の局所的な蓄積も検出でき、適切に評価することができる。 アスベストに関連した肺の変化は、主に下葉に影響を及ぼすことが示されている。これは、異なるサンプルを別々に分析した場合にのみ、適切に反映される。 それらは、8-13年後に行われた剖検で確認されたアスベスト繊維負荷の上昇を示した。 BALは、たとえ非常に長い年月を経ても、以前のアスベスト暴露を立証するのに非常に有効である。 EDX分析による繊維の定性分析では、ほとんどの組織サンプル（66.7%）でクリソタイルが主な繊維であり、アスベスト曝露の停止は37年前にまで遡ることが示された。 この結果は、ドイツ人患者の肺から主にクリソタイルを検出した他の研究者の結果と一致している。 一方、英国のじん肺患者では、アンフィボールのみが検出されたが、クリソタイル濃度は対照群と比較して上昇を示さなかった。 北米で行われた研究でも、中皮腫の患者からはアンフィボールアスベストのみが検出された。 一方、カナダの鉱山労働者や製粉業者では、アスベスト関連疾患の増加が観察されているが、その暴露はクリソタイル繊維のみであった。 この繊維は、数年にわたり肺の組織で確認された。 このことは、アスベスト曝露の地域的な質的差異に起因しているのかもしれない。 また、クリソタイル繊維の由来や形状の違いにより、肺組織への滞留時間が異なる可能性もある。
組織調製や繊維分析の技術が異なることも、研究によって異なる所見の説明となるかもしれない。 肺の粉塵分析では、組織から抽出され、このプロセスの機能として失われないアスベストのみを検出することができる。 クリソタイルは、酸をかけると完全に溶解する。 また、超音波を無制限に使用すると繊維が破壊されたり、何段階もの遠心分離の過程で失われたりすることがあります。 電子顕微鏡による分析では、芯の繊維にアクセスするために繊維の本体の主要部分が破壊されます。 電子顕微鏡分析に必要な強力なビームは、アスベスト繊維を破壊し、重大な識別ミスを引き起こす可能性があります。 私たちの日常的な検査では、試料を処理する際の損失を可能な限り低く抑えることが重要であり、遠心分離は使用されません。 コアファイバーの分析には、SEM よりも解像度が高く、TEM よりもファイバーへのダメージが少ない FE-SEM を使用しました。 TEMは繊維分析のゴールドスタンダードと考えられているため、我々はFE-SEMデータを確認するために、利用可能なサンプルにこの方法も適用した。
この研究における繊維タイプの電子顕微鏡分析は、自動光学組織で行われた。 肺のアスベスト繊維負荷は、調査の全期間を通じて一定であった。 最初の組織/BALサンプリング時でさえ、患者はもはやアスベストに暴露されていなかった。 したがって、両極性石とクリソタイル繊維の比率に関連した変化はなく、クリソタイル濃度は4～21年の調査期間中安定したままであることが明らかである。 このことは、クリソタイル含有量と最終暴露からの時間間隔や暴露期間との間に相関関係が確認できなかった理由も説明しています。 我々の結果は、Churg と dePaoli が発表したデータと完全に一致している。彼らは、曝露停止までの時間間隔が短い患者と長い患者の 2 セットを比較して、クリソタイルとアンフィボール（この場合はトレモライト）の濃度比が時間と共に変化しないことを発見したのだ
調査対象の患者のアスベスト繊維濃度が安定していたことから、よく知られており科学的に認められているヒト肺組織内のクリソタイル繊維の減少が非常に早い時点で起こっていなければならなかったことが我々のデータからわかる。 最初の組織サンプリングの時点で、最後のアスベスト曝露は3-29年前に終了していた（中央値9.5年）。 つまり、クリソタイル繊維の減少は、この期間内に起こったに違いない。 この2つの研究は、「クリソタイルがヒトの肺に蓄積しないのは、長期的なクリアランス機構ではなく、曝露後早期に発生した事象を反映していることを示唆している」とし、ヒトの肺の自然防御機構、例えば気管支における粘膜繊毛クリアランスや排便、おそらくリソゾームによる酸加水分解によって最も良く説明されるとしている。 これは、Churgが発見したヒトの肺組織におけるクリソタイルの数週間から数ヶ月の半減期と一致するものである。 それとは別に、繊維の種類と形状も関係しているようだ。 ある種のクリソタイル繊維は、角閃石繊維と同様に、肺の防御機構をうまく克服して肺胞の奥深くまで入り込み、もはや排除することができないため、何年も人間の肺に痕跡が残る。
極端に生物学的に残留性が高いため、繊維は肺マクロファージによって生物学的に還元されることがない。 マクロファージは死んで、典型的なアスベスト小体を形成する。 繊維はそのピン状の構造により、肺実質の肺胞に引っかかりやすく、体内から除去することができない。 人間の肺には、肺胞から侵入した繊維を排除する防御機構がない。 したがって、アスベスト繊維は肺に残り、その持続的な存在によって肺の病気を引き起こす。 組織への継続的な刺激は、慢性的な炎症を引き起こし、組織は瘢痕形成によってそれに対応する。
クリソタイルアスベストの危険性については、現在議論中である。 この問題に対する答えは、医師、毒物学者、職業および環境リスク評価にとって大きなインパクトがある。 我々のユニークなデータは，個々のヒトの肺に対して，アスベスト繊維（古代ギリシャ語のἄσβεστος=imperishable ）のよく知られた特性を，長年にわたって生体内で実験的に確認するものであった。 本研究は、アンフィボールだけでなくクリソタイルアスベストのヒト肺における高い生体内残留性を明確に示し、繊維の毒性およびアスベスト関連疾患の長い潜伏期間に対するメカニズム的な説明を与えるものである
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