A potente actividade antioxidante do ciclo da vitamina K na peroxidação lipídica microssomal

No ciclo da vitamina K, a vitamina K-hidroquinona, o cofactor activo da gama-glutamilcarboxilase, é continuamente regenerada. As vias sucessivas contêm oxidação da hidroquinona para a epóxida, seguida de redução para a quinona e redução para a hidroquinona. A Vitamina K-hidroquinona é uma potente espécie de catador de radicais (Mukai et al., J Biol Chem 267: 22277-22281, 1992). Testamos a atividade antioxidante potencial do ciclo da vitamina K em reações de peroxidação lipídica (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, TBARS) em micrótomo hepático de ratos. Como prooxidante utilizamos Fe2+/ascorbato, NADPH-Fe3+/ATP, e NADPH/CCl4. A vitamina K (< ou = 50 microM) por si só não influenciou a formação de TBARS. Em combinação com 1 mM ditiotreitol (DTT), o co-fator redutor da enzima microssomal vitamina K epoxídica redutase, vitamina K suprimida peroxidação lipídica com uma concentração que bloqueou a resposta máxima em 50% (IC50) de cerca de 0,2 microM. A vitamina K1 (filoquinona) e a vitamina K2 (menaquinona-4) foram igualmente activas. Warfarina (5 microM) e cloro-vitamina K (50 microM), inibidores da vitamina K epoxídica redutase e gama-glutamilcarboxilase, respectivamente, foram capazes de abolir completamente o efeito antioxidante. A peroxidação lipídica foi inversamente relacionada à quantidade de vitamina K hidroquinona na reação. A vitamina K epoxídica redutase parecia sensível à peroxidação lipídica, com metade da atividade sendo perdida em 10 minutos durante a oxidação com NADPH/CCl4. A inativação poderia ser atenuada por antioxidantes como vitamina E, glutationa reduzida e menadiona e também por uma vitamina K em combinação com DTT, mas não por superóxido dismutase e catalase. Os resultados mostram que o ciclo da vitamina K poderia atuar como um potente antioxidante, que a espécie ativa com toda a probabilidade é a vitamina K-hidroquinona, e que o produto de reação primária é a semiquinona. Os resultados também mostram que o produto de reacção é processado no ciclo da vitamina K para regenerar a vitamina K-hidroquinona.