Endotoxina bacteriană Gram negativă este un pirogen biologic care provoacă febră atunci când este introdusă intravenos. Endotoxina, cunoscută și sub denumirea de lipopolizaharidă (LPS), se găsește în membrana externă a bacteriilor Gram negative. În timpul sepsisului Gram-negativ, endotoxina stimulează macrofagele gazdei să elibereze citokine inflamatorii. Cu toate acestea, inflamația excesivă cauzează insuficiența multiplă a organelor și moartea. Endotoxinele, care sunt molecule patogene omniprezente, sunt o pacoste pentru industria farmaceutică și pentru comunitatea medicală. Astfel, detectarea precoce și sensibilă a endotoxinei este crucială pentru a preveni endotoxemia. Lisatul de amebocite limulus (LAL) a fost utilizat pe scară largă timp de aproximativ 30 de ani pentru detectarea endotoxinei în asigurarea calității medicamentelor injectabile și a dispozitivelor medicale. LAL constituie o cascadă de serin-proteaze care sunt declanșate de urme de endotoxină, culminând cu un cheag de gel la sfârșitul reacției. Factorul C, care există în mod normal sub formă de zimogen, este amorsă a acestei cascade de coagulare. In vivo, factorul C este biosenzorul perfect, care alertează crabul potcoavă de prezența unui invadator Gram-negativ. Punctul final hemostatic prinde invadatorul, ucigându-l și limitând infecția ulterioară. Cu toate acestea, ca instrument de detectare in vitro a endotoxinei, variațiile în ceea ce privește sensibilitatea și specificitatea LAL la endotoxină, precum și aprovizionarea din ce în ce mai redusă cu crabi cu potcoavă reprezintă provocări din ce în ce mai mari pentru industria biotehnologiei. Acest lucru a necesitat inovarea unui test alternativ pentru depistarea endotoxinei. Astfel, factorul C a devenit ținta evidentă, deși complicată, a efortului tehnologic de recombinare. Acest capitol documentează de la retroexploatarea lizatului sanguin natural al speciei pe cale de dispariție până la efortul monumental al ingineriei genetice, pentru a produce Factorul C recombinant (rFC). RFC este o moleculă de 132 kDa, care a fost produsă ca proenzimă inductibilă prin prezența unor cantități infime de endotoxină. RFC constituie baza kitului „PyroGene”, care este un nou test microenzimatic de diagnosticare a endotoxinei pentru depistarea endotoxinei cu randament ridicat. Folosind rFC, Lonza Inc. a creat „PyroSense”, care servește ca punct de control al liniei de producție biotehnologică. Astfel, de la clonare până la aplicații comerciale, rFC a inițiat o nouă eră în testarea endotoxinei pentru asigurarea calității produselor biomedicale și pentru industria medicală, protejând în același timp crabii cu potcoavă pe cale de dispariție.
Localizador
Blog Network
