Background
Vitamine B12 is de generieke descriptor voor die corrinoide verbindingen die kwalitatief de biologische activiteit van cyanocobalamine vertonen. De belangrijkste cobalaminen met fysiologische werking zijn hydroxycobalamine, methylcobalamine en deoxyadenosylcobalamine. Vitamine B12 is nodig voor de synthese van vetzuren in myeline en, in combinatie met foliumzuur, voor de synthese van DNA. Een adequate inname van vitamine B12 is essentieel voor een normale bloedfunctie en neurologische functie. Het kan vele jaren in de lever worden opgeslagen.
Vitamine B12 kan worden omgezet in een van de twee cobalamine co-enzymen die actief zijn in de mens; methylcobalamine en 5-deoxyadenosylcobalamine. Vitamine B12 is een cofactor voor de enzymen methioninesynthase en L-methylmalonyl-CoA-mutase en is betrokken bij de omzetting van homocysteïne in methionine en van L-methylmalonyl-coenzym A (CoA) in succinyl-CoA. Bij vitamine B12-deficiëntie kan folaat zich ophopen in serum als gevolg van vertraging van de vitamine B12-afhankelijke methyltransferase.
Terwijl er enkele plantaardige bronnen van vitamine B12 zijn, zoals bepaalde algen en planten die zijn blootgesteld aan bacteriële inwerking of zijn besmet door aarde of insecten, halen mensen bijna al hun vitamine B12 uit dierlijk voedsel. Ongeveer 25% van vitamine B12 is afkomstig van rood vlees (Baghurst et al 2000). Voor volwassenen en kinderen is ongeveer 30% respectievelijk 50% afkomstig van melk en zuivelproducten (Cobiac et al 1999).
Absorptie van vitamine B12 is nu bekend dat het complexer is dan vroeger werd gedacht. In voedingsmiddelen wordt methyl-, deoxyadenosyl-, of hydroxocobalamine gebonden aan enzymen in vlees en andere dierlijke voedingsmiddelen. De cobalamine komt vrij door de werking van zuur en pepsine die het bindende eiwit in de (normale) maag verteren. De vrijgekomen cobalamine vormt een stabiel complex met R-binder, een glycoproteïne dat in speeksel of door de maag wordt afgescheiden. Intrinsieke factor (IF), een 50 kDa glycoproteïne dat cobalamine bindt, wordt na de maaltijd door de pariëtale cellen van de maag uitgescheiden. De binding van cobalamine aan IF vindt echter niet plaats in de maag, zoals vroeger werd gedacht, omdat de affiniteit zeer laag is bij zure pH.
De R-binders worden gedeeltelijk afgebroken in de twaalfvingerige darm door proteasen in de alvleesklier. De cobalamine bindt vervolgens IF met hoge affiniteit in het meer alkalische milieu. In tegenstelling tot R-binders wordt IF niet verteerd door pancreasenzymen. Vitamine B12 uit de galbuis kan ook een combinatie vormen met IF, waardoor een enterohepatische cyclus ontstaat. Het vitamine B12-IF complex passeert vervolgens onveranderd de dunne darm en wordt geabsorbeerd in het terminale ileum door endocytose na binding aan een specifieke 460 kDa IF membraanreceptor. De receptor bindt alleen vitamine B12 dat aan IF is gehecht en bindt geen vitamine B12 analogen.
De absorptie van vitamine B12 neemt toe met toenemende inname (Adams et al 1971, Chanarin 1979). De absorptie varieert van 11% uit lever, 24-40% uit eieren en forel, tot meer dan 60% uit schapenvlees en kip (Doscherholmen et al 1975, 1978, 1981, Heyssel et al 1966). Het lage absorptiepercentage uit lever houdt waarschijnlijk verband met het zeer hoge gehalte aan B12 in de lever. Er zijn geen studies gerapporteerd over rood vlees, varkensvlees, zuivelproducten of andere vissoorten dan forel, dus is bij het ontwikkelen van de inname-eisen uitgegaan van een conservatieve correctie voor de biologische beschikbaarheid van 50% voor gezonde volwassenen met een normale maagfunctie. Als mensen grote hoeveelheden voedingsmiddelen consumeren die van nature rijk zijn aan vitamine B12, zou de absorptie lager zijn.
Vitamine B12 die in kristallijne vorm aan voedingsmiddelen (bijvoorbeeld dranken, vleesanalogen of sojamelk) wordt toegevoegd, heeft een vergelijkbare absorptie als het om lage hoeveelheden gaat (<5 µg per dosis), maar een zeer lage absorptie (1% of minder) als het om 500 µg per dosis of meer gaat (Berlin et al 1968, Heyssel et al 1996). De uitscheiding van vitamine B12 gebeurt over het algemeen via de feces en is evenredig met de lichaamsvoorraad (Adams 1970, Heinrich 1964, Mollin & Ross 1952). Andere verliezen treden op via de huid en door stofwisselingsreacties.
De behoefte aan vitamine B12 kan worden beïnvloed door de leeftijd, hoewel dit niet door alle studies wordt bevestigd. (van Asselt et al 1996). Het leeftijdseffect kan optreden door de invloed van toenemende atrofische gastritis (Krasinski et al1986) of verminderde zuurgraad van de maag (Scarlett et al 1992). In Australië (Andrews et al 1967), de VS (Hurwitz et al 1997, Krasinski et al 1986) en Scandinavië (Johnsen et al 1991) zijn percentages van atrofische gastritis bij ouderen gemeld die variëren van 10-30%.
Onvoldoende gebruik van vitamine B12 kan voorkomen bij mensen met genetische afwijkingen, waaronder deleties of afwijkingen in MMA-CoA mutase, transcobalamine II of enzymen in de cobalamine adenosyleringsroute.
Vitamine B12-deficiëntie kan hematologische, neurologische of darmsymptomen geven. De hematologische effecten zijn niet te onderscheiden van foliumzuurdeficiëntie. Zij omvatten een reeks effecten die gewoonlijk met bloedarmoede worden geassocieerd, zoals bleke huid, verminderde energie en inspanningstolerantie, vermoeidheid, kortademigheid en hartkloppingen. Het onderliggende probleem is interferentie met de DNA-synthese die leidt tot de productie van abnormaal grote erytrocyten.
Neurologische complicaties komen voor bij ongeveer 75-90% van de mensen met een duidelijk tekort. Deze complicaties blijken omgekeerd evenredig te zijn met het optreden van de hematologische symptomen (Healton et al 1991, Savage et al 1994). Zij omvatten zintuiglijke stoornissen in de ledematen, motorische stoornissen en cognitieve veranderingen van geheugenverlies tot dementie, met of zonder stemmingsverandering. Er kunnen ook gezichtsstoornissen, impotentie en verminderde darm- en blaascontrole optreden. Een studie van Louwman e.a. (2000) gaf aan dat cobalaminetekort zonder hematologische verschijnselen ook de cognitieve functie in de adolescentie kan aantasten.
De indicatoren die beschikbaar zijn voor het schatten van de behoefte aan vitamine B12 omvatten hematologische respons, alsmede metingen van serum- of plasmavitamine B12, MMA, homocysteïne, formiminoglutaminezuur, propionaat en methylcitraat en holo-transcobalamine II.
Haematologische reacties die zijn beoordeeld, zijn onder meer een stijging van het hemoglobinegehalte, het hematocriet en het erytrocytenaantal of een daling van het MCV of een optimale stijging van het reticulocytenaantal. Hiervan is MCV beperkt bruikbaar omdat het 120 dagen duurt voordat veranderingen zichtbaar zijn, en terwijl erytrocyten, hemoglobine en hematocriet robuust zijn, veranderen zij langzaam. Het aantal reticulocyten is echter bruikbaar omdat een toename in reactie op een dieet binnen 48 uur zichtbaar is en na 5-8 dagen een piek bereikt.
Serum of plasma vitamine B12 weerspiegelt zowel de inname als de voorraden, maar aanvaardbare niveaus kunnen nog enige tijd worden gehandhaafd nadat een tekort is opgetreden, omdat ter compensatie vitamine B12 vrijkomt uit de weefsels. Lage niveaus zouden echter wijzen op langdurige tekorten of chronische lage innames. MMA vertoont een viervoudig bereik in de normale populatie, maar stijgt wanneer de aanvoer van vitamine B12 laag is of wanneer de absorptie is aangetast (Joosten et al 1996). Verhoogde MMA-spiegels kunnen worden verlaagd door toediening van vitamine B12 (Joosten et al 1993, Naurath et al 1995, Norman & Morrison 1993, Pennypacker et al 1992).
Aangezien de aanwezigheid van verhoogd MMA een vitamine B12-specifieke verandering vertegenwoordigt, is MMA de voorkeursindicator voor de vitamine B12-status. Er zijn echter niet voldoende gegevens beschikbaar om MMA-niveaus te gebruiken om voedingsaanbevelingen op te stellen. De homocysteïneconcentratie verandert als reactie op de vitamine B12-status, maar is niet specifiek voor vitamine B12, maar reageert ook op de foliumzuur- of vitamine B6-status of op beide, en formiminoglutaminezuur verandert ook als gevolg van de foliumzuurstatus. Proprionaat en methylcitraat reageren beide op veranderingen in de vitamine B12-status (Allen e.a. 1993), maar zij bieden geen voordelen boven MMA. Metingen van holotranscobalamine II zijn onvoldoende robuust om de behoefte te kunnen beoordelen.
Aanbevelingen per levensfase en geslacht
Infants
| Leeftijd | AI |
|---|---|
| 0-6maanden | 0.4 µg/dag |
| 7-12 maanden | 0,5 µg/dag |
Rationale: De AI voor 0-6 maanden is gebaseerd op de vitamine B12-inname van zuigelingen die moedermelk krijgen. De AI werd berekend door de gemiddelde inname van moedermelk (0,78 L/dag) te vermenigvuldigen met de gemiddelde concentratie van vitamine B12 in moedermelk, en af te ronden (FNB:IOM 1998). De gerapporteerde waarden van moedermelkconcentratie variëren sterk, deels door verschillen in analysemethoden en deels door variatie in de vitamine B12 status van de moeder en de huidige inname. De mediaanwaarden zijn aanzienlijk lager dan de gemiddelde waarden. In een studie van 9 goed gevoede Braziliaanse moeders wier zuigelingen uitsluitend borstvoeding kregen, was de gemiddelde concentratie in moedermelk 0,42 µg/L bij 2 maanden en 0,34 µg/L bij 3 maanden. (Trugo & Sardinha 1994). De waarde voor 2 maanden werd gekozen om een adequate inname te garanderen en werd vermenigvuldigd met het dagelijkse melkvolume (0,42 µg/L x 0,78 L/dag = 0,33 µg/dag) en naar boven afgerond om de AI van 0,4 µg te verkrijgen. Aangezien er weinig gegevens zijn over het vitamine B12-gehalte van speendiëten, werd de AI voor 7-12 maanden geschat door extrapolatie naar boven van de AI voor 0-6 maanden. Dit werd gecontroleerd door extrapolatie op basis van het EAR voor volwassenen en gecorrigeerd voor de verwachte variantie om een aanbevolen inname te schatten. De eerste raming leverde een waarde op van 0,5 µg/dag na afronding naar boven en de tweede 0,6 µg/dag. De AI werd vastgesteld op 0,5 µg/dag.
Notitie: Om een adequate vitamine B12-status bij hun zuigelingen te verzekeren, en ernstige gevolgen zoals cognitieve stoornissen of zelfs coma bij de zuigeling te voorkomen, moeten veganistische moeders hun dieet aanvullen met vitamine B12 op het ADH-niveau gedurende de zwangerschap en de lactatie, op grond van bewijs dat de voorraden in zuigelingen van veganistische moeders bij de geboorte laag zijn en de melk mogelijk slechts zeer kleine hoeveelheden levert (Specker et al 1990). Sojapreparaten die tijdens het spenen worden gebruikt, moeten met vitamine B12 worden verrijkt tot een gelijkwaardig niveau. Als de moeder tijdens de zwangerschap en de lactatie geen supplementen heeft gekregen en het kind borstvoeding krijgt, zal de zuigeling vanaf de geboorte supplementen nodig hebben.
Kinderen &adolescenten
| Leeftijd | EAR | RDI |
|---|---|---|
| Alle | ||
| 1-3 jr | 0.7 µg/dag | 0,9 µg/dag |
| 4-8 jr | 1,0 µg/dag | 1.2 µg/dag |
| Boys | ||
| 9-13 jr | 1,5 µg/dag | 1.8 µg/dag |
| 14-18 jr | 2,0 µg/dag | 2,4 µg/dag |
| meisjes | ||
| 9-13 jr | 1.5 µg/dag | 1.8 µg/dag |
| 14-18 jr | 2.0 µg/dag | 2.4 µg/dag |
Rationale: Er zijn weinig gegevens over kinderen of adolescenten waarop de EAR kan worden gebaseerd, zodat de EAR is vastgesteld door extrapolatie van gegevens over volwassenen, aangepast voor het lichaamsgewicht en met verwijzing naar de groeibehoeften, en naar boven afgerond (FNB:IOM 1998). Bij gebrek aan informatie over de standaardafwijking van de behoefte is bij de vaststelling van de ADH uitgegaan van een CV van 10% voor de EAR. Merk op dat veganistische kinderen aanvulling nodig zullen hebben.
Volwassenen
| Leeftijd | EAR | RDI | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Mannen | ||||||
| 19-30 jr | 2,0 µg/dag | 2,0 µg/dag | 2,0 µg/dag | 2,0 µg/dag | 2,0 µg/dag | .4 µg/dag |
| 31-50 jr | 2,0 µg/dag | 2,4 µg/dag | ||||
| 51-70 jr | 2.0 µg/dag | 2,4 µg/dag | ||||
| >70 jr | 2,0 µg/dag | 2.4 µg/dag | ||||
| Vrouwen | ||||||
| 19-30 jr | 2,0 µg/dag | 2.4 µg/dag | ||||
| 31-50 jr | 2,0 µg/dag | 2,4 µg/dag | ||||
| 51-70 jr | 2.0 µg/dag | 2,4 µg/dag | ||||
| >70 jr | 2,0 µg/dag | 2.4 µg/dag | ||||
Rationale: De EAR voor volwassenen werd vastgesteld op basis van hematologische gegevens en serum vitamine B12 niveaus (FNB:IOM 1998). Er waren niet voldoende gegevens beschikbaar om verschillen in de behoefte van mannen en vrouwen vast te stellen. Bij gebrek aan informatie over de standaardafwijking van de behoefte is bij de vaststelling van de ADH uitgegaan van een CV van 10% voor de EAR. Merk op dat strikte veganisten supplementatie met vitamine B12 nodig zullen hebben.
Notitie: De natuurlijke vitamine B12 in voedingsmiddelen kan minder biobeschikbaar zijn voor het aanzienlijke aantal oudere volwassenen met atrofische gastritis met een lage maagzuursecretie. Mensen met deze aandoening kunnen een hogere inname van vitamine B12-rijke voedingsmiddelen, met vitamine B12 verrijkte voedingsmiddelen of supplementen nodig hebben.
Zwangerschap
| Leeftijd | EAR | RDI |
|---|---|---|
| 14-18 jr | 2,2 µg/dag | 2.6 µg/dag |
| 19-30 jr | 2,2 µg/dag | 2,6 µg/dag |
| 31-50 jr | 2,2 µg/dag | 2.6 µg/dag |
Rationale: Het EAR werd vastgesteld op basis van het maternale EAR plus een tegemoetkoming voor de foetale en placentale behoeften. De accumulatie door de foetus bedraagt gemiddeld 0,1-0,2 µg/dag (Baker et al 1962, Loria et al 1977, Vaz Pinto et al 1975), maar de accumulatie door de placenta bedraagt slechts 14 ng/L (Muir & Landon 1985). Daarom werd een extra 0,2 µg/dag toegevoegd aan de behoefte van de moeder en vervolgens werd de ADH afgeleid, uitgaande van een CV van 10% voor de EAR. Veganistische moeders zullen gedurende de gehele zwangerschap en tijdens de lactatie supplementen nodig hebben in voldoende hoeveelheden om een adequate voorziening voor henzelf en hun kind te verzekeren.
Lactatie
| Leeftijd | EAR | RDI |
|---|---|---|
| 14-18 jr | 2,4 µg/dag | 2.8 µg/dag |
| 19-30 jr | 2,4 µg/dag | 2,8 µg/dag |
| 31-50 jr | 2,4 µg/dag | 2.8 µg/dag |
Rationale: De EAR voor lactatie werd vastgesteld door de gemiddelde in melk uitgescheiden hoeveelheid (0,33 µg/dag) op te tellen bij de maternale EAR, en naar boven af te ronden. De ADH werd vastgesteld uitgaande van een CV van 10% voor de EAR. Veganistische moeders zullen tijdens de lactatie voldoende moeten bijvoeden om voor een toereikende voorziening voor henzelf en hun kind te zorgen.
Bovenste innameniveau
Er zijn onvoldoende gegevens om een UL vast te stellen.
Er zijn geen aanwijzingen dat de huidige innameniveaus van voedingsmiddelen en supplementen een gezondheidsrisico inhouden. Er zijn geen nadelige effecten in verband gebracht met een te hoge inname van vitamine B12 uit voedingsmiddelen of supplementen bij gezonde personen. Er zijn zwakke aanwijzingen uit dierstudies dat vitamine B12 de effecten van carcinogene chemicaliën kan versterken (Day e.a. 1950, Georgadze 1960, Kalnev e.a. 1977, Ostryanina 1971), maar andere studies spreken dit tegen (Rogers 1975). Het ogenschijnlijke gebrek aan toxiciteit zou verband kunnen houden met het vermogen van het lichaam om de absorptie te verminderen als reactie op een hoge inname. Omdat er geen dosis-respons gegevens zijn, kan er geen UL worden vastgesteld.
Adams JF, Ross SK, Mervyn RL, Boddy K, King P. Absorptie van cyanocobalamine, co-enzym B12, methylcobalamine en hydroxocobalamine bij verschillende dosisniveaus. Scand J Gastroenterol 1971;6:249-52.
Adams JF. Correlatie tussen serum en urine vitamine B12. Br Med J 1970;1:138-9.
Allen RH, Stabler SP, Lindenbaum J. Serum betaïne, N,N-dimethylglycine en N-methylglycine levels in patients with cobalamin and folate deficiency and related inborn errors of metabolism. Metabolism1993;42:1448-60.
Andrews GR, Haneman B, Arnold BJ, Booth JC, Taylor K. Atrophic gastritis in the age. Australas Ann Med 1967;16:230-5.
Baghurst KI, Record SJ, Leppard P. Red meat consumption in Australia: intakes, nutrient composition and changes over time. Aust J Nutr Diet 2000;57(4) Suppl:S1-S36.
Baker SJ, Jacob E, Rajan KT, Swaminathan SP. Vitamine B12 deficiency in pregnancy and the puerperium Br J Med 1962;1:1658-61.
Berlin H, Berlin R, Brante G. Oral treatment of pernicious anaemias with high doses of vitamin B12 without intrinsic factor Acta Med Scand 1968;184:247-58.
Chanarin I. The megaloblastic anaemias, 2nd ed. Oxford: Blackwell Scientific, 1979.
Cobiac L, Syrette J, Record S. Dairy foods in the Australian diet – results from the 1995/6 National Nutrition Survey. Een rapport voor de Australian Dairy Corporation, Adelaide: CSIRO, 1999.
Day PL, Payne LD, Dinning JS. Procarcinogenic effect of vitamin B12 on p-dimethylaminoazobenzene-fed rats. Proc Soc Exp Biol Med 1950;74:854-7.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Vitamin B12 absorption from eggs. Proc Soc Exp Biol Med 1975;149:987-90.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Vitamin B12 absorption from chicken meat. Am J Clin Nutr 1978;31:825-30.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Vitamin B12 absorption from fish. Proc Soc Exp Biol Med 1981;167:480-4.
Food and Nutrition Board: Institute of Medicine. Thiamin, Riboflavin, Niacin, Vitamin B6, Folate, Vitamin B12, Pantothenic acid, Biotin and Choline. Washington DC: National Academy Press, 1998.
Georgadze GE. Effect van vitamine B1 en B12 op de inductie van kwaadaardige groei bij hamsters. Vopr Onkol 1960;6:54-8.
Healton EB, Savage DG, Brust JC, Garrett TJ, Lindenbaum J. Neurologic aspects of cobalamin deficiency. Medicine (Baltimore)1991;70:229-45.
Heinrich HC. Metabolic basis of the diagnosis and therapy of vitamin B12 deficiency Semin Hematol 1964;1:199-249.
Heyssel RM, Bozian RC, Darby WJ, Bell MC. Vitamine B12 turnover in man. The assimilation of vitamin B12 from natural foodstuff by man and estimates of minimal daily requirements. Am J Clin Nutr 1966;18:176-84.
Hurwitz A, Brady DA, Schaal SE, Samloff IM, Dedon J, Ruhl CE. Gastric acidity in older adults. JAMA 1997;278:659-62.
Johnsen R, Berensen B, Staume B, Forde OH, Bostad L, Burhol PG. Prevalences of endoscopic and histological findings in subjects with and without dyspepsia Br Med J 1991;302:749-52.
Joosten E, Lesaffre E, Reizler R. Are different reference intervals for methylmalonic acid and total homocysteine necessary in elderly people? Eur J Haematol 1996;57:222-6.
Joosten E, Pelemans W, Devos P, Lesaffre E, Goosens W, Criel A, Verhaeghe R. Cobalamin absorption and serum homocysteine and methylmalonic acid in elderly subjects with low serum cobalamin. Eur J Haematol 1993;51:25-30.
Kalnev VR, Rachkus I, Kanopkaite SI. Invloed van methylcobalamine en cyanocobalamine op het neoplastisch proces bij ratten. Pzrikl Biochim Mikrobiol 1977;13:677.
Krasinski SD, Russel RM, Samloff IM, Jacob RA, Dallal GE, McGandy RB, Hatz SC. Fundic atrophic gastritis in an elderly population: Effect op hemoglobine en verschillende serum voedingsindicatoren. J Am Geriatr Soc 1986;34:800-6.
Loria A, Vaz-Pinto A, Arroyo P, Ramirez-Mateos C, Sanchez-Medal L. Nutritional anemia. 6. Foetale leveropslag van metabolieten in de tweede helft van de zwangerschap. J Pediatr 1977;9:569-73.
Louwman MW, van Dusseldorp M, van de Vijver FJ, Thomas CM, Schneede J, Ueland PM, Refsum H, van Staveren WA. Signs of impaired cognitive function in adolescents with marginal cobalamin status. Am J Clin Nutr 2000;72:762-9.
Mollin DI, Ross GI. The vitamin B12 concentrations of serum and urine of normals and of patients with megaloblastic anaemias and other diseases. J Clin Pathol 1952;5:129-39.
Muir M, Landon M. Endogene oorsprong van microbiologisch-inactieve cobalaminen (cobalamine-analogen) in de menselijke foetus. Br J Haematol 1985;61:303-6.
Naurath HJ, Josten E, Riezler R, Stabler SP, Allen RH, Lindenbaum J. Effects of vitamin B12, folate, and vitamin B6 supplements in elderly people with normal serum vitamin concentrations. Lancet 1995:346:85-9.
Norman EJ, Morrison JA. Screening elderly populations for cobalamin(vitamin B12) deficiency using the urinary methylmalonic acid assay by gas chromatography mass spectrometry. Am J Med 1993;94:589-94.
Ostryanina AD. Effect van vitamine B12 op de inductie van tumoren in muizenhuid. Patol Fiziol Eksperoim Terapiya 1971;15:48-53.
Pennypacker LC, Allen RH, Kelly JP, Matthews LM, Grigsby L, Kaye K, Lindenbaum J, Stabler SP. High prevalence of cobalamin deficiency in elderly out-patients. J Am Geriatr Soc 1992;40:1197-204.
Rogers AE. Variable effects of a lipoprobe-deficient, high-fat diet on chemical carcinogens in rats. Cancer Res 1975;35:2469-74.
Savage D, Gangaidzo I, Lindenbaum J. Vitamin B12 deficiency is the primary cause of megablastic anemia in Zimbabwe. Br J Haematol 1994:86:844-50.
Scarlett JD, Read H, O’Dea K. Protein-bound cobalamin absorption declines in the elderly Am J Hematol 1992;39:79-83.
Specker BL, Black A, Allen L, Morrow F. Low milk concentrations are related to low serum concentrations in vegetarian women and to methylmalonic aciduria in their infants. Am J Clin Nutr 1990;52:1073-6.
Trugo NM, Sardinha F. Cobalamin and cobalamin-binding capacity in human milk. Nutr Res 1994;14:22-33.
Van Asselt DZ, van den Broek WJ, Lamers CB, Corstens FH, Hoefnagels WH. Free and protein-bound cobalamin absorption in healthy middle-aged and older subjects. J Am Geriat Soc 1996;44:949-53.
Vaz Pinto A, Torras V, Dsandoval JF, Dillman E, Mateos CR, Cordova MS. Bepaling van foliumzuur en vitamine B12 in foetale lever. Am J Clin Nutr 1975;28:1085-6.