Context
Vitamina B12 este descriptorul generic pentru acei compuși corrinoizi care prezintă calitativ activitatea biologică a cianocobalaminei. Principalele cobalamine cu acțiune fiziologică sunt hidroxicobalamina, metilcobalamina și deoxiadenozilcobalamina. Vitamina B12 este necesară pentru sinteza acizilor grași din mielină și, împreună cu folatul, pentru sinteza ADN-ului. Un aport adecvat de vitamina B12 este esențial pentru funcționarea normală a sângelui și pentru funcția neurologică. Ea poate fi stocată în ficat timp de mulți ani.
Vitamina B12 poate fi transformată în oricare dintre cele două coenzime cobalamină care sunt active la om; metilcobalamina și 5-deoxiadenozilcobalamina. Vitamina B12 este un cofactor pentru enzimele metionină-sintetază și L-metilmalonil-CoA-mutază și este implicată în conversia homocisteinei în metionină și a L-metilmalonil-coenzimei A (CoA) în succinil-CoA. În cazul deficienței de vitamina B12, folatul se poate acumula în ser ca urmare a încetinirii metiltransferazei dependente de vitamina B12.
Chiar dacă există unele surse vegetale de vitamina B12, cum ar fi anumite alge și plante expuse la acțiunea bacteriilor sau contaminate de sol sau insecte, oamenii își obțin aproape toată vitamina B12 din alimente de origine animală. Aproximativ 25% din vitamina B12 provine din cărnurile roșii (Baghurst et al. 2000). Pentru adulți și copii, aproximativ 30% și, respectiv, 50% provin din lapte și produse lactate (Cobiac et al 1999).
Absorbția vitaminei B12 este acum cunoscută ca fiind mai complexă decât se credea cândva. În alimente, metil-, deoxiadenozil-, sau hidroxocobalamina sunt legate de enzimele din carne și alte alimente de origine animală. Cobalamina este eliberată prin acțiunea acidului și a pepsinei care digeră proteina de legare în stomacul (normal). Cobalamina eliberată formează un complex stabil cu liantul R, o glicoproteină secretată în salivă sau de către stomac. Între timp, factorul intrinsec (IF), o glicoproteină de 50 kDa care leagă cobalamina, este secretat după masă de către celulele parietale ale stomacului. Cu toate acestea, legarea cobalaminei de FI nu are loc în stomac, așa cum s-a crezut cândva, deoarece afinitatea sa este foarte scăzută la pH-ul acid.
Ligatorii FI sunt parțial degradați în duodenum de proteazele pancreatice. Cobalamina se leagă apoi de FI cu afinitate mare în mediul mai alcalin. Spre deosebire de lianții R, IF nu este digerat de enzimele pancreatice. Vitamina B12 din canalul biliar se poate combina, de asemenea, cu IF, formând un ciclu enterohepatic. Complexul vitamina B12-IF trece apoi neschimbat în josul intestinului subțire și este absorbit în ileonul terminal prin endocitoză după atașarea la un receptor membranar specific IF de 460 kDa. Receptorul leagă numai vitamina B12 care este atașată la IF și nu leagă analogi ai vitaminei B12.
Absorbția vitaminei B12 crește odată cu creșterea aportului (Adams et al 1971, Chanarin 1979). Este absorbită la rate variabile din diferite alimente, variind de la 11% din ficat, 24-40% din ouă și păstrăv, până la peste 60% din carne de oaie și pui (Doscherholmen et al 1975, 1978, 1981, Heyssel et al 1966). Rata scăzută de absorbție din ficat este probabil legată de conținutul foarte ridicat de B12 din ficat. Nu au fost raportate studii privind carnea roșie, carnea de porc sau alimentele lactate sau peștele, cu excepția păstrăvului, astfel încât, la elaborarea necesarului de aport, s-a presupus o ajustare prudentă pentru biodisponibilitatea de 50% pentru adulții sănătoși cu o funcție gastrică normală. Dacă oamenii ar consuma cantități mari de alimente bogate în mod natural în vitamina B12, rata de absorbție ar fi mai mică.
Vitamina B12 adăugată în alimente (de exemplu, băuturi, analogi de carne sau lapte de soia) sub formă cristalină are o rată de absorbție similară dacă este adăugată în cantități mici (<5 µg pe doză), dar o absorbție foarte scăzută (1% sau mai puțin) dacă este adăugată la 500 µg pe doză sau mai mult (Berlin et al 1968, Heyssel et al 1996). Excreția vitaminei B12 se face în general prin fecale și este proporțională cu rezervele corporale (Adams 1970, Heinrich 1964, Mollin & Ross 1952). Alte pierderi au loc prin piele și prin reacții metabolice.
Cerințele pentru vitamina B12 pot fi afectate de vârstă, deși nu toate studiile confirmă acest lucru. (van Asselt et al 1996). Efectul vârstei poate acționa prin influența creșterii nivelului de gastrită atrofică (Krasinski et al1986) sau a reducerii acidității gastrice (Scarlett et al 1992). Ratele de gastrită atrofică la vârstnici, care variază între 10-30%, au fost raportate în Australia (Andrews et al 1967), SUA (Hurwitz et al 1997, Krasinski et al 1986) și Scandinavia (Johnsen et al 1991).
Utilizarea insuficientă a vitaminei B12 poate apărea la cei cu defecte genetice, inclusiv deleții sau defecte în MMA-CoA-mutaza, transcobalamina II sau enzimele din calea de adenozilare a cobalaminei.
Deficiența de vitamina B12 poate produce simptome hematologice, neurologice sau intestinale. Efectele hematologice nu pot fi deosebite de cele ale deficienței de folat. Acestea includ o serie de efecte asociate în general cu anemia, cum ar fi paloarea pielii, scăderea energiei și a toleranței la efort, oboseală, dificultăți de respirație și palpitații. Problema subiacentă este interferența cu sinteza ADN, ceea ce duce la producerea de eritrocite anormal de mari.
Complicațiile neurologice sunt prezente la aproximativ 75-90% dintre persoanele cu deficiență francă. Aceste complicații par să fie invers legate de apariția simptomelor hematologice (Healton et al. 1991, Savage et al. 1994). Ele includ tulburări senzoriale la nivelul extremităților, tulburări motorii și modificări cognitive, de la pierderi de memorie la demență, cu sau fără modificări ale dispoziției. Pot exista, de asemenea, tulburări vizuale, impotență și tulburări de control al intestinului și al vezicii urinare. Un studiu realizat de Louwman et al. (2000) a indicat că deficitul de cobalamină în absența semnelor hematologice poate afecta, de asemenea, funcția cognitivă în adolescență.
Indicatorii care sunt disponibili pentru estimarea necesarului de vitamina B12 includ răspunsul hematologic, precum și măsurători ale vitaminei B12 serice sau plasmatice, MMA, homocisteinei, acidului formiminoglutamic, propionatului și metilcitratului și holo-transcobalaminei II.
Răspunsurile hematologice care au fost evaluate includ creșteri ale hemoglobinei, hematocritului și numărului de eritrocite sau scăderi ale MCV sau o creștere optimă a numărului de reticulocite. Dintre acestea, MCV are o utilizare limitată din cauza celor 120 de zile necesare pentru a observa o schimbare și, în timp ce eritrocitele, hemoglobina și hematocritul sunt robuste, acestea se modifică lent Cu toate acestea, numărul de reticulocite este util deoarece creșterile ca răspuns la dietă sunt evidente în 48 de ore și ating un vârf în 5-8 zile.
Vitamina B12 serică sau plasmatică reflectă atât aportul, cât și depozitele, dar nivelurile acceptabile pot fi menținute pentru o anumită perioadă de timp după apariția deficienței datorită eliberării compensatorii de vitamina B12 din țesuturi. Nivelurile scăzute ar reprezenta, totuși, o deficiență pe termen lung sau un aport scăzut cronic. MMA prezintă un interval de patru ori mai mare în populația normală, dar crește atunci când aportul de vitamina B12 este scăzut sau când absorbția este afectată (Joosten et al. 1996). Nivelurile ridicate de MMA pot fi reduse prin administrarea de vitamina B12 (Joosten et al 1993, Naurath et al 1995, Norman & Morrison 1993, Pennypacker et al 1992).
Deoarece prezența unui nivel ridicat de MMA reprezintă o modificare specifică vitaminei B12, MMA este indicatorul preferat al statusului de vitamina B12. Cu toate acestea, nu există suficiente date disponibile pentru a utiliza nivelurile de MMA pentru a stabili recomandări dietetice. Concentrația de homocisteină se modifică ca răspuns la statusul de vitamina B12, dar nu este specifică vitaminei B12, răspunzând, de asemenea, la statusul de folat sau de vitamina B6 sau la ambele, iar acidul formiminoglutamic se modifică, de asemenea, odată cu statusul de folat. Atât propionatul, cât și metilcitratul răspund la modificări ale statusului vitaminei B12 (Allen et al. 1993), însă nu oferă niciun avantaj față de MMA. Măsurătorile holotranscobalaminei II sunt insuficient de robuste pentru a permite evaluarea necesarului.
Recomandări în funcție de stadiul de viață și de sex
Copii
| Vârsta | AI |
|---|---|
| 0-6luni | 0.4 µg/zi |
| 7-12 luni | 0,5 µg/zi |
Raționament: IA pentru 0-6 luni se bazează pe aportul de vitamina B12 al sugarilor hrăniți cu lapte matern. IA a fost calculat prin înmulțirea aportului mediu de lapte matern (0,78 L/zi) cu concentrația medie de vitamina B12 din laptele matern și prin rotunjire (FNB:IOM 1998). Valorile raportate ale concentrației din laptele matern variază foarte mult, în parte din cauza diferențelor dintre metodele analitice și în parte din cauza variației statutului de vitamina B12 al mamei și a aportului actual. Valorile mediane sunt substanțial mai mici decât valorile medii. Într-un studiu efectuat pe 9 mame braziliene bine hrănite, ale căror copii au fost hrăniți exclusiv la sân, concentrația medie în laptele matern a fost de 0,42 µg/L la 2 luni și de 0,34 µg/L la 3 luni. (Trugo & Sardinha 1994). Valoarea la 2 luni a fost aleasă pentru a asigura un aport adecvat și a fost înmulțită cu volumul zilnic de lapte (0,42 µg/L x 0,78 L/zi = 0,33 µg/zi) și rotunjită pentru a obține IA de 0,4 µg. Deoarece există puține date privind conținutul de vitamina B12 din dietele de înțărcare, IA pentru 7-12 luni a fost estimat prin extrapolare de la IA pentru 0-6 luni. Acest lucru a fost verificat încrucișat prin extrapolarea de la EAR pentru adulți și ajustarea pentru variația așteptată pentru a estima un aport recomandat. Prima estimare a dat o valoare de 0,5 µg/zi după rotunjire, iar cea de-a doua, de 0,6 µg/zi. IA a fost stabilit la 0,5 µg/zi.
Nota: Pentru a asigura un status adecvat de vitamina B12 la copiii lor și pentru a preveni rezultate grave, inclusiv tulburări cognitive sau chiar comă la sugar, mamele vegane ar trebui să își suplimenteze dieta cu vitamina B12 la nivelul IDR pe toată durata sarcinii și a alăptării, pe baza dovezilor conform cărora rezervele la sugarii mamelor vegane la naștere sunt scăzute, iar laptele poate furniza doar cantități foarte mici (Specker et al 1990). Formula de soia utilizată în timpul înțărcării trebuie să fie îmbogățită cu vitamina B12 la un nivel echivalent. Dacă mama nu este suplimentată în timpul sarcinii și alăptării, iar copilul este hrănit la sân, atunci sugarul va avea nevoie de suplimente încă de la naștere.
Copii & adolescenți
| Vârsta | EAR | RDI | |
|---|---|---|---|
| Toate | |||
| 1-3 ani | 0.7 µg/zi | 0,9 µg/zi | |
| 4-8 ani | 1,0 µg/zi | 1.2 µg/zi | |
| Băieți | |||
| 9-13 ani | 1,5 µg/zi | 1,5 µg/zi | 1.8 µg/zi |
| 14-18 ani | 2,0 µg/zi | 2,4 µg/zi | |
| Fete | |||
| 9-13 ani | 1.5 µg/zi | 1,8 µg/zi | |
| 14-18 ani | 2,0 µg/zi | 2.4 µg/zi | |
Motivație: Există puține date despre copii sau adolescenți pe care să se bazeze EAR, astfel încât EAR a fost stabilit prin extrapolare din datele pentru adulți, ajustând pentru greutatea corporală și cu referire la nevoile de creștere, și rotunjind în sus (FNB:IOM 1998). În absența informațiilor privind abaterea standard a necesarului, DZR a fost stabilită presupunând un CV de 10% pentru EAR. Rețineți că copiii vegani vor avea nevoie de suplimente.
Adulți
| Vârsta | EAR | RDI | |
|---|---|---|---|
| Bărbați | |||
| 19-30 ani | 2,0 µg/zi | 2.4 µg/zi | |
| 31-50 de ani | 2,0 µg/zi | 2,4 µg/zi | |
| 51-70 de ani | 2.0 µg/zi | 2,4 µg/zi | |
| >70 ani | 2,0 µg/zi | 2,0 µg/zi | 2.4 µg/zi |
| Femeie | |||
| 19-30 ani | 2,0 µg/zi | 2,0 µg/zi | 2.4 µg/zi |
| 31-50 de ani | 2,0 µg/zi | 2,4 µg/zi | |
| 51-70 de ani | 2.0 µg/zi | 2,4 µg/zi | |
| >70 ani | 2,0 µg/zi | 2,0 µg/zi | 2.4 µg/zi |
Motivație: EAR pentru adulți a fost stabilit pe baza dovezilor hematologice și a nivelurilor serice de vitamina B12 (FNB:IOM 1998). Nu au fost disponibile date suficiente pentru a discerne diferențele în ceea ce privește cerințele pentru bărbați și femei. În absența informațiilor privind abaterea standard a necesarului, DZR a fost stabilită presupunând un CV de 10% pentru EAR. Rețineți că veganii stricți vor avea nevoie de suplimentarea cu vitamina B12.
Nota: Vitamina B12 naturală din alimente poate fi mai puțin biodisponibilă pentru numărul substanțial de adulți în vârstă care au gastrită atrofică cu secreție scăzută de acid gastric. Persoanele cu această afecțiune pot necesita un aport mai mare de alimente bogate în vitamina B12, alimente îmbogățite cu vitamina B12 sau suplimente.
Pregătire
| Vârsta | EAR | RDI |
|---|---|---|
| 14-18 ani | 2,2 µg/zi | 2.6 µg/zi |
| 19-30 ani | 2,2 µg/zi | 2,6 µg/zi |
| 31-50 ani | 2,2 µg/zi | 2.6 µg/zi |
Raționament: RAE a fost stabilit pe baza RAE maternă plus o alocație pentru nevoile fetale și placentare. Acumularea fetală este în medie de 0,1-0,2 µg/zi (Baker et al 1962, Loria et al 1977, Vaz Pinto et al 1975), dar acumularea placentară este de numai 14 ng/L (Muir & Landon 1985). Prin urmare, s-a adăugat o cantitate suplimentară de 0,2 µg/zi la necesarul matern și apoi s-a derivat DZR, presupunând un CV de 10% pentru RAE. Mamele vegane vor avea nevoie de suplimente pe tot parcursul sarcinii și în timpul alăptării, în cantități suficiente pentru a asigura un aport adecvat pentru ele însele și pentru copilul lor.
Alăptare
| Vârsta | EAR | RDI |
|---|---|---|
| 14-18 ani | 2,4 µg/zi | 2.8 µg/zi |
| 19-30 de ani | 2,4 µg/zi | 2,8 µg/zi |
| 31-50 de ani | 2,4 µg/zi | 2.8 µg/zi |
Motivație: RAE pentru lactație a fost stabilită prin adăugarea cantității medii secretate în lapte (0,33 µg/zi) la RAE maternă și rotunjirea în sus. RDI a fost stabilită presupunând un CV de 10% pentru EAR. Mamele vegane vor avea nevoie de suplimente în timpul alăptării în cantități suficiente pentru a asigura un aport adecvat pentru ele și pentru copilul lor.
Nivelul superior de aport
Nu există date suficiente pentru a permite stabilirea unui UL.
Nu există dovezi că nivelurile actuale de aport din alimente și suplimente reprezintă un risc pentru sănătate. Nu au fost asociate efecte adverse cu un aport excesiv de vitamina B12 din alimente sau suplimente la persoanele sănătoase. Există dovezi slabe din studiile pe animale care arată că vitamina B12 poate potența efectele substanțelor chimice cancerigene (Day et al. 1950, Georgadze 1960, Kalnev et al. 1977, Ostryanina 1971), dar alte studii contrazic acest lucru (Rogers 1975). Lipsa aparentă de toxicitate ar putea fi legată de capacitatea organismului de a diminua absorbția ca răspuns la aporturi mari. Deoarece nu există date privind răspunsul la doză, nu se poate stabili un UL.
Adams JF, Ross SK, Mervyn RL, Boddy K, King P. Absorbția cianocobalaminei, a coenzimei B12, a metilcobalaminei și a hidroxocobalaminei la diferite niveluri de doză. Scand J Gastroenterol 1971;6:249-52.
Adams JF. Corelația dintre vitamina B12 serică și urinară. Br Med J 1970;1:138-9.
Allen RH, Stabler SP, Lindenbaum J. Nivelurile serice de betaină, N,N-dimetilglicină și N-metilglicină la pacienții cu deficiență de cobalamină și folat și erori înnăscute de metabolism asociate. Metabolism1993;42:1448-60.
Andrews GR, Haneman B, Arnold BJ, Booth JC, Taylor K. Gastrita atrofică la persoanele în vârstă. Australas Ann Med 1967;16:230-5.
Baghurst KI, Record SJ, Leppard P. Consumul de carne roșie în Australia: aporturi, compoziția nutrienților și modificări în timp. Aust J Nutr Diet 2000;57(4) Suppl:S1-S36.
Baker SJ, Jacob E, Rajan KT, Swaminathan SP. Deficiența de vitamina B12 în sarcină și puerperiu Br J Med 1962;1:1658-61.
Berlin H, Berlin R, Brante G. Tratamentul oral al anemiilor pernicioase cu doze mari de vitamina B12 fără factor intrinsec Acta Med Scand 1968;184:247-58.
Chanarin I. The megaloblastic anaemias, 2nd ed. (Anemiile megaloblastice, ed. a 2-a). Oxford: Blackwell Scientific, 1979.
Cobiac L, Syrette J, Record S. Alimentele lactate în dieta australiană – rezultate din sondajul național de nutriție 1995/6. Un raport pentru Australian Dairy Corporation, Adelaide: CSIRO, 1999.
Day PL, Payne LD, Dinning JS. Efectul procarcinogen al vitaminei B12 asupra șobolanilor hrăniți cu p-dimetilaminoazobenzen. Proc Soc Exp Exp Biol Med 1950;74:854-7.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Absorbția vitaminei B12 din ouă. Proc Soc Exp Exp Biol Med 1975,149:987-90.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Absorbția vitaminei B12 din carnea de pui. Am J Clin Nutr 1978;31:825-30.
Doscherholmen A, McMahon J, Ripley D. Absorbția vitaminei B12 din pește. Proc Soc Exp Exp Biol Med 1981;167:480-4.
Food and Nutrition Board: Institutul de Medicină. Tiamina, riboflavina, niacina, vitamina B6, acidul folic, vitamina B12, acidul pantotenic, biotina și colina. Washington DC: National Academy Press, 1998.
Georgadze GE. Efectul vitaminei B1 și B12 asupra inducerii creșterii maligne la hamsteri. Vopr Onkol 1960;6:54-8.
Healton EB, Savage DG, Brust JC, Garrett TJ, Lindenbaum J. Aspecte neurologice ale deficienței de cobalamină. Medicine (Baltimore)1991;70:229-45.
Heinrich HC. Bazele metabolice ale diagnosticului și terapiei deficitului de vitamina B12 Semin Hematol 1964;1:199-249.
Heyssel RM, Bozian RC, Darby WJ, Bell MC. Cifra de afaceri a vitaminei B12 la om. Asimilarea vitaminei B12 din alimentele naturale de către om și estimări ale necesarului minim zilnic. Am J Clin Nutr 1966;18:176-84.
Hurwitz A, Brady DA, Schaal SE, Samloff IM, Dedon J, Ruhl CE. Aciditatea gastrică la adulții în vârstă. JAMA 1997;278:659-62.
Johnsen R, Berensen B, Staume B, Forde OH, Bostad L, Burhol PG. Prevalențele constatărilor endoscopice și histologice la subiecții cu și fără dispepsie Br Med J 1991;302:749-52.
Joosten E, Lesaffre E, Reizler R. Sunt necesare intervale de referință diferite pentru acidul metilmalonic și homocisteina totală la persoanele în vârstă? Eur J Haematol 1996;57:222-6.
Joosten E, Pelemans W, Devos P, Lesaffre E, Goosens W, Criel A, Verhaeghe R. Absorbția cobalaminei și homocisteina și acidul metilmalonic seric la subiecții vârstnici cu un nivel scăzut de cobalamină serică. Eur J Haematol 1993;51:25-30.
Kalnev VR, Rachkus I, Kanopkaite SI. Influența metilcobalaminei și a cianocobalaminei asupra procesului neoplazic la șobolani. Pzrikl Biochim Mikrobiol 1977;13:677.
Krasinski SD, Russel RM, Samloff IM, Jacob RA, Dallal GE, McGandy RB, Hatz SC. Gastrita atrofică fundică la o populație vârstnică: Efectul asupra hemoglobinei și a mai multor indicatori nutriționali serici. J Am Geriatr Soc 1986;34:800-6.
Loria A, Vaz-Pinto A, Arroyo P, Ramirez-Mateos C, Sanchez-Medal L. Anemia nutrițională. 6. Stocarea hepatică fetală a metaboliților în a doua jumătate a sarcinii. J Pediatr 1977;9:569-73.
Louwman MW, van Dusseldorp M, van de Vijver FJ, Thomas CM, Schneede J, Ueland PM, Refsum H, van Staveren WA. Semne de afectare a funcției cognitive la adolescenții cu status marginal de cobalamină. Am J Clin Nutr 2000;72:762-9.
Mollin DI, Ross GI. Concentrațiile de vitamina B12 din serul și urina persoanelor normale și a pacienților cu anemii megaloblastice și alte boli. J Clin Pathol 1952;5:129-39.
Muir M, Landon M. Originea endogenă a cobalaminelor microbiologic inactive (analogi ai cobalaminei) la fătul uman. Br J Haematol 1985;61:303-6.
Naurath HJ, Josten E, Riezler R, Stabler SP, Allen RH, Lindenbaum J. Efectele suplimentelor de vitamina B12, folat și vitamina B6 la persoanele în vârstă cu concentrații serice normale de vitamine. Lancet 1995:346:85-9.
Norman EJ, Morrison JA. Screeningul populațiilor vârstnice pentru deficiența de cobalamină(vitamina B12) folosind testul acidului metilmalonic urinar prin spectrometrie de masă prin cromatografie în fază gazoasă. Am J Med 1993;94:589-94.
Ostryanina AD. Efectul vitaminei B12 asupra inducerii de tumori în pielea de șoarece. Patol Fiziol Eksperoim Terapiya 1971;15:48-53.
Pennypacker LC, Allen RH, Kelly JP, Matthews LM, Grigsby L, Kaye K, Lindenbaum J, Stabler SP. Prevalența ridicată a deficitului de cobalamină la pacienții ambulatoriali vârstnici. J Am Geriatr Soc 1992;40:1197-204.
Rogers AE. Efectele variabile ale unei diete cu deficit de lipoproteine și cu conținut ridicat de grăsimi asupra substanțelor chimice cancerigene la șobolani. Cancer Res 1975;35:2469-74.
Savage D, Gangaidzo I, Lindenbaum J. Deficiența de vitamina B12 este cauza principală a anemiei megablastice în Zimbabwe. Br J Haematol 1994:86:844-50.
Scarlett JD, Read H, O’Dea K. Absorbția cobalaminei legate de proteine scade la vârstnici Am J Hematol 1992;39:79-83.
Specker BL, Black A, Allen L, Morrow F. Concentrațiile scăzute din lapte sunt legate de concentrațiile serice scăzute la femeile vegetariene și de aciduria metilmalonică la copiii lor. Am J Clin Nutr 1990;52:1073-6.
Trugo NM, Sardinha F. Cobalamina și capacitatea de legare a cobalaminei în laptele uman. Nutr Res 1994;14:22-33.
Van Asselt DZ, van den Broek WJ, Lamers CB, Corstens FH, Hoefnagels WH. Absorbția cobalaminei libere și legate de proteine la subiecți sănătoși de vârstă mijlocie și mai în vârstă. J Am Geriat Soc 1996;44:949-53.
Vaz Pinto A, Torras V, Dsandoval JF, Dillman E, Mateos CR, Cordova MS. Determinarea acidului folic și a vitaminei B12 în ficatul fetal. Am J Clin Nutr 1975;28:1085-6.
.