[Evolution of IGRA researches]

Framstegen med genomisk analys av mykobakterier, inklusive M. tuberculosis (Mtb), gjorde det möjligt för oss att hitta Mtb-specifika antigener, ESAT-6 och CFP-10, som inducerar starkt interferon-gamma (IFN-gamma) från sensitiserade T-celler. Kort efter upptäckten av dessa antigener utvecklades diagnostiska tester för tuberkulos (TB)-infektion med hjälp av dessa antigener. Eftersom ESAT-6 och CFP-10 saknas i alla BCG-substammar och i de flesta icke-tuberkulösa mykobakterier, förväxlas dessa diagnostiska tester inte med BCG-vaccination och infektion av de flesta icke-tuberkulösa mykobakterier. Dessa diagnostiska test kallas Interferon-Gamma Release Assays (IGRA) och för närvarande finns det två kommersiellt tillgängliga test. Ett av dem, QuantiFERON-TB Gold (det kallas QuantiFERON TB-2G i Japan, QFT-2G) baserat på ELISA-metoden har godkänts i Japan, och det andra är T-SPOT. TB som är baserad på ELISPOT-metoden och som ännu inte har godkänts i Japan. Som i allmänhet är T-SPOT. TB har visat sig vara känsligare än QFT-2G, har godkännandet av T-SPOT. TB i Japan förväntas godkännas. Det finns dock många frågor som måste lösas när det gäller IGRA-tester, eftersom vi precis har börjat använda dessa tester. Ett dokument som integrerade dessa frågor publicerades förra året, och det skulle vara till hjälp. I detta minisymposium rapporterade dr Peter Andersen om framstegen i utvecklingen av diagnostiska tester för tuberkulosinfektion, möjligheten att skilja mellan aktiv tuberkulos och latent tuberkulosinfektion (LTBI), vilket de nuvarande IGRA:erna inte gör, och den prognostiska användningen av IGRA:erna (det japanska innehållet rapporterades av ordförandena). Dr Ariga rapporterade om tillämpningen av QFT-2G för andra prover än blod. Han rapporterade också intressanta uppgifter om vilka T-celler som reagerade i QFT-2G. Dr Higuchi rapporterade utförligt uppgifter om flera frågor i QFT-2G-testet. För närvarande ökar användningen av IGRAs snabbt. Under denna omständighet skulle det vara mycket viktigt att förstå egenskaperna hos IGRAs på ett korrekt sätt. Vi hoppas att detta minisymposium kan bidra till att förstå dessa frågor. 1. Interferon-Gamma Release Assays (IGRA) och antigener för upptäckt av latent infektion och förutsägelse av sjukdom: Peter ANDERSEN (Department of Infectious Disease Immunology and the SSI Centre for Vaccine Research, Statens Serum Institut, Danmark) En av de viktigaste utmaningarna i den globala tuberkulosbekämpningen är diagnostik och behandling av latent tuberkulosinfektion. Den för närvarande använda metoden för att upptäcka latent tuberkulosinfektion, tuberkulintestet, har låg specificitet. Identifiering av antigener som är specifika för Mycobacterium tuberculosis och som kan ersätta renade proteinderivat har därför varit en viktig internationell forskningsprioritet. Vi har gjort en rigorös bedömning av den diagnostiska potentialen hos antigener som saknas från M. bovis bacille Calmette-Guérin-vaccinstammarna, liksom från de flesta icke tuberkulösa mykobakterier. Vi har identifierat tre antigener med stor diagnostisk potential: ESAT-6, CFP-10 och TB 7.7. Dessa antigener används för närvarande i IGRA-tester, t.ex. QuantiFERON, som mäter produktionen av interferon-gamma från sensibiliserade T-lymfocyter och därmed signalerar pågående infektion. I EU, USA och Japan, där dessa tester har kommit ut på marknaden, har värdet av denna metod för kontaktspårning snabbt blivit uppenbart. Jag kommer att föreslå att sådana tester kan modifieras för att identifiera de individer bland de latent smittade som löper störst risk att utveckla aktiv smittsam tuberkulos. Riktad behandling av denna del av befolkningen ger möjlighet att förebygga tuberkulos innan den blir smittsam, vilket i hög grad skulle bidra till en eventuell kontroll av denna globala epidemi. 2. Immunreaktioner som är specifika för M. tuberculosis antigen – perifert blod och inflammationsställen: Haruyuki ARIGA (National Hospital Organization Tokyo National Hospital) För att utveckla en mer exakt metod för att diagnostisera aktiv tuberkulös pleurit, liksom peritonit, meningit och perikardit av tuberkulöst ursprung, etablerade vi ett antigenspecifikt test för frisättning av interferon-gamma (IFN-gamma) med hjälp av prov från hålrumsvätska. Studieobjekten var 30 patienter med bakteriologiskt bekräftad aktiv tuberkulös serosit och 49 patienter med definitiv icke tuberkulös etiologi. Odling utfördes i 18 timmar med flytande mononukleära celler i utgjutningens supernatant tillsammans med saltlösning eller Mycobacterium tuberculosis-specifika antigena peptider, tidigt sekretoriskt antigena mål 6 och kulturfiltratprotein 10. Koncentrationerna av IFN-gamma i kultursupernatanterna mättes med ELISA. Hos patienter med aktiv tuberkulös serosit var de antigenspecifika IFN-gamma-svaren i prover från hålrumsvätska betydligt högre än i prover från icke tuberkulös effusion. Arean under den mottagande karakteristiska kurvan var signifikant större för IFN-gamma-svaret i hålrumsvätska än för adenosin-deaminas i hålrumsvätska och IFN-gamma-frisättningstest i helblod. Testet för IFN-gammafrisättning i hålrumsvätska kan vara en icke-invasiv metod för att exakt och snabbt diagnostisera tuberkulös serosit hos patienter där aktiv tuberkulos i hålrumsutrymmet är kliniskt misstänkt, men för vilka inga bakteriologiska bevis kan erhållas. 3. Flera frågor i IGRAs: Kazue HIGUCHI (Research Institute of Tuberculosis, Japan Anti-Tuberculosis Association). Även om det har rekommenderats att använda QFT-2G för kontaktutredningar i de reviderade riktlinjerna för kontaktutredningar från förra året finns det flera frågor i QFT-2G. I detta minisymposium presenterades uppgifter om flera frågor i QFT-2G-testet. Dessa omfattade tillämpningen av QFT-2G på sårbara individer i immunsystemet, t.ex. spädbarn och hiv-positiva, effekterna av kemoterapi på QFT-2G-testet, prognosen för utveckling av aktiv tuberkulos med hjälp av QFT-2G, nästa generations QFT-2G, kvalitetssäkring av QFT-2G-testet och vissa problem med det nuvarande QFT-2G-testet. Det borde vara viktigt att undersöka dessa frågor och förbättra IGRA-testerna utifrån den grundläggande immunologin.