Biologia I Manual de Laboratório

Coisas que deve ser capaz de explicar a outra pessoa depois deste laboratório:

• Complexo
• Impliação total
• Binocular
• Campo de visão
• Depth of focus
• Fenómeno de inversão

Slideshow

Fundos

Muitos organismos (bactérias) e partes de organismos (células) que os biólogos estudam são muito pequenos para serem vistos com o olho humano. Usamos microscópios para ampliar os espécimes para a nossa investigação. A palavra microscópio significa “ver pequeno” e o primeiro microscópio primitivo foi criado em 1595.

Existem vários tipos de microscópios, mas você estará usando principalmente um microscópio de luz composto. Este tipo de microscópio utiliza a luz visível focada através de duas lentes, a ocular e a objetiva, para ver uma pequena amostra. Apenas as células que são suficientemente finas para a passagem da luz serão visíveis com um microscópio de luz numa imagem bidimensional.

Um outro microscópio que utilizará em laboratório é um microscópio estereoscópico ou um microscópio de dissecação. Este tipo de microscópio usa espécimes maiores e mais espessos, como um inseto, em 3D, com vista à luz visível. Como você está visualizando amostras maiores, a faixa de ampliação do microscópio de dissecção é menor que a do microscópio de luz composta.

O seu instrutor irá rever as peças e funções dos microscópios de luz composta que estaremos usando ao longo do semestre. Preencha a tabela na próxima página para ajudá-lo a lembrar-se desta informação importante. Você provavelmente voltará a esta página com freqüência. Aqui está uma imagem de um microscópio de luz para você rotular e tomar notas.

Parte de Microscópio	Função
Ocular (oculares)
Arm
>Revolver o microscópio
Etapa
Objectivos
Clipes deslizantes
> Botão de controlo de fase
Condensador
Iris diafragma
>Substage lamp (Illuminator)
Ajuste grosso
>Fino ajuste
Base

Regras e instruções de uso dos microscópios de luz composta

O seu instrutor discutirá o uso do microscópio com a sua turma. Os passos apropriados a seguir para uma focalização correcta serão revistos. Você deve seguir a sequência passo a passo como o seu instrutor indica. Mesmo que esteja familiarizado com este tipo de microscópio, espera-se que se mova através da revisão de focagem com o resto da classe.

1. Regras gerais importantes:
   1. Passe sempre o microscópio com duas mãos – coloque uma mão no braço do microscópio e a outra debaixo da base do microscópio.
   2. Não toque nas lentes objetivas (ou seja, nas pontas das objetivas).

   >

   3. Colocar as objetivas na posição de varredura e manter o nível baixo quando adicionar ou remover lâminas.
   4. Veja sempre o microscópio de lado quando estiver fazendo grandes mudanças na altura do nível.
   5. As objetivas devem ser limpas somente com papel de lente especial e líquido de limpeza de lentes.
   6. Nem jogue de mão – nenhum microscópio deve ser desmontado. Reporte avarias ao seu instrutor.
2. Para obter um microscópio do armário do laboratório:
   1. Primeira área livre na mesa para microscópio – evite uma área de trabalho lotada.
   2. Os microscópios são numerados de acordo com o local onde você está sentado. Encontre o número debaixo da sua bancada e use o microscópio correspondente.
   3. Carregue o microscópio com DUAS mãos.
   4. Segure o cabo eléctrico – não o deixe pendurado na mesa!
3. Ao devolver o microscópio ao armário do laboratório:
   1. Abaixar o palco.
   2. Rota a objectiva de digitalização para a posição sobre o palco.
   3. Retirar a lâmina do palco.
   4. Limpar a lâmina e a objectiva usando o líquido especial de limpeza de lentes e papel fornecido.
   5. Centrar o palco de modo a não se projectar demasiado para nenhum dos lados.
   6. Segurar o cabo envolvendo-o debaixo do palco do microscópio..
   7. Substitua a tampa do pó.
   8. Carregue o microscópio com DUAS mãos.
   9. Volte o microscópio para o mesmo cubículo de onde o obteve, certificando-se de o colocar de braço dado.
4. Focar o microscópio:
   Vista o microscópio de lado:
   1. Diminua o estágio até onde ele irá.
      1. Rota as objetivas para que a objetiva de varredura aponte para baixo no estágio.
      2. Ajustar o estágio para que a abertura (a abertura no meio do estágio) fique centralizada.
      3. Colocar o slide no estágio, usando o grampo do estágio para fixá-lo. O grampo do palco move-se apenas dentro do plano horizontal do palco, e fixa o slide apenas tocando o canto inferior direito do slide.
      4. Centre o espécime no slide abaixo da objetiva movendo o slide.
      5. Move o slide para cima quase até onde ele irá, tendo o cuidado de não deixar o slide tocar as lentes da objetiva – olhe de lado para que você possa ver a altura para elevar o palco.
   2. Localize através dos oculares:
      1. Utilize o botão de ajuste grosseiro para mover o estágio para baixo até que seu espécime entre em foco, e então aguce o foco.
      2. Centre o espécime no campo do microscópio movendo o estágio.
   3. Leve ao microscópio de lado:
      1. Rode ligeiramente a objectiva de baixa potência (10X) para a posição.
   4. Leve ao microscópio de lado:
      1. Aprime o foco, se necessário, com o botão de ajuste grosseiro. Normalmente só é necessária uma quantidade mínima de ajuste.
      2. Centrar a amostra no campo, se necessário.
   5. Localizar ao microscópio de lado:
      1. Rota a objectiva de alta potência no local com muito cuidado!
   6. Localizar através das oculares:
      1. Utilizar apenas o botão de ajuste fino, aguçar a focagem. Re-centre se necessário. (Se a sua amostra “desapareceu”, volte imediatamente à baixa potência e volte a centrar a amostra)
      2. Quando remover uma lâmina, volte sempre as objectivas à posição de digitalização e baixe a fase antes de levantar a lâmina!

Parte 1: Ampliação Total

Magnificação é a relação entre o tamanho da imagem com o microscópio e o tamanho real do objecto. Quando você diz que a ampliação é 10, a imagem que você vê usando o microscópio é dez vezes maior do que ver o espécime a olho nu. Lembre-se que com um microscópio de luz composta você está ampliando com duas lentes, então para calcular a ampliação total você multiplica a ampliação da objetiva pela ampliação ocular. Veja o microscópio e use a tabela abaixo para calcular a ampliação total para cada lente:

	Lente Objetiva	Lente Óptica	>Lente Óptica	= Ampliação Total
Pesquisa Objetiva
Baixo Objectivo
Alto Objectivo

Parte 2: Fenômeno de inversão

Obter um slide com a letra “e” disponível na sala de aula. Veja o slide com os seus olhos, e depois coloque-o no microscópio. Use a sequência de focagem para ver o diapositivo sob baixa potência.

Procedimento

1. Desenhar a letra “e” como aparece quando olha para o diapositivo sem o microscópio.
2. Desenhar a letra “e” como aparece quando olha para o diapositivo sob o microscópio.
3. Deslocar o diapositivo para a direita usando a alavanca de fase mecânica enquanto olha através dos oculares. Para que lado se move o “e”?
4. Afaste o seu slide para longe de si usando a alavanca de palco mecânica enquanto olha através das oculares. Para que lado se move o “e”?

Diga o fenómeno de inversão nas suas próprias palavras.

Parte 3: Campo de visão

O campo de visão é a quantidade do espécime que você vê quando olha através dos objectivos. O campo de visão diminui com ampliações maiores.

Procedimento

Colocar uma régua de plástico azul através da abertura do palco para que a borda da régua seja visível como uma linha vertical ao longo do diâmetro do campo. Estimar o tamanho do campo em milímetros para cada uma das lentes objetivas.

Scan __________ Baixo (10X) __________ Alto (40X) __________

Parte 4: Profundidade de Foco

A profundidade de foco é a espessura do espécime que permanece em foco a uma determinada ampliação. A profundidade de foco diminui com ampliações maiores.

Procedimento

Obter um slide com roscas coloridas, e visualizá-lo sob varredura ou com baixa potência. Depois, determine qual a rosca de cor:

• No topo
• No meio
• No fundo

Ponte: usando as instruções de focagem, focalize a área onde as três roscas se cruzam. Use o foco fino para discernir a ordem dos fios.

Parte 5: Fazendo uma montagem molhada

Durante o semestre, espera-se que você faça com sucesso uma série de preparações de slides simples chamadas “montagens molhadas”. A amostra a ser observada é colocada sobre uma lâmina limpa, uma gota ou duas de água adicionada, e uma lâmina de cobertura cuidadosamente colocada sobre a água e a amostra. O seu instrutor irá demonstrar esta técnica.

Faça uma montagem húmida da água do tanque seguindo o procedimento abaixo:

1. Coloque uma gota de água do tanque numa lâmina de vidro limpa utilizando a pipeta plástica descartável.
2. Cubra a água do tanque na lâmina de vidro com uma lamela de cobertura. Tente colocar a lamela em ângulo com bolhas de ar ávido.
3. Limpe qualquer excesso de líquido na lâmina.
4. Coloque a lâmina no microscópio para observar o espécime.
   1. Comece na objectiva de varrimento
   2. Mude cuidadosamente para as objectivas baixas e altas conforme necessário.

Esperavelmente verá alguns organismos vivos na água do seu tanque. Se você ver material verde, provavelmente é algum tipo de planta. Olhe para ver se há alguma coisa em movimento. No espaço abaixo, descreva o que você está observando sob o microscópio e faça um desenho simples.

Parte 6: Microscópio de dissecação estereoscópica

O seu instrutor irá demonstrar o uso adequado do microscópio de dissecação. Estes microscópios geralmente dão uma ampliação menor do que o microscópio composto que você está usando.

Procedimento

Veja as amostras disponíveis na tabela de laboratório usando o microscópio de dissecação. Observe que o microscópio tem duas fontes de luz, uma da base e outra de cima. As amostras nem sempre são montadas em uma lâmina. Observe também que quando você visualiza objetos sob o microscópio de dissecação eles são tridimensionais.

Limpeza e Cuidados com o Microscópio

1. Descreva como e com o que você deve limpar a lente do microscópio.
2. Liste quatro coisas que você deve fazer quando terminar de usar o microscópio no final do laboratório.