Introduction
パラフィン包埋組織ブロックとは、通常、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織標本で、何十年も前から様々な治療用途や研究において使用されてきたものを指します。 実験的研究、検査、診断、治療法の開発に使用する生物試料の保存と準備に使用される方法である。 組織試料は、まずホルマリンやホルムアルデヒドを用いた固定化によって保存され、組織内の重要な構造やタンパク質が、まだ宿主の一部であった時の状態にできるだけ近く保たれるようにする。 固定後、パラフィンワックスに包埋し、顕微鏡用スライドへの切片作成とマウントを容易にします
プロセス
組織はまず、病気と正常の両方の宿主から採取されます。 このような場合、がん研究者は、原発巣と遠隔転移巣から採取したサンプルを比較することが多い。 採取された組織は、その性質や採取源、組織にもよるが、通常数センチメートルしかない。 このような場合、生体試料は切除後すぐに10％中性緩衝ホルマリンに18～24時間浸漬し、組織を硬化させる。 その後、濃縮エタノールを用いて脱水・清澄化する。 その後、ホルマリン固定組織の包埋に使用される免疫組織化学グレードのパラフィンに包埋される。 固定が早すぎると分子生物学的研究に使えなくなる可能性があるため、最も重要な要素のひとつが固定期間である。 固定期間は、保存を確実にするために十分な長さでなければならない。
一旦取得したサンプルは、品質を維持するために慎重に取り扱われる。 適切な取り扱いを怠ると、研究結果や推論に影響を与えるような異常な特性を示すことがある。 調製方法は通常、研究チームの要求によって決まる。 組織の目的、大きさ、組織のカットに関する指定など、様々なものがあります。 良い例としては、筋肉を筋繊維の「目」に沿って切るか、筋繊維を横断して切るかが挙げられます。 サンプルの準備を通して、認定された医療病理学者が、手順が正確に完了したことを確認し、また品質評価のために関与します。
サンプルが完了すると、組織は組織バンクに保管されます。 人口統計学的情報や、組織がいつ採取されたか、保存されたかといった記録も、研究チームにとって有用であるため、保管しておく必要がある。 このほか、署名入りの同意書や生物試料に関連する法的文書など、研究や臨床試験における生物試料の有用性に影響する重要な情報も保管される。
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Immunology – 免疫系の反応は、病気の状態と健康な状態の両方において分析されます。 自己免疫疾患を持つ患者の組織サンプルを研究することで、その原因を特定し、影響を受けた人々のための治療法を開発することができます。
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血液学 – パラフィン包埋組織ブロックは、さまざまな血液および関連疾患の研究において不可欠なものです。 また、「痒いところに手が届く」ような感覚を味わうことができます。 この分野に関連する研究には、遺伝学、毒物学、組織再生などを含む骨髄研究があります。
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腫瘍学 – パラフィン包埋組織ブロックは腫瘍学において重要で、保存された腫瘍組織は、他の組織にはない独特の形態を持っているからです。 研究チームはしばしば、病気の診断と評価に役立つタンパク質を探すために、これらのサンプルを使用します。 ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）腫瘍組織は、一般的に腫瘍含有率が60%でなければなりません。
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比較 – 健康なドナーから採取した健康な組織であるパラフィン包埋組織ブロックも存在します。 これらの組織は比較の目的で使用され、研究開発にも重要です。
デメリット
パラフィン包埋組織ブロックでは、固定処理に通常ホルマリンまたはホルムアルデヒドを使用し、組織サンプル内のタンパク質を変性させることが必要です。 このため、タンパク質を検出するために特別に開発された抗体では、タンパク質が見えなくなってしまうことがあります。 そこで、組織ブロックからタンパク質、DNA、RNAを特異的に回収する抗原賦活技術が開発されました。 これにより、生化学や分子生物学の研究に必要な、保存され注釈がつけられた膨大な資料のアーカイブを開くことができるようになったのです。
結論
パラフィン包埋組織ブロックの品質は、タンパク質、DNA、RNAの供給源としてこれらのサンプルを使用する作業にとって極めて重要です。 これは保存状態の良い組織でも、部分的に分解された不活性なタンパク質、DNA、RNAが含まれるためです。