[Evolução das pesquisas com IGRA]

O progresso da análise genômica em micobactérias incluindo M. tuberculosis (Mtb) nos permitiu encontrar antígenos específicos de Mtb, ESAT-6 e CFP-10, que induzem interferon-gama forte (IFN-gama) a partir de células T sensibilizadas. Logo após a descoberta desses antígenos, testes diagnósticos para infecção por tuberculose (TB) foram desenvolvidos usando esses antígenos. Como o ESAT-6 e o CFP-10 estão ausentes de todos os substratos de BCG e da maioria dos micobactérias não tuberculosos, estes testes diagnósticos não são confundidos com a vacinação com BCG e a infecção da maioria dos micobactérias não tuberculosos. Esses testes diagnósticos são chamados de Ensaios de Liberação Interferon-Gama (IGRAs), e atualmente existem dois testes disponíveis comercialmente. Um deles, QuantiFERON-TB Gold (é chamado de QuantiFERON TB-2G no Japão, QFT-2G) baseado no método ELISA foi aprovado no Japão, e o outro é o T-SPOT. TB que é baseado no método ELISPOT e ainda não foi aprovado no Japão. Como em geral a T-SPOT. A TB mostrou ser mais sensível que o QFT-2G, aprovação da T-SPOT. A tuberculose no Japão seria esperada. No entanto, há muitas questões a serem resolvidas nos IGRAs, uma vez que acabamos de começar a usar estes testes. Um artigo que integrou estas questões foi publicado no ano passado, e seria útil. Neste mini-simpósio, o Dr. Peter Andersen relatou o progresso do desenvolvimento de testes diagnósticos para a infecção pela tuberculose, a possibilidade de distinguir entre a TB ativa e a infecção pela TB latente (LTBI), o que os IGRAs atuais não fazem, e o uso prognóstico do IGRAs (O conteúdo japonês foi relatado pelos presidentes). O Dr. Ariga relatou a aplicação do QFT-2G para outros espécimes que não sangue. Ele também relatou os dados interessantes sobre os quais as células T responderam no QFT-2G. Dr. Higuchi relatou de forma abrangente dados sobre várias questões no teste QFT-2G. Atualmente o uso de IGRAs está se expandindo rapidamente. Sob esta circunstância, seria muito importante entender corretamente as características dos IGRAs. Esperamos que este mini-simpósio possa ajudar a compreender estas questões. 1. Interferon-Gamma Release Assays (IGRA) e antígenos para detecção de infecção latente e predição de doença: Peter ANDERSEN (Departamento de Imunologia de Doenças Infecciosas e o Centro de Pesquisa de Vacinas SSI, Statens Serum Institut, Dinamarca) Um dos desafios mais importantes no controle global da tuberculose é o diagnóstico e tratamento da infecção por tuberculose latente. O método atualmente utilizado para detecção da infecção por tuberculose latente, o teste cutâneo da tuberculina, tem baixa especificidade. A identificação de antígenos específicos para a Mycobacterium tuberculosis para substituir o derivado proteico purificado tem sido, portanto, uma grande prioridade de pesquisa internacional. Realizamos uma avaliação rigorosa do potencial diagnóstico dos antígenos que estão faltando nas cepas da vacina Calmette-Guérin da M. bovis, bem como na maioria das micobactérias não tuberculosas. Identificamos três antígenos com um grande potencial de diagnóstico: ESAT-6, CFP-10 e TB 7.7. Estes antigénios são actualmente utilizados em testes IGRA como o QuantiFERON que medem a produção de interferon-gama a partir de linfócitos T sensibilizados, sinalizando assim uma infecção contínua. Na UE, EUA e Japão, onde estes testes entraram no mercado, o valor desta abordagem no rastreamento de contato tornou-se rapidamente aparente. Vou sugerir que tais testes possam ser modificados para identificar os indivíduos entre os latentemente infectados, com o maior risco de desenvolver uma tuberculose contagiosa activa. O tratamento específico desta parte da população oferece a possibilidade de prevenir a TB antes que ela se torne infecciosa, o que contribuiria grandemente para o controle eventual desta epidemia global. 2. Respostas imunológicas específicas para o M. tuberculosis antigen- sangue periférico e locais de inflamação: Haruyuki ARIGA (National Hospital Organization Tokyo National Hospital) Para desenvolver um método mais preciso de diagnóstico de pleurite tuberculosa ativa, bem como peritonite, meningite e pericardite de origem tuberculosa, estabelecemos um ensaio de liberação de interferon-gama específico para antígenos (IFN-gama) usando amostras de fluido cavitário. Foram estudados 30 pacientes com serosite tuberculosa ativa bacteriologicamente confirmada e 49 pacientes com etiologia não tuberculosa definitiva. A cultura foi realizada durante 18 h com células mononucleares líquidas no sobrenadante do derrame juntamente com peptídeos antigênicos salinos ou Mycobacterium tuberculosis-specific, alvo antigênico secretor precoce 6 e proteína filtrada de cultura 10. As concentrações de IFN-gama nos sobrenadantes da cultura foram medidas por ELISA. Em pacientes com serosite tuberculosa ativa, as respostas antigênicas específicas de IFN-gama de amostras de fluido cavitário foram significativamente maiores do que as de amostras de efusão não tuberosa. A área sob a curva característica operacional do receptor foi significativamente maior para a resposta de fluido cavitário IFN-gama do que para o fluido cavitário adenosina deaminase e o ensaio de liberação de sangue total IFN-gama. O ensaio de liberação de IFN-gama do fluido cavitário poderia ser um método não invasivo para o diagnóstico preciso e imediato de serosite tuberculosa em pacientes nos quais a tuberculose ativa no espaço cavitário é clinicamente suspeita, mas para os quais nenhuma evidência bacteriológica pode ser obtida. 3. Várias questões em IGRAs: Kazue HIGUCHI (Research Institute of Tuberculosis, Japan Anti-Tuberculosis Association). Embora tenha sido recomendado o uso do QFT-2G para investigações de contato na diretriz revisada para investigação de contato no ano passado, há várias perguntas no QFT-2G. Neste mini-simpósio, foram apresentados dados sobre várias questões no teste QFT-2G. Estas incluíram a aplicação do QFT-2G em indivíduos vulneráveis no sistema imunológico como bebês e HIV-positivos, os efeitos da quimioterapia sobre o teste QFT-2G, o prognóstico do desenvolvimento da TB ativa pelo QFT-2G, a próxima geração do QFT-2G, a garantia de qualidade do teste QFT-2G e alguns problemas do atual teste QFT-2G. Deve ser importante pesquisar estas questões e melhorar as IGRAs com base na imunologia básica.