ABSTRACT
外耳炎を持たない猫の外耳道におけるマラセチア属の発生を調査し，Malassezia furfurが分離された． Malassezia属は，ヒトの皮膚や多くの哺乳類，鳥類の微生物叢の構成要素として知られている親油性酵母からなり，環境からの分離はほとんどない（11）． これらの酵母は、脂質を炭素源とする典型的な生理的性質を持っている。 Malassezia pachydermatisを除くMalassezia属の残りの種は、in vitroでの増殖に長鎖（C12〜C24）脂肪酸を補充する必要がある。 これらの酵母の分類は、常に論争の的となっている(8)。 数年前までは、M. furfur (Robin) Baillon 1889とM. pachydermatis (Weidman) Dodge 1935の2種が受け入れられていた。 最近、分子データと脂質の要求に基づいて属が改訂され、7種に拡大された。 M. furfur, M. pachydermatis, M. sympodialis, M. globosa, M. obtusa, M. restricta, M. slooffiae (4).
M. furfurはヒトの日和見皮膚病原体として知られている。 癜風、頭皮炎、脂漏性皮膚炎、毛包炎の原因菌である。 しかしながら、免疫不全患者や脂質静脈内投与中の新生児において全身感染症を引き起こすことが報告されており（1、12）、マラセチア属菌の重要性は新興病原菌として高まってきている。 本調査の目的は，外耳炎を発症していない猫の外耳道の親油性微生物叢を調査することであった． 本稿では，猫から初めて分離されたM. furfurについて報告する。
外耳炎のない家猫33頭（雄17頭，雌16頭）の外耳道をスワブを用いてサンプリングした． サンプルはSabouraud glucose agar（SGA；Biolife s.r.l., Milan, Italy），オリーブオイル添加SGA（10 ml/リットル），Leemingの培地（ペプトン10 g，グルコース5 g，酵母エキス0.1 g，乾燥牛胆汁4 g，グリセロール1 ml，グリセロールモノステアレート 0.5 g，Tween 60 0.5 ml，全脂牛乳10 ml，寒天12 g/リットル，pH 6.2）（9) で培養した． すべての培地には0.05%クロラムフェニコールと0.05%シクロヘキシミドが含まれていた。 各耳垢は熱固定し、Diff-Quickで染色し、典型的なMalassezia細胞の存在を顕微鏡で観察した。 35℃で培養し、3日、5日、7日、14日後に検査した。 増殖が認められた場合，オリーブオイル添加SGAとLeeming’s培地から5種類のコロニーを選び，SGA上で再培養し，脂質依存性を判定した． M. pachydermatisは顕微鏡的形態とSGA上での生育能力によって同定された。 脂質依存性酵母の同定は、Guillotら（7）が提唱したTween拡散試験、Cremophor EL同化試験、Mayserら（10）のエスクリンの分割法に基づいて行い、対照として以下の型株を用いた。 M. furfur CBS 1878T、M. furfur CBS 7019NT（NTはneotype）、M. sympodialis CBS 7222T、M. slooffiae CBS 7956T, M. globosa CBS 7966T, M. obtusa CBS 7876T (E. Guého and J. Guillotから好意で提供)を対照とした。 Tween拡散試験により、様々なポリオキシエチレンソルビタンエステル（Tween 20、40、60、80）を同化する能力によって、脂質依存性の種を区別することができる。 Cremophor ELはひまし油とリシノレイン酸を含み，M. furfur，M. slooffiae，M. sympodialisを鑑別するための追加のキーキャラクターとして用いられている。
猫7頭の耳垢のDiff-Quick染色スミアに典型的なマラセチア細胞が認められたが，培養により陽性となったものはこのうちの5例のみである． 7頭（21.2%）の猫からマラセチア属菌が分離されたが，これらの猫の2つのDiff-Quick染色塗抹標本では典型的なマラセチア属菌は検出されなかった． 他の種に属する酵母は分離されなかった． 6匹の猫（18.1%）では、最初の1週間の培養でM. pachydermatisのみが分離された（3日目に3株、5日目に2株、7日目に1株が培養された）。 培養7日目に1匹の猫から脂質依存性の種のみが分離された。 この分離菌は，32℃で7日間培養後，修正Dixon寒天（麦芽エキス36g，ペプトン6g，乾燥牛胆汁20g，Tween40 10ml，グリセロール2ml，オレイン酸2ml，寒天12g/リットル，pH6.0）（4）に平均直径4.3mmのクリーム状で滑らかなumbonateコロニーを形成していた． テクスチャーは破砕性で、細胞は卵形から球形（1.5〜3.0μm×1.5〜4μm）であった。 芽は広い基部に形成され，一部の細胞では短いフィラメントが見られた。 カタラーゼ反応は陽性であった。 本菌は4種のTweens（20，40，60，80）を利用し，Cremophor ELを同化し，タイプ株M. furfur CBS 1878T，M. furfur CBS 7019NTと同様にエスクリン分裂を弱く陽性化した（図1）． これらの結果から、この脂質依存性酵母はM. furfur(7, 10)と同定された。