… Rozszczep kręgosłupa (SB) jest najczęstszą upośledzającą wadą wrodzoną w Ameryce Północnej, występującą z częstością 3-4 na każde 10 000 żywych urodzeń. Najczęstszą i najcięższą postacią jest rozszczep kręgosłupa (MM), stanowiący ponad 90% wszystkich przypadków SB. MM jest uszkodzeniem kręgosłupa charakteryzującym się obecnością otworu w kręgosłupie, przez który wystają opony mózgowe i tkanki nerwowe. Kliniczne konsekwencje uszkodzenia kręgosłupa obejmują trudności w poruszaniu się, zaburzenia czucia, nietrzymanie moczu i problemy z nauką. Deficyty uwagi u osób z MM zostały zidentyfikowane poprzez ocenę zespołu nadpobudliwości psychoruchowej z deficytem uwagi (ADHD). Dzieci z MM częściej niż dzieci z grupy kontrolnej wykazują klinicznie istotne podwyższenie w ocenie ADHD (31% w MM vs. 7% w populacji ogólnej). Warto zauważyć, że 74,5% osób z MM z istotnym wzrostem w ocenach ADHD były zgodne z dominującym nieuważnym podtypem ADHD . Niezależne badanie przeprowadzone przez Ammerman et al. wykazało podobne wyniki. Kwas foliowy jest witaminą B ważną w odniesieniu do MM, jak również. Badania pokazują, że suplementacja kwasem foliowym zmniejsza zarówno występowanie, jak i nawroty wad cewy nerwowej o 72% w siedmiu krajach. Dane takie jak te doprowadziły do zaleceń zdrowia publicznego dotyczących suplementacji folianami w okresie okołoporodowym, a w 1998 roku do wzbogacenia kwasem foliowym wszystkich produktów zbożowych w Stanach Zjednoczonych. Kwas foliowy ma kluczowe znaczenie dla procesów komórkowych, w tym syntezy nukleotydów i metylacji. Enzym, 5, 10-metylenotetrahy- drofolate reduktaza (MTHFR) funkcjonuje w ścieżce, która przekształca folian w metabolity, które mogą być wykorzystane do procesów komórkowych, w tym metylacji wzmacniaczy promotorów genów i białek, RNA, DNA, syntezy aminokwasów i fosfolipidów (patrz rysunek 1 ). Na przykład, stymulowana dopaminą metylacja fosfolipidów (PLM) jest ważnym mechanizmem modulującym odpalanie neuronów, a upośledzona aktywność metylacji może przyczyniać się do zaburzeń uwagi. Komórki neuroblastoma (SH-SY5Y), którym podawano 5-formylTHF, powodowały zwiększoną metylację receptora dopaminowego D4 (DRD4) za pomocą metylotransferazy białkowej i S-adenozylo-metioniny, co skutkowało zależnym od dawki zwiększeniem zarówno podstawowej, jak i stymulowanej dopaminą PLM. DRD4 jest jednym z najczęściej replikowanych genów powiązanych z ADHD. Warianty genetyczne w MTHFR były związane z MM. Dwa najczęstsze badane warianty to C677T (rs1801133) i A1298C (rs1801131). Obecność któregokolwiek z tych wariantów w stanie homozygotycznym zwiększa prawdopodobieństwo zachorowania na SB do 1,5 do 2,4 razy w porównaniu z populacją ogólną, chociaż dane dla 1298C są sprzeczne. Kilka badań łączy poziom folianów/homocysteiny z funkcjami poznawczymi. Na przykład, pacjenci z niedoborem folianów w ośrodkowym układzie nerwowym wykazują deficyty poznawcze. Morris i wsp. wykazali, że w stosunku do kontroli, osoby z niskim poziomem folianów miały znacznie obniżoną funkcję pamięci. Inne badania wykazują podobne wyniki; to znaczy, że funkcje poznawcze poprawiają się wraz z wyższym poziomem folianów, a zmniejszają się wraz z wyższym poziomem homocysteiny. MTHFR jest kluczowym regulatorem poziomu folianów w stosunku do homocysteiny. W tym badaniu sprawdziliśmy, czy genetyczna zmienność enzymu metabolizmu folianów MTHFR była związana z manifestacją fenotypu behawioralnego ADHD u dzieci z MM. Uczestnicy tego badania stanowili rozszerzoną populację w stosunku do tej użytej w badaniu Burmeister i wsp. Próbka genotypowana dla SNPs w genie MTHFR składała się z 262 osób z MM. Pięćdziesiąt procent z tych osób było rasy białej, a 50% latynoskiej. Próba składała się z 53% kobiet i 47% mężczyzn, a mediana wieku wynosiła 12,4 roku. Skale oceny rodziców dla ADHD zostały również wypełnione na dodatkowych pacjentów, dla których DNA nie było dostępne. Pacjenci ci zostali wykorzystani do porównania częstości pozytywnych wyników testów ADHD u osób z MM w porównaniu z pozytywnymi testami ADHD u osób z grupy kontrolnej. Dla tego porównania, wielkości grup były następujące: próba MM składała się z 478 pacjentów, a próba kontrolna składała się z 196 osób kontrolnych nie dotkniętych MM. Pochodzenie etniczne osób z MM i osób z grupy kontrolnej bez MM przedstawiono w tabeli 1. Obie próby składały się w około 50% z mężczyzn i 50% z kobiet, z medianą wieku 13,06 lat w grupie pacjentów z MM i medianą wieku 12,73 lat w grupie kontrolnej. Eksperymenty te zostały podjęte za zgodą i pisemnym przyzwoleniem każdego uczestnika, zgodnie z Kodeksem Etycznym Światowego Stowarzyszenia Medycznego. Badanie zostało zatwierdzone przez Institutional Review Board Uniwersytetu Texas Health Science Center w Houston pod numerem HSC-MS- 00-0001 oraz przez The Hospital for Sick Children Research Ethics Board pod numerem 1000006149. Rodzice każdego uczestnika wypełnili skalę Swanson Nolan Achenbach Pelham-IV (SNAP-IV; www.adhd.net) w celu oceny stanu ADHD. Skala SNAP-IV składa się z 18 pozycji, 9 reprezentujących zachowania związane z nieuwagą i 9 z nadruchliwością-impulsywnością. Została ona zaprojektowana tak, aby była zgodna z kryteriami zawartymi w Diagnostic and Statistical Manual-IV (DSM-IV), powszechnie uznawanym za złoty standard w diagnozowaniu ADHD. Rodzice oceniali zachowanie swoich dzieci na czteropunktowej skali, od zera (wcale) do trzech (bardzo), jak opisano wcześniej. Uczestnicy, którzy spełnili klinicznie zdefiniowane wartości graniczne reprezentujące górne 5% populacji w skali nieuwagi, zostali oznaczeni jako ”ADHD – typ przeważająco nieuważny”; ci z podwyższeniem w górnych 5% tylko w skali nadpobudliwości-impulsywności reprezentowali ”typ nadpobudliwy-impulsywny”. Podwyższenia na obu skalach reprezentowały „typ mieszany ADHD”. SNAP-IV jest wiarygodną, opartą na rodzicach oceną zachowania ADHD z dobrą zgodnością z ustrukturyzowanymi wywiadami, szeroko stosowaną do oceny ADHD w badaniach klinicznych i licznych badaniach naukowych w USA i na świecie. Selekcja SNP, genotypowanie i analiza statystyczna zostały przeprowadzone zgodnie z wcześniejszym opisem. W skrócie, SNP zostały wybrane w obrębie referencyjnego genu MTHFR (NM_005957) z bazy danych University of California Santa Cruz (UCSC) Genome Browser dbSNP Build132, jak również z publicznego wydania HapMap3 # 27. SNPs zostały uszeregowane do genotypowania w oparciu o potencjalną funkcję (np. Jeśli wariant zmienia aminokwas), lokalizację genu i mniejszą częstotliwość alleli większą niż 0,05. W sumie wybrano 7 SNP w genie MTHFR (patrz Rycina 2 dla przybliżonej lokalizacji): rs3737965, rs2066470, rs9651118, rs1801133 (znany również jako 677C . T), rs1801131 (znany również jako 1298A . C, rs2274976, i rs4846049. DNA zostało pobrane od pacjentów z MM do analizy. Genotypowanie przeprowadzono przy użyciu …
.