- Cele laboratorium
- Pokaz slajdów
- Uwaga
- Tło
- Reguły i instrukcje dotyczące korzystania z mikroskopów świetlnych
- Część 1: Powiększenie całkowite
- Część 2: Inversion Phenomenon
- Procedura
- Część 3: Pole widzenia
- Procedura
- Część 4: Głębia ostrości
- Procedura
- Część 5: Wykonanie mokrego montażu
- Część 6: Mikroskop stereoskopowy
- Procedura
- Pytania laboratoryjne
- Czyszczenie i opieka nad mikroskopem
Cele laboratorium
Po zakończeniu laboratorium, student powinien być w stanie:
- zidentyfikować kiedy stereomikroskop (mikroskop rozcinający) a mikroskop świetlny złożony będzie użyty w laboratorium
- opisać główne różnice pomiędzy mikroskopami świetlnymi a elektronowymi
- opisać właściwy sposób przenoszenia mikroskopu
- zidentyfikować części mikroskopu świetlnego złożonego
- opisać etapy oglądania szkiełka na mikroskopie świetlnym
- określić całkowite powiększenie obiektu oglądanego przez mikroskop świetlny, jeśli podano powiększenia obiektywu i
- obiektywu
- wyjaśnić, dlaczego pole widzenia mikroskopu zmniejsza się wraz ze wzrostem powiększenia
Rzeczy, które powinieneś być w stanie wyjaśnić komuś po tym laboratorium:
- Związek
- Powiększenie całkowite
- Binokular
- Pole widzenia
- Głębokość ostrości
- Zjawisko inwersji
.
Pokaz slajdów
Uwaga
Mikroskopy świetlne używane w tym kursie są czułymi i drogimi instrumentami, które są obsługiwane przez wielu studentów w ciągu semestru. To laboratorium nauczy cię informacji i umiejętności potrzebnych do prawidłowego używania i dbania o mikroskopy.
Tło
Wiele organizmów (bakterii) i części organizmów (komórek), które biolodzy badają, jest zbyt małych, aby można je było zobaczyć ludzkim okiem. Używamy mikroskopów do powiększania okazów do naszych badań. Słowo mikroskop oznacza „widzieć małe”, a pierwszy prymitywny mikroskop został stworzony w 1595 roku.
Istnieje kilka rodzajów mikroskopów, ale najczęściej będziemy używać mikroskopu świetlnego złożonego. Ten typ mikroskopu wykorzystuje światło widzialne skupione przez dwie soczewki, okularową i obiektywową, do oglądania małych próbek. Tylko komórki, które są wystarczająco cienkie dla światła, aby przejść przez będzie widoczne z mikroskopu świetlnego w obrazie dwuwymiarowym.
Inny mikroskop, który będzie używany w laboratorium jest mikroskop stereoskopowy lub mikroskop rozcinający. Ten typ mikroskopu wykorzystuje światło widzialne do oglądania grubszych, większych okazów, takich jak owady, w 3D. Ponieważ oglądasz większe próbki, zakres powiększenia mikroskopu rozcinającego jest mniejszy niż mikroskopu złożonego.
Twój instruktor dokona przeglądu części i funkcji mikroskopów złożonych, których będziemy używać przez cały semestr. Wypełnij tabelę na następnej stronie, aby pomóc sobie w zapamiętaniu tych ważnych informacji. Prawdopodobnie będziesz często wracał do tej strony. Poniżej znajduje się obraz mikroskopu świetlnego, który możesz oznaczyć i zanotować.
Reguły i instrukcje dotyczące korzystania z mikroskopów świetlnych
Twój instruktor omówi z klasą sposób korzystania z mikroskopu. Zostaną omówione prawidłowe kroki, które należy podjąć w celu prawidłowego ustawienia ostrości. Należy postępować zgodnie z instrukcją krok po kroku. Nawet jeśli jesteś zaznajomiony z tym typem mikroskopu, nadal oczekuje się, że przejdziesz przez przegląd ustawiania ostrości z resztą klasy.
- Ważne zasady ogólne:
- Zawsze noś mikroskop dwoma rękami – jedną rękę umieść na ramieniu mikroskopu, a drugą pod podstawą mikroskopu.
- Nie dotykaj obiektywów (tj. końcówek obiektywów).
- Utrzymuj obiektywy w pozycji skanowania i utrzymuj stopień nisko podczas dodawania lub usuwania szkiełek.
- Zawsze patrz na mikroskop z boku, gdy dokonujesz dużych zmian w wysokości stopnia.
- Soczewki obiektywów powinny być czyszczone tylko za pomocą specjalnego papieru obiektywowego i płynu do czyszczenia obiektywów.
- Nie baw się w handyperson – żaden mikroskop nie może być demontowany. Zgłoś usterki swojemu instruktorowi.
- Aby uzyskać mikroskop z szafki laboratoryjnej:
- Najpierw zwolnij miejsce na stole na mikroskop – unikaj zatłoczonego miejsca pracy.
- Mikroskopy są ponumerowane zgodnie z miejscem, w którym siedzisz. Znajdź numer pod swoją ławką i użyj odpowiedniego mikroskopu.
- Noś mikroskop DWOMA rękami.
- Zabezpiecz przewód elektryczny – nie pozwól mu zwisać ze stolika!
- Przy powrocie mikroskopu do szafki laboratoryjnej:
- Opuść scenę.
- Obróć obiektyw skanujący do pozycji nad stolikiem.
- Zdejmij szkiełko ze stolika.
- Wyczyść szkiełko i obiektyw używając specjalnego płynu do czyszczenia soczewek i papieru dostarczonego w zestawie.
- Wyśrodkuj stolik tak, aby nie wystawał zbyt daleko na żadną ze stron.
- Zabezpiecz przewód owijając go pod stolikiem mikroskopu..
- Załóż ponownie osłonę przeciwpyłową.
- Noś mikroskop DWOMA rękami.
- Wróć mikroskop do tego samego schowka, z którego go otrzymałeś, upewniając się, że umieściłeś go w wyciągniętej ręce.
- Aby ustawić ostrość mikroskopu:
Spójrz na mikroskop z boku:- Opuść stopień tak daleko, jak to możliwe.
- Obróć obiektywy tak, aby obiektyw skanujący był skierowany w dół na stoliku.
- Wyreguluj stolik tak, aby apertura (otwór w środku stolika) była wyśrodkowana.
- Umieść preparat na stoliku, używając zacisku stolika, aby go zabezpieczyć. Zacisk porusza się tylko w płaszczyźnie poziomej sceny i zabezpiecza preparat ledwie dotykając prawego dolnego rogu slajdu.
- Wyśrodkuj preparat na slajdzie pod obiektywem przesuwając scenę.
- Przesuń scenę prawie tak daleko, jak to możliwe, uważając, aby slajd nie dotykał soczewki obiektywu – spójrz z boku, aby zobaczyć, jak wysoko podnieść scenę.
- Spojrzenie przez okular:
- Użyj pokrętła regulacji zgrubnej aby przesunąć stopień w dół aż do uzyskania ostrości na preparacie, następnie wyostrz ostrość.
- Wyśrodkuj preparat w polu mikroskopu przesuwając stopień.
- Spojrzenie na mikroskop z boku:
- Powoli obróć obiektyw małej mocy (10X) na pozycję.
- Spojrzenie przez okular:
- W razie potrzeby wyostrz ostrość za pomocą pokrętła regulacji zgrubnej. Zazwyczaj konieczna jest tylko minimalna korekta.
- Wyśrodkuj preparat w polu, jeśli to konieczne.
- Spójrz na mikroskop z boku:
- Obróć obiektyw dużej mocy na miejsce bardzo ostrożnie!
- Spójrz przez okular:
- Używając tylko pokrętła regulacji zgrubnej, wyostrz ostrość. W razie potrzeby ponownie wyśrodkuj. (Jeśli preparat „zniknął”, natychmiast powróć do niskiej mocy i ponownie wyśrodkuj preparat.)
- Przy wyjmowaniu preparatu, zawsze ustawiaj obiektywy z powrotem w pozycji skanowania i opuść stolik przed zdjęciem preparatu!
- Opuść stopień tak daleko, jak to możliwe.
Część 1: Powiększenie całkowite
Powiększenie jest stosunkiem wielkości obrazu uzyskanego za pomocą mikroskopu do rzeczywistej wielkości obiektu. Kiedy mówimy, że powiększenie wynosi 10, obraz, który widzimy za pomocą mikroskopu jest dziesięć razy większy niż przy oglądaniu preparatu gołym okiem. Pamiętaj, że w mikroskopie świetlnym powiększasz za pomocą dwóch obiektywów, więc aby obliczyć całkowite powiększenie, mnożysz powiększenie obiektywu przez powiększenie okularu. Obejrzyj mikroskop i skorzystaj z poniższej tabeli, aby obliczyć całkowite powiększenie dla każdego obiektywu:
Obiektyw | Obiektyw okularowy | = Powiększenie całkowite | |||
Obiektyw skanujący | |||||
Low Objective | |||||
High Objective |
Część 2: Inversion Phenomenon
Otrzymaj slajd z literą „e” dostępny w klasie. Obejrzyj szkiełko wzrokiem, a następnie umieść je na mikroskopie. Użyj sekwencji ogniskowania, aby obejrzeć szkiełko pod niską mocą.
Procedura
- Narysuj literę „e” tak, jak się pojawia, gdy patrzysz na szkiełko bez mikroskopu.
- Narysuj literę „e” tak, jak się pojawia, gdy patrzysz na szkiełko pod mikroskopem.
- Przesuń szkiełko w prawo za pomocą mechanicznej dźwigni stolika, patrząc przez okular. W którą stronę przesuwa się „e”?
- Przesuń szkiełko od siebie za pomocą mechanicznej dźwigni stolika, patrząc przez okular. W którą stronę porusza się „e”?
Opisać zjawisko inwersji własnymi słowami.
Część 3: Pole widzenia
Pole widzenia jest to część preparatu, którą widzimy patrząc przez obiektyw. Pole widzenia zmniejsza się przy większych powiększeniach.
Procedura
Postawić niebieską plastikową linijkę w poprzek otworu sceny tak, aby krawędź linijki była widoczna jako pionowa linia wzdłuż średnicy pola. Oszacuj rozmiar pola w milimetrach dla każdej z soczewek obiektywu.
Skanuj __________ Niskie (10X) __________ Wysokie (40X) __________
Część 4: Głębia ostrości
Głębia ostrości to grubość próbki, która pozostaje w centrum uwagi przy danym powiększeniu. Głębia ostrości zmniejsza się przy większych powiększeniach.
Procedura
Pozyskać szkiełko z kolorowymi nićmi i obejrzeć je pod skanowaniem lub przy małej mocy. Następnie określ, który kolor nici jest:
- Na górze
- W środku
- Na dole
Wskazówka: korzystając z instrukcji dotyczących ustawiania ostrości, skup się na obszarze, w którym krzyżują się trzy nici. Użyj precyzyjnego ustawiania ostrości, aby rozpoznać kolejność nitek.
Część 5: Wykonanie mokrego montażu
Przez cały semestr, będziesz musiał z powodzeniem wykonać kilka prostych preparatów na slajdach zwanych „mokrymi montażami”. Obserwowany okaz jest umieszczany na czystym szkiełku, dodawana jest kropla lub dwie wody, a następnie ostrożnie nakładany jest szkiełko nakrywkowe na wodę i okaz. Instruktor zademonstruje tę technikę.
Wykonaj preparat mokry z wody stawowej zgodnie z poniższą procedurą:
- Umieść kroplę wody stawowej na czystym szkiełku szklanym za pomocą plastikowej pipety jednorazowego użytku.
- Pokryj wodę stawową na szkiełku szkiełkiem nakrywkowym. Spróbuj umieścić szkiełko nakrywkowe pod kątem, aby uniknąć pęcherzyków powietrza.
- Zetrzyj nadmiar płynu na szkiełku.
- Umieść szkiełko na mikroskopie, aby obserwować preparat.
- Zacznij od obiektywu skanującego
- W razie potrzeby ostrożnie przełączaj na obiektywy niskie i wysokie.
Miejmy nadzieję, że w wodzie w stawie zobaczysz żywe organizmy. Jeśli widzisz zielony materiał, jest to prawdopodobnie jakiś rodzaj rośliny. Sprawdź, czy coś się porusza. W poniższym miejscu opisz, co obserwujesz pod mikroskopem i narysuj prosty obrazek.
Część 6: Mikroskop stereoskopowy
Twój instruktor zademonstruje właściwe użycie mikroskopu. Te mikroskopy dają zazwyczaj mniejsze powiększenie niż mikroskop złożony, którego używasz.
Procedura
Popatrz na okazy dostępne na stole laboratoryjnym używając mikroskopu rozcinającego. Zauważ, że mikroskop ma dwa źródła światła, jedno z podstawy i jedno z góry. Okazy nie zawsze są zamontowane na szkiełku podstawowym. Zauważ również, że kiedy oglądasz obiekty pod mikroskopem, są one trójwymiarowe.
Pytania laboratoryjne
- Wymień dwa sposoby, w jakie mikroskop stereoskopowy różni się od mikroskopu złożonego.
- Który mikroskop, mikroskop złożony czy mikroskop operacyjny, ma mniejsze powiększenie?
Czyszczenie i opieka nad mikroskopem
- Opisz jak i czym należy czyścić obiektyw mikroskopu.
- Wymień cztery rzeczy, które należy zrobić po zakończeniu korzystania z mikroskopu na koniec laboratorium.
.