Manual de Laboratorio de Biología I

Cosas que deberías ser capaz de explicar a otra persona después de este laboratorio:

• Compuesto
• Aumento total
• Binocular
• Campo de visión
• Profundidad de foco
• Fenómeno de inversión

Presentación de diapositivas

Antecedentes

Muchos organismos (bacterias) y partes de organismos (células) que estudian los biólogos son demasiado pequeños para ser vistos con el ojo humano. Utilizamos microscopios para ampliar las muestras para nuestra investigación. La palabra microscopio significa «ver pequeño» y el primer microscopio primitivo se creó en 1595.

Hay varios tipos de microscopios, pero usted utilizará principalmente un microscopio de luz compuesto. Este tipo de microscopio utiliza la luz visible enfocada a través de dos lentes, el ocular y el objetivo, para ver una pequeña muestra. Sólo las células que son lo suficientemente finas para que la luz las atraviese serán visibles con un microscopio de luz en una imagen bidimensional.

Otro microscopio que utilizarás en el laboratorio es un microscopio estereoscópico o de disección. Este tipo de microscopio utiliza la luz visible para ver especímenes más gruesos y grandes, como un insecto, en 3D. Dado que usted está viendo muestras más grandes, el rango de aumento del microscopio de disección es menor que el del microscopio de luz compuesta.

Su instructor revisará las partes y funciones de los microscopios de luz compuesta que utilizaremos a lo largo del semestre. Complete la tabla de la página siguiente para ayudarle a recordar esta importante información. Es probable que vuelvas a consultar esta página con frecuencia. Aquí tienes una imagen de un microscopio óptico para que lo etiquetes y tomes notas.

Parte del microscopio	Función
Oculares (oculares)
Brazo
Pieza nasal giratoria
Estadio
Objetivos
Pinzas de deslizamiento
Pomo de control del estadio
Condensador
Diafragma de iris
Lámpara de subestadio (Iluminador)
Ajuste grueso
Ajuste fino ajuste
Base

Reglas e instrucciones para el uso de los microscopios de luz compuestos

Su instructor discutirá el uso del microscopio con su clase. Se revisarán los pasos adecuados a seguir para enfocar correctamente. Deberá seguir la secuencia paso a paso que le indique su instructor. Aunque esté familiarizado con este tipo de microscopio, se espera que siga el repaso del enfoque con el resto de la clase.

1. Reglas generales importantes:
   1. Lleve siempre el microscopio con las 2 manos: coloque una mano en el brazo del microscopio y la otra bajo la base del mismo.
   2. No toque las lentes del objetivo (es decir, las puntas de los objetivos).
   3. Mantenga los objetivos en la posición de exploración y mantenga la platina baja cuando añada o retire portaobjetos.
   4. Mire siempre el microscopio desde un lado cuando realice grandes cambios en la altura de la platina.
   5. Las lentes de los objetivos deben limpiarse únicamente con papel especial para lentes y líquido limpiador de lentes.
   6. No juegue a las manos: no se debe desmontar el microscopio. Informe a su instructor de los fallos de funcionamiento.
2. Para obtener un microscopio del gabinete del laboratorio:
   1. Primero despeje el área de la mesa para el microscopio-evite un área de trabajo abarrotada.
   2. Los microscopios están numerados de acuerdo con el lugar donde está sentado. Encuentre el número bajo su mesa y utilice el microscopio correspondiente.
   3. Lleve el microscopio con las DOS manos.
   4. Asegure el cable eléctrico-¡no deje que cuelgue de la mesa!
3. Cuando devuelva el microscopio al armario del laboratorio:
   1. Baje la platina.
   2. Gire el objetivo de exploración hasta su posición sobre la platina.
   3. Retire su portaobjetos de la platina.
   4. Limpie el portaobjetos y el objetivo utilizando el líquido limpiador de lentes especial y el papel suministrado.
   5. Centre la platina de forma que no sobresalga demasiado hacia ninguno de los lados.
   6. Asegure el cable envolviéndolo bajo la platina del microscopio..
   7. Vuelva a colocar la cubierta antipolvo.
   8. Lleve el microscopio con las DOS manos.
   9. Vuelva a colocar el microscopio en el mismo cubículo del que lo obtuvo asegurándose de ponerlo con el brazo extendido.
4. Para enfocar el microscopio:
   Mire el microscopio desde un lado:
   1. Baje la platina hasta donde pueda llegar.
      1. Gire los objetivos de forma que el objetivo de exploración apunte hacia abajo en la platina.
      2. Ajuste la platina de forma que la apertura (la abertura en el centro de la platina) esté centrada.
      3. Coloque su portaobjetos en la platina, utilizando la abrazadera de la platina para asegurarlo. La pinza de la platina se mueve sólo dentro del plano horizontal de la platina, y asegura la platina tocando apenas la esquina inferior derecha de la platina.
      4. Centre el espécimen en su platina bajo el objetivo moviendo la platina.
      5. Mueva la platina hacia arriba casi hasta donde pueda llegar, teniendo cuidado de no dejar que la platina toque la lente del objetivo; mire desde un lado para poder ver hasta dónde debe subir la platina.
   2. Mira a través de los oculares:
      1. Usa el mando de ajuste grueso para mover la platina hacia abajo hasta que tu espécimen esté enfocado, entonces afina el enfoque.
      2. Centra el espécimen en el campo del microscopio moviendo la platina.
   3. Mire el microscopio desde un lado:
      1. Gire lentamente el objetivo de baja potencia (10X) hasta su posición.
   4. Mire a través de los oculares:
      1. Ajuste el enfoque, si es necesario, con el mando de ajuste grueso. Por lo general, sólo es necesario un ajuste mínimo.
      2. Centre el espécimen en el campo, si es necesario.
   5. Mire el microscopio desde un lado:
      1. ¡Gire el objetivo de alta potencia en su lugar con mucho cuidado!
   6. Mire a través de los oculares:
      1. Utilizando sólo el mando de ajuste fino, afine el enfoque. Vuelva a centrar si es necesario. (Si su espécimen ha «desaparecido», vuelva inmediatamente a la potencia baja y vuelva a centrar el espécimen.)
      2. Cuando retire un portaobjetos, ¡vuelva siempre a colocar los objetivos en la posición de exploración y baje la platina antes de levantar el portaobjetos!

Parte 1: Aumento total

El aumento es la relación entre el tamaño de la imagen con el microscopio y el tamaño real del objeto. Cuando se dice que el aumento es de 10, la imagen que se ve con el microscopio es diez veces mayor que si se ve el espécimen a simple vista. Recuerda que con un microscopio de luz compuesto estás ampliando con dos lentes, así que para calcular el aumento total multiplicas el aumento del objetivo por el aumento del ocular. Observe el microscopio y utilice la siguiente tabla para calcular el aumento total de cada lente:

.

	Lente objetiva	Lente ocular	= Aumento total
Objetivo de exploración
Objetivo Bajo
Objetivo Alto

Parte 2: Fenómeno de inversión

Obtenga una diapositiva de la letra «e» disponible en el aula. Observa el portaobjetos con los ojos y luego colócalo en el microscopio. Utilice la secuencia de enfoque para ver el portaobjetos a baja potencia.

Procedimiento

1. Dibuje la letra «e» tal y como aparece cuando mira el portaobjetos sin el microscopio.
2. Dibuje la letra «e» tal y como aparece cuando mira el portaobjetos al microscopio.
3. Mueva su portaobjetos hacia la derecha utilizando la palanca de la platina mecánica mientras mira por los oculares. ¿Qué sentido tiene la «e»?
4. Mueva su portaobjetos hacia la derecha utilizando la palanca de la platina mecánica mientras mira a través de los oculares. ¿En qué sentido se mueve la «e»?

Enuncie el fenómeno de inversión con sus propias palabras.

Parte 3: Campo de visión

El campo de visión es la cantidad de muestra que se ve cuando se mira a través de los objetivos. El campo de visión disminuye a mayores aumentos.

Procedimiento

Coloque una regla de plástico azul a través de la abertura de la platina de manera que el borde de la regla sea visible como una línea vertical a lo largo del diámetro del campo. Estime el tamaño del campo en milímetros para cada una de las lentes del objetivo.

Escanee __________ Bajo (10X) __________ Alto (40X) __________

Parte 4: Profundidad de enfoque

La profundidad de enfoque es el grosor de la muestra que permanece enfocada a un determinado aumento. La profundidad de enfoque disminuye a mayores aumentos.

Procedimiento

Obtenga un portaobjetos de hilos de colores, y obsérvelo bajo escaneo o baja potencia. A continuación, determine qué hilo de color está:

• En la parte superior
• En el centro
• En la parte inferior

Sugerencia: utilizando las instrucciones de enfoque, enfoque la zona donde se cruzan los tres hilos. Utilice el enfoque fino para discernir el orden de los hilos.

Parte 5: Realización de un montaje en húmedo

A lo largo del semestre, deberá realizar con éxito una serie de preparaciones sencillas de portaobjetos llamadas «montajes en húmedo». El espécimen que se va a observar se coloca en un portaobjetos limpio, se añaden una o dos gotas de agua y se coloca cuidadosamente un cubreobjetos sobre el agua y el espécimen. Su instructor le demostrará esta técnica.

Haga un montaje húmedo de agua de estanque siguiendo el procedimiento siguiente:

1. Coloque una gota de agua de estanque en un portaobjetos de vidrio limpio utilizando la pipeta de plástico desechable.
2. Cubra el agua de estanque en el portaobjetos con un cubreobjetos. Intenta colocar el cubreobjetos en ángulo para evitar las burbujas de aire.
3. Limpia cualquier exceso de líquido en tu portaobjetos.
4. Coloca el portaobjetos en el microscopio para observar la muestra.
   1. Empiece con el objetivo de exploración
   2. Cambie con cuidado a los objetivos bajos y altos según sea necesario.

Es de esperar que vea algunos organismos vivos en el agua de su estanque. Si ve material verde, probablemente sea algún tipo de planta. Mira a ver si hay algo que se mueve. En el espacio siguiente, describe lo que observas al microscopio y haz un dibujo sencillo.

Parte 6: Microscopio de disección estereoscópico

Su instructor le demostrará el uso correcto del microscopio de disección. Estos microscopios generalmente dan un aumento menor que el microscopio compuesto que usted está usando.

Procedimiento

Vea los especímenes disponibles en la mesa del laboratorio usando el microscopio de disección. Observa que el microscopio tiene dos fuentes de luz, una desde la base y otra desde arriba. Los especímenes no siempre están montados en un portaobjetos. Observe también que cuando ve los objetos con el microscopio de disección son tridimensionales.

Limpieza y cuidado del microscopio

1. Describe cómo y con qué debes limpiar la lente del microscopio.
2. Enumera cuatro cosas que debes hacer cuando termines de usar el microscopio al final del laboratorio.